Определение числа каталазы в масле
Цель работы: оценка качества масла по его числу каталазы.
Оборудование, реактивы, материалы: аналитические и технические весы, термостат или водяная баня, термометр, электроплитка, колба Эрленмейера вместимостью 250 см3, пипетки вместимостью 10 см3, бюретка, мерный цилиндр вместимостью 50 см3; раствор пероксида водорода с массовой долей 0, 3 %, раствор серной кислоты с массовой долей 10 %, раствор перманганата калия с концентрацией 0, 1 моль/дм3; сливочное масло.
Теоретические сведения
Активность каталазы в испытуемом материале определяют по количеству пероксида водорода Н2О2, которое может быть расщеплено ферментом, путем титрования его перманганатом калия. Реакция идет по уравнению
2КМnО4 + 5Н2О2 + 4Н2SО4 = 2КНSО4 + 2МnSО4 + 8Н2О + 5О2.
По числу каталазы масла судят о его качестве.
Ход работы
В колбу вносят навеску сливочного масла массой 2 г, расплавляют на водяной бане (или в термостате) при 39-40 °С, добавляют 50 см3 дистиллированной воды при той же температуре. Полученную эмульсию тщательно размешивают, охлаждают до 25 °С и добавляют в нее 10 см3 раствора Н2О2. Содержимое колбы перемешивают и оставляют стоять 2 ч при комнатной температуре (20¸ 25) °С. Одновременно ставят вторую колбу при тех же условиях, но с прокипяченной и охлажденной эмульсией масла. Через 2 ч пробы подкисляют 5 см3 раствора Н2SО4 и титруют раствором КМnО4 до не исчезающей приблизительно 30 с розовой окраски. Количество каталазы вычисляют по разности КMnО4, пошедшего на титрование в контрольном и основном опытах, и относят к 100 г масла. Расчет проводят по формуле
К =
где V и V 1 – соответственно объем КMnО4, пошедшего на ти- трование контрольного и опытного растворов, см3; 100 - пересчет на 100 г масла; m – масса навески масла, взятого на анализ, г.
Оформление результатов
Полученные результаты вносят в таблицу.
Контрольные вопросы и задания 1. Какова роль окислительно-восстановительных ферментов в технологии пищевых продуктов? 2. Назовите субстрат для каталазы? Какие продукты образуются в ходе процесса. 3. Как определить активность каталазы в масле? Лабораторная работа № 30
|