Лабораторная диагностика. Материал для исследования берется различный, но при всех клинических формах обязательно исследуются фекалии
Материал для исследования берется различный, но при всех клинических формах обязательно исследуются фекалии. Возможно использовать экспресс-методы для обнаружения возбудителя в материале – МИФ, а также ИФА для выявления антигенов бактерий. Основным в диагностике является бактериологический метод. Первичный посев исследуемого материала производят в консервант – фосфатный буфер или жидкую среду накопления Серова. Посевы выдерживают в холодильнике до 30 суток (методика «холодового обогащения»). Это связано с тем, что иерсинии способны размножаться при 4-6оС, тогда как рост сопутствующей микрофлоры прекращается. Из первичного посева каждые 3-4 дня делают высевы на плотные среды, например Эндо, МакКонки или в плотную среду Серова. Выращивание производят при комнатной температуре. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар или на сектора среды Эндо. Выделенную культуру идентифицируют по комплексу морфологических, культуральных, биохимических, серологических свойств, фаголизабельности. Обязательно дифференцируют от возбудителя чумы (Y. pestis) и от возбудителя кишечного иерсиниоза (см. табл. 10). Бактериологический метод позволяет выделить возбудителя только при его достаточном содержании в материале (не менее 103-106 клеток). В случае невысокого содержания возбудителей применяют биобактериологический метод. Для накопления иерсиний материалом заражают белых мышей или морских свинок с последующим выделением и идентификацией культуры. Серологический метод. Применяется на 7-14 дни болезни. Ставится реакция агглютинации (титр 1:200) или в более ранние сроки – РПГА (титр 1:100) с набором эритроцитарных диагностикумов, несущих антигены разных типов иерсиний. Реакция ставится в динамике заболевания, регистрируется нарастание титра антител. Для экспресс-определения ДНК вирулентных штаммов иерсиний непосредственно в материале в настоящее время разработаны методы ПЦР-анализа.
Таблица 10.
Дифференциация возбудителей псевдотуберкулеза от возбудителей чумы
|