Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Опыт № 3 Исследование эмиграции лейкоцитов в ротовой полости человека под влиянием хемотаксинов




Опыт производится в несколько этапов:

1. Взятие смыва полости рта для определения «фоновой» миграции лейкоцитов.

Для этого полость рта очистить, тщательно прополоскав её водопроводной водой в течение 2-х минут. Использовать для этой цели стакан № 1.

Через 10 минут набрать в стакан № 1 с помощью шприца 10 мл физиологического раствора и прополоскать им в течение 2-х минут передний отдел полости рта. Смыв собрать в стакан № 1 и отставить в сторону.

2. Взятие смыва полости рта для исследования эмиграции лейкоцитов после споласкивания рта свежим мясным бульоном.

После проведения первого этапа опыта или взятия «фоновой» порции смыва прополоскать передний отдел рта в течение 2-х минут 5‑ю мл свежего говяжьего бульона. После ополаскивания бульон выплюнуть в раковину.

Через 10 минут после «обработки» ротовой полости бульоном вновь в течение 2-х минут прополоскать передний отдел ротовой полости 10 мл физиологического раствора. Смыв собрать в стакан № 2.

Через 10 минут ещё раз ополаскивают в течение 2-х минут передний отдел ротовой полости 10 мл физиологического раствора. Смыв собрать в стакан № 3.

3. Подсчет лейкоцитов в собранном для исследования материале.

Жидкость в стакане № 1 тщательно перемешать, набирая её в лейкоцитарный меланжер и выдувая обратно 7-10 раз.

В чистый пустой бюкс набрать этим же меланжером перемешанную жидкость до метки 0,5, просушить пипетку марлевой салфеткой. Набрать тем же меланжером до метки 1,0 3 % раствор уксусной кислоты и перенести в бюкс с жидкостью. Смесь перемешать пипеткой и оставить стоять на 5 минут.

Подготовить камеру Горяева для подсчета форменных элементов.

Заполнить камеру смесью из стакана № 1. Поместить камеру на предметный столик микроскопа, используя окуляр 15, объектив 8, найти сетку и подсчитать лейкоциты в 100 больших квадратах (рис. 1).

Внимание! В счетной камере кроме лейкоцитов встречаются клетки плоского эпителия, остатки пищи, которые необходимо отличать от лейкоцитов и не следует считать.

 


Определить содержание лейкоцитов в 1 мкл исследуемой жидкости по формуле:

Количество лейкоцитов = а·4000·3
1600

 

где:

1600 – число малых квадратов в 100 больших квадратах в сетке Горяева;

1/4000 – объём 1 малого квадрата в мм;

3 – разведение исследуемой жидкости;

а – сумма сосчитанных лейкоцитов.

Для получения результата достаточно практически умножить количество сосчитанных лейкоцитов на 7,5, т. е.

Количество лейкоцитов = а·7,5

Используя описанную методику, подсчитать содержание лейкоцитов в смывах №2 и №3.

Определить индекс эмиграции лейкоцитов (ИЭЛ) для проб №2 и №3 по формуле:

 

Лх1 · 100%
Л1

где: Л1 – число лейкоцитов в «фоновой» пробе;

Лх – число лейкоцитов после ополаскивания бульоном (стаканом №2 и №3).

 

Таблица 1

Влияние мясного бульона на эмиграцию лейкоцитов

 

  № испытуемого До полоскания бульоном, «фоновая» После полоскания бульоном
Через 10' Через 20'
Число лейкоцитов в 1 мкл смыва ротовой полости.        
ИЭЛ (индекс эмиграции лейкоцитов).        

Рис. 2 Кривая эмиграции лейкоцитов при действии мясного бульона на слизистую оболочку полости рта.

 

 

Обсудите результаты и сделайте выводы, ответив на вопросы:

1. Проявлением какого вида реактивности являются наблюдаемые изменения?

2. Каков механизм наблюдаемых реакций организма у испытуемых?

3. Какую форму индивидуальной реактивности (нормэргическую, гиперэргическую, гипоэргическую) вы наблюдали?







Дата добавления: 2014-11-10; просмотров: 913. Нарушение авторских прав


Рекомендуемые страницы:


Studopedia.info - Студопедия - 2014-2020 год . (0.001 сек.) русская версия | украинская версия