Принципиальные основы метода
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Принципиальные основы метода Для определения по экспериментальным данным кинетических параметров ферментативной реакции – константы Михаэлиса
Здесь Уравнение Михаэлиса-Ментен можно записать в линейных координатах, удобных для обработки экспериментальных данных:
В первом случае зависимость Для определения параметров Начальную скорость ферментативной реакции
Рис. III.4. Зависимость
Рис. III.5. Экспериментальные кривые накопления продукта реакции при различных начальных концентрациях H2O2. Начальная скорость измеряется как тангенс угла наклона линейного участка
Возможно выполнение нескольких вариантов задачи: 1. определение эффективной константы Михаэлиса и максимальной скорости по йодиду калия. 2. определение эффективной константы Михаэлиса и максимальной скорости по пероксиду водорода. 3. определение истинной константы скорости
|
и максимальной скорости 
– используют уравнение Михаэлиса-Ментен:
(III.18)
– начальная скорость реакции, 
– константа Михаэлиса (концентрация субстрата [S], при которой 
= 
(III.19)
(III.20)
(III.21)
от [S] графически изображается прямой с наклоном, равным 
, и отсекаемым на оси ординат отрезком 
(рис. III.2).
по уравнениям (III.20) и (III.21) экспериментальные данные представляют в координатах 
¸ 
или 
¸ 
(рис. III.3 и рис. III.4).
(график Ленгмюра–Хейнса)
.
