Визначення сахарів за допомогою якісних реакцій
1. Реакція на редукуючі сахари (реакція Фелінга) Це якісна реакція на вільні альдегідні групи в молекулах сахарів. При взаємодії реактиву Фелінга, а саме Cu (OH)2, з альдегідною групою сахарів, остання окислюється до карбоксильної групи і при цьому в осад випадає Cu2O, який має цегляно-червоне забарвлення (рис.2.3)
+ 2CuSO4 + 4NaOH + Cu2O +2Na2SO4 + 2H2O+О2
Рисунок 2.3Реакція Фелінга Тому за допомогою реактиву Фелінга можна знайти тільки редукуючі (що містять вільну альдегідну групу) сахари: глюкозу, мальтозу. Для проведення цієї реакції з сахарозою і крохмалем потрібен їх попередній гідроліз (щоб звільнити зв'язані альдегідні групи). Хід роботи 1.1 Виявлення глюкози і мальтози Беруть в пробірку 1-2 мл фільтратів витяжок цих сахарів, додають рівний об'єм реактиву Фелінга і кип'ятять. За наявності редукуючих сахарів випадає цегляно-червоний осад закису міді. 1.2 Виявлення сахарози Беруть в пробірки 2 проби фільтрату по 10 мл. З однією пробою проводять реакцію Фелінга. Осідання міді не утворюється, оскільки сахароза не є редукуючим сахаром. В другу пробу підливають 2-3 краплі концентрованої сірчаної кислоти. Ретельно перемішують і ставлять на 30 хвилин в киплячу водяну лазню. У присутності кислоти відбувається гідроліз сахарози на моносахари – фруктозу і глюкозу. Через 30 хвилин пробірку знімають з лазні, нейтралізують 10% розчином соди, беруть 1 мл нейтралізованого розчину і проводять реакцію Фелінга. Випадає цегляно-червоний осад закису міді. 1.3 Виявлення крохмалю Беруть в пробірки 2 проби розчину крохмалю по 5 мл. З однією пробою проводять реакцію Фелінга. Осідання міді не утворюється, оскільки крохмаль не є редукуючим сахаром. В другу пробу підливають 2-3 краплі концентрованої сірчаної кислоти. Ретельно перемішують і ставлять на 30 хвилин в киплячу водяну лазню. У присутності кислоти відбувається гідроліз крохмалю на моносахарид глюкозу. Через 30 хвилин пробірку знімають з лазні, нейтралізують 10% розчином соди, беруть 1 мл нейтралізованого розчину і проводять реакцію Фелінга. Випадає цегляно-червоний осад закису міді. Крім того, на крохмаль проводять якісну реакцію з I2 в KI. Ця реакція є якісною на крохмаль. При її позитивному протіканні розчин забарвлюється в синій колір. При нагріванні забарвлення зникає, а при охолоджуванні з'являється знов. 2. Реакція з α -нафтолом 1-2 мл досліджуваного розчину наливають в пробірку, додають 2 краплі 10% розчину α -нафтолу на 70% етиловому спирті, потім до суміші обережно по стінках підливають 2-3 мл концентрованої сірчаної кислоти так, щоб вона опускалася на дно, не змішуючись з рідиною. Через короткий проміжок часу на межі двох рідин утворюється кільце червоно-фіолетового кольору. Цю дуже чутливу реакцію дають всі вуглеводи.
|