Ход работы. Обнаружение проницаемости пограничных слоев цитоплазмы по отношению к тем или иным веществам основано на выдерживании ткани в соответствующих растворах в

Обнаружение проницаемости пограничных слоев цитоплазмы по отношению к тем или иным веществам основано на выдерживании ткани в соответствующих растворах в течение определенного времени с последующим микроскопированием для выявления локализации этих веществ в клетке. Изучение проницаемости тонопласта и плазмалеммы для разных соединений требует специальных методических приемов. Поэтому они рассматриваются конкретно в каждой задаче.

Задача. Изучить проницаемость пограничных мембран цитоплазмы:

 

1) для нейтрального красного. Несколько кусочков бесцветного эпидермиса вогнутой стороны луковичной чешуи поместить на два предметных стекла в каплю воды. Убить клетки на одном из стекол, проведя его несколько раз над пламенем спиртовки. Фильтровальной бумагой убрать воду с обоих стекол и нанести на них по капле 0, 02% раствора нейтрального красного. Через 10 мин убрать краситель, отмыть ткань водой с помощью пипетки, убрать остатки воды, капнуть на стекло 1 М раствор КNО₃. Через 20—30 мин просмотреть клетки под микроскопом. Отметить, одинаковая ли окраска ткани на стеклах, наблюдается ли плазмолиз, какая часть клетки (вакуоль, цитоплазма) окрасилась красителем. (Следует иметь в виду, что среди клеток эпидермиса лука, не подвергавшихся нагреванию, также могут быть нежизнеспособные клетки). Результаты записать по образцу табл. 1.

 

Таблица 1

Общий вид клетки (рисунок)
без нагревания	с нагреванием

2) для индигокармина. Обработать ткань, как указано в задаче 1. Нанести на два стекла по капле 0, 05% раствора индигокармина. Через 20 мин убрать краситель кусочком фильтровальной бумаги и отмыть ткань. Нанести на стекла по капле 1 М раствора КNО₃. Через 20—30 мин просмотреть клетки под микроскопом. Сравнить окраску убитой и живой ткани. Отметить, какая часть клетки (цитоплазма, вакуоль) окрасилась красителем, имеется ли плазмолиз. Результаты записать в табл. 2 (аналогичной таблице 1). Сделать вывод о проницаемости пограничных мембран цитоплазмы живой и убитой клетки для индигокармина.

 

3) для ионов калия. Кусочки эпидермиса выпуклой стороны мясистой чешуи синего лука поместить на предметные стекла в 1 М растворы сахарозы и КNО₃. Через 30—40 мин просмотреть клетки под микроскопом. В варианте с сахарозой вакуоль окружена тонким слоем цитоплазмы, тогда как в КNО₃ слой цитоплазмы, особенно со стороны поперечных стенок, приобретет значительную толщину в виде «колпачков». Требуется объяснить наблюдаемое явление, а результаты (рисунок клетки) записать по форме табл. 3

 

Таблица 3

Действующее вещество	1 М сахароза	1 М КNО3.	1М сахароза + 1 М КNО3.
Общий вид клетки (рисунок)

 

4) для эозина. Кусочки эпидермиса вогнутой стороны чешуи бесцветного лука поместить на предметные стекла в 1 М растворы сахарозы + эозин и КNО₃ с эозином. Через 30 мин просмотреть клетки под микроскопом. Отметить появление колпачкового плазмолиза, окраску вакуоли и цитоплазмы на обоих стеклах. Результаты записать по форме табл. 4;

 

 

Таблица 4

Действующее вещество	1 М сахароза + эозин	1 М КNО3 + эозин
Общий вид клетки (рисунок)

 

Общие результаты работы записать по образцу табл. 5.

 

Таблица 5

Действующее вещество	Нейтральный красный	Индигокармин	Эозин	К+
Плазмалемма Тонопласт

 

Отметить наличие проницаемости пограничных мембран цитоплазмы для вещества знаком «+», а отсутствие ^___ знаком «^___».

Сделать выводы о характере проницаемости пограничных слоев цитоплазмы к различным веществам.