Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Белки слюны




В слюне белка содержится от 1,5 до 4,0 г/л. Методом двумерного электрофореза определено присутствие в слюне около 500 различных пятен, характеризующих различные белки и полипептиды. Из них только 120-150 являются секреторными, т.е. попадают из больших и малых слюнных желез, а остальные имеют бактериальное и клеточное (из форменных элементов и лейкоцитов) происхождение.

Таблица 4.2

Гликопротеины Молекулярная масса в кДа Содержание в %
п/и       Белки Углеводы
1. Макромолекулярные гликопротеины (МГП 500-1000 30-50 50-70
2. Анионные гликопротеины (АГП) 500-1000
3. Катионные гликопротеины (КГП) 36,5
4. Фосфосодержащие гликопротеины (ФГП)
5. Димер IgA
6. Секреторный компонент IgA (SK, CK)

Слюнные белки способны объединяться как между собой, так и с неорганическими компонентами, создавая тем самым определенную внутреннюю среду ротовой полости. Они смогут выполнять одну или несколько функций, что свидетельствует об их полифункциональности.

Некоторые слюнные белки охарактеризованы (табл.4.2), у них определен аминокислотный состав, биологическая значимость.

Гликопротеины слюны. Характеризуя белки слюны, без преувеличения можно сказать, что большинство их является гликопротеинами, в которых количество углеводов достигает 4-40%. Секреты различных слюнных желез содержат гликопротеины в различных пропорциях, что и определяет разницу в их вязкости. Так, наиболее вязкая слюна - секрет подъязычной железы (коэффициент вязкости - 13,4), затем подчелюстной (3,4) и паротидной (1,5).

Синтез гликопротеинов слюны протекает в несколько стадий. Вначале синтезируется белковое ядро, к которому затем присоединяются углеводные цепи. В условиях стимуляции могут синтезироваться неполноценные гликопротеины и слюна становится менее вязкой. Слюнные гликопротеины неоднородны.

Макромолекулярные гликопротеины.(МГП) Для этих белков характерна высокая степень гидратированности. Присоединение и связывание воды МГП определяется:

1) большими размерами белковой молекулы;

2) зарядом радикалов внутримолекулярных аминокислот;

3) присутствием полярных углеводных цепей.

Белковая часть МГП содержит большое количество остатков серина, треонина, пролина и аланина. Олигосахаридные цепи связываются с гидроксильной группой серина и треонина О-гликозидной связью. МГП совместно с анионными гликопротеинами обеспечивают вязкость слюны, которая осуществляет защиту слизистой оболочки полости рта от механических, температурных, химических и бактериальных воздействий. Они увлажняют и обволакивают пищевой комок, что облегчает его прохождение в глотку и пищевод. Среди МГП наиболее исследованы группоспецифические вещества и муцин.

Группоспецифические вещества. В 1900 году Ландштейнер описал группы крови АВО. На сегодняшний день известно более 20 систем групп крови, экспрессирующих более 160 различных антигенов. В наибольшей степени изучены группы крови АВН(О) и система Льюиса. Вещества, обладающие антигенной специфичностью А, В и определяющие группу крови, прочно связаны в эритроцитах со специфическими мембранными белками О-гликозидными связями и не могут быть извлечены из их стромы ни водой ни солевыми растворами. Специфические олигосахариды, образующие данные антигены присутствуют в трех формах:

1) в виде сфинголипидов и гликопротеинов на поверхности эритроцитов;

2) в виде олигосахаридов в молоке и моче;

3) в виде олигосахаридов, связанных с муцинами, секретируемыми в желудочно-кишечном, мочеполовом и дыхательном трактах.

