Другие хроматографические параметры

Количество вещества, вымываемого из колонки, можно найти по площади под кривой элюирования:

,

где с – концентрация, ммоль/мл; V – объем, мл.

Полезным параметром в хроматографии может быть коэффициент удерживания (замедления) R – отношение скорости движения вещества к скорости m:

,

 

где L – длина колонки. Величина R показывает, какую долю времени вещество находится в подвижной фазе.

.

Для неудерживаемого вещества t и R = 1. Если время пребывания в подвижной и неподвижной фазах одинаково (t ), то R = 0,5. Очевидно, что R можно выразить через V :

.

Любой процесс распределения вещества между двумя фазами характеризуют коэффициентом распределения D. В данном случае:

,

 

где с и с - концентрации вещества в подвижной и неподвижной фазах соответственно. Коэффициент распределения связан с хроматографическими параметрами. Действительно, отношение времени пребывания вещества в неподвижной и подвижной фазах равно отношению количеств вещества в фазах сV:

 

.

 

Преобразовываем и получаем:

.

 

Также можем получить:

 

. (*)

Произведение называют коэффициентом емкости k , из экспериментальных данных его вычисляют по формуле:

 

или .

 

Эта величина показывает, во сколько раз вещество дольше находится в неподвижно фазе, чем в подвижной; оптимальные значения k лежат в пределах 1,5 – 4. Если коэффициент распределения мал, то мало и значение k , т. е. вещество слабо удерживается и продвигается по колонке практически с той же скоростью, что и подвижная фаза. Если же коэффициент емкости слишком велик, то время пребывания вещества в колонке будет большим и на анализ потребуется много времени.

Видно, что исправленный удерживаемый объем связан с D простым соотношением:

. (**)

 

Выражения (*) и (**) – основные уравнения хроматографии, показывающие, что пропорционален величине D и объему неподвижной фазы колонки . Величина зависит от количества неподвижной фазы, нанесенной на единицу объема или массы сорбента, от длины и диаметра колонки. Сравнительно большие различия в значениях свидетельствуют о полном их разделении.