Слюнные группоспецифические вещества в отличие от эритроцитарных гликолипидов содержат до 85% углеводов и 15% белка. Антигенная специфичность группоспецифических веществ определяется строением некоторых остатков сахаров, разложенных на концах углеводных цепей. Так, цепь антигена A заканчивается остатком N-ацетилгалактозамина, а цепь антигена В остатком галактозы. Во всем остальном обе цепи одинаковы. Следует отметить, что между галактозой и остатком N-ацетилгалактозамина может иметься β-1,3 – связь (цепи типа 1) или β-1,4-связь (цепи типа 2) и такие цепи могут обладать как А- так и В-специфичностью. Цепи с Н-специфичностью отличаются от цепей А и В лишь тем, что в них отсутствуют терминальные остатки N-ацетилгалактозамина и галактозы.

Встречаются индивидуумы, у которых гликопротеины, содержащиеся в секретах, лишены характерной специфичности А, в или Н. Людей можно разделить по этому признаку на две четко разграниченные группы. У представителей одной из них, так называемых "секретеров", слюна и другие секреты обладают специфичностью А, В и Н, тогда как у представителей второй группы ("не - секреторы") эта специфичность отсутствует. Около 80% европейцев являются "секреторами" и около 20% -"не - секреторами". Секреторный статус данного индивидуума постоянен и детерминирован генетически.

На биосинтез и, следовательно, также на антигенную специфичность водорастворимых гликопротеинов, влияет еще один генный локус - локус Lewis (Lе). Секреты или эритроциты, обладающие Lе - специфичностью, обозначают Lе(а+), а те, которые ею не обладают, Lе(а-). Известно, что Lе-активность в секретах значительно более выражена у "не - секреторов", чем у "секреторов".

Концентрация группоспецифических веществ в слюне равна 10-130 мг/л. Они, в основном, поступают с секретом малых слюнных желез и точно соответствуют группе крови, исследование группоспецифических веществ в слюне используется в судебной медицине для установления группы крови в тех случаях, когда это невозможно сделать иначе.

Муцин слюны.

Вязкость слюны прямо связана с муцином. Муцины также входят в состав секретов бронхов и кишечника, семенной жидкости и выделений шейки матки. Все они играют роль смазки и, кроме того, защищают подлежащие ткани от повреждений, как механических, так и химических.

В полипептидной цепи муцина из подчелюстной слюнной железы содержится большое количество серина и треонина, их насчитывается около 200 на одну полипептидную цепь. Третьей, наиболее часто встречающейся аминокислотой, в муцине является пролин и поэтому гликозилированные участки им очень богаты. К остаткам серина и треонина через О-гликозидную связь присоединены остатки N-ацетилнейраминовой кислоты, N-ацетилгалактозамина, фукозы и галактозы. Сам белок напоминает по своему строению гребенку: короткие углеводные цепи, как зубья, торчат из жесткой, богатой пролином полипептидной основы. Эти подобные гребенке структуры с помощью дисульфидных мостиков между белковыми глобулами и создают большие молекулы протеина с особыми вязкими свойствами.

Рис. 4.2 структура слюнного муцина Сиаловая кислота N-ацетилглюкозамин

Анионные гликопротеины(АГП).

Из секрета поднижнечелюстных слюнных желез был выделен кислый белок, содержащий большое количество остатков серина (18 сер на 100 амк) и 600-800 дисахаридных цепей. Терминальное положение в олигосахаридных цепях АГП представлено остатками N-ацетилнейраминовой кислоты.

Высокое содержание N-ацетилнейраминовой кислоты в АГП обеспечивает защиту тканей полости рта от вирусной инфекции. Известно, что патогенные вирусы выделяют нейраминидазу и с ее помощью фиксируются на мембране клеток хозяина. Остатки N-ацетилнейраминовой кислоты в АГП выполняют роль рецепторов для связывания нейраминидазы вирусов. Вирусы, контактируя с АГП, теряют свою вирулентность и со слюной попадают в пищеварительный тракт, где расщепляются пищеварительными ферментами.

Катионные гликопротеины.(КГП)

КГП были выделены из секрета околоушных желез. Они составляют 25% общего белка и 75% всех углеводов, присутствующих в паротидной слюне. КГП содержат большое количество остатков лизина, аргинина и гистидина и поэтому при физиологических значениях рН заряжены положительно. Кроме того, в этих белках определяется высокое содержание пролина (74 на 100 амк), глицина (46 остатков на 100 амк), глутамина (46 на 100 амк) и аспарагина. Углеводная часть КГП представлена остатками N-ацетилгалактозамина, L-фукозы и галактозы. Углеводные цепи к белку присоединены через N-гликозидную связь.

После секреции слюнными железами КГП адсорбируются на поверхности эмали зуба и формируют основную часть зубной пелликулы. Адсорбция КГП на зубных поверхностях осуществляется путем взаимодействия положительно заряженных радикалов аминокислот с отрицательно заряженными фосфатами гидроксиаппатитов минерализованных тканей зуба. Начало адсорбции КГП на поверхности эмали сопровождается изменением конформации КГП с последующим переходом в плохо растворимую форму. Это связано с тем, что осевшие бактерии выделяют гликозидазы, которые и расщепляют цепи КГП.

Фосфосодержащие гликопротеины (ФГП).

Содержат до 1% ортофосфата, который присоединяется к остаткам серина, треонина или к аминогруппе аргинина. Фосфаты защищают пептидные связи в ФГП от гидролиза и обеспечивают высокое сродство ФГП к ионам кальция кристаллической решетки гидроксиаппатитов. Они вместе с КГП формируют приобретенную пелликулу зуба.

Лактоферрин – гликопротеин, содержащийся во многих секретах. Особенно его много в молозиве и слюне. Он связывает Fe3+бактерий и нарушает окислительно-восстановительные реакции в бактериальных клетках, оказывая тем самым бактериостатическое действие.

Иммуноглобулины слюны.

В слюне присутствуют все 5 классов иммуноглобулинов-IgA, IgAs, IgG, IgM, IgE. Как известно, все иммуноглобулины различаются по молекулярной массе, конфигурации, углеводному компоненту, и состоят из 2-х типов полипептидных цепей - Н (тяжелая цепь) и L (легкая цепь). Иммуноглобулины A можно разделить на 2 подкласса, а иммуноглобулины G на четыре. Иммуноглобулин A1 содержится, преимущественно, в плазме крови и соответствует типу строения, который описывается 4-х цепочечной моделью, как димер.

Секреторный иммуноглобулин А (IgAs, IgA2) образуется плазматическими клетками, находящимися в анатомической связи с эпителием слизистых оболочек и ацинарных клеток слюнных желез. Синтезированный в плазматических клетках димер IgА, состоит из 2Н, 2L и J цепей затем покидает их и связывается с секреторным компонентом IgAs(СК, SР). Секреторный компонент (гликопротеин с м.м. 80 кДа) образуется в слюнных железах и располагается на плазматической мембране ацинарных клеток в качестве рецептора. Образовавшийся комплекс димер АgА-SР путем пиноцитоза перемещается к апикальной части клетки и поступает в слюнные протоки.

Околоушные слюнные железы поставляют 90% IgAs, а поднижнечелюстные только 10% IgAs. Секреторный компонент IgAs защищает молекулу антитела от разрушения ферментами различных клеток, а также повышает ее устойчивость к воздействию денатурирующих факторов. IgAs по своей активности превосходит все другие иммуноглобулины. Свое антибактериальное действие он оказывает не связываясь с комплементом. Считается, что комплемент заменяется на лизоцим.

Цельная слюна у взрослых содержит от 30 до 160 мкг/мл IgAs, все другие иммуноглобулины определяются в количестве меньшим, чем 1 мкг/мл, поскольку они поступают из плазмы крови путем простой транссудации через малые слюнные железы и зубо-десневую бороздку. Следовательно, IgЕ, IgG, IgМ имеют двойное происхождение. Дефицит IgAs встречается в одном случае на 500 человек и сопровождается частыми вирусными инфекциями.

В секретах слюнных желез обнаружено несколько специфических слюнных белков, характеризующихся преобладанием одной или нескольких аминокислот. К ним относятся белки богатые пролином, белки богатые тирозином, белки богатые гистидином и цистатины.

Белки богатые пролином (РRР). Впервые об этих белках в 1971 году сообщил Оппенхеймер. Они были открыты в паротидной слюне и составляют до 70% от общего количества всех белков в этом секрете. Молекулярная масса РRР колеблется от 6 до 12 кДа. Исследование аминокислотного состава выявило, что 75% от общего числа аминокислот приходится на про, гли, глу, асп. Это семейство белков представлено несколькими белками, которые можно разделить по их свойствам на 3 группы: 1) кислые PRP; 2) основные PRP; 3) гликозилированные PRP.

Белки богатые пролином выполняют в полости рта несколько функций. В первую очередь они легко адсорбируются на поверхности эмали и являются компонентами приобретенной пелликулы зуба. Кислые PRP, входящие в состав пелликулы зуба, задерживая деминерализацию зуба и ингибируя излишнее осаждение минералов, поддерживают постоянство кальция и фосфора в эмали зуба. Кроме того, кислые и гликозилированные PRP способны связывать определенные микроорганизмы и тем самым участвуют в образовании микробных колоний бляшки. Гликозилированные PRP также необходимы для смачивания пищевого комка. Роль основных PRP пока до конца неясна. Однако, предполагается, что они играют определенную роль в связывании танинов пищи и тем самым защищают слизистую оболочку полости рта от их повреждающего действия, а также придают вязко-эластические свойства слюне.

Белки богатые гистидином (гистатины HRP). Из секретов околоушных и подчелюстных слюнных желез человека выделено семейство основных полипептидов, отличающихся большим содержанием гистидина. Эта группа включает 12 полипептидов. Исследование первичной структуры гистатинов показало, что они состоят из 7-38 аминокислотных остатков и имеют большую степень сходства между собой. Гистатины 1 и 2 значительно отличаются от других членов этого семейства белков. Считается, что гистатин 2 является фрагментом гистатина 1, а гистатины 4-12 образуются при гидролизе гистатина 3 при участии ряда протеиназ, в частности, калликреина. Предполагается, что образование гистатинов путем ограниченного протеолиза происходит либо в секреторных везикулах, либо при прохождении белков через железистые протоки.

Хотя биологические функции гистатинов окончательно не выяснены, уже установлено, что гистатин 1 участвует в образовании приобретенной пелликулы зуба и является мощным ингибитором роста кристаллов гидроксиапатитов в слюне. Смесь очищенных гистатинов подавляет рост некоторых видов Str.mutans. Гистатин 5 вовлечен в процесс подавления слюной вируса иммунодефицита и грибков (Candida albicans). Считается, что одним из механизмов такого антимикробного и антивирусного действия является взаимодействие гистатина 5 с различными протеиназами, выделенными из микроорганизмов ротовой полости.

Статерины. Statherin (белки богатые тирозином). Из секрета околоушной слюнной железы выделен фосфопротеин, состоящий из 43 аминокислот. Он вместе с другими секреторными белками ингибирует спонтанную преципитацию фосфорнокальциевых солей на поверхности зуба, в ротовой полости и в слюнных железах.

Цистатины. В 1984 году две группы японских исследователей независимо друг от друга сообщили о присутствии в слюне еще одной группы секреторных белков - цистатинов.

Цистатины синтезируются в серозных клетках околоушных и подчелюстных слюнных желез. Всего обнаружено 8 слюнных цистатинов. Цистатины - кислые белки с молекулярной массой 9,5-13 кДа. Они ингибируют активность цистеиновых протеиназ. К цистеиновым протеиназам относятся катепсины В, Н, L и другие протеиназы, у которых в активном центре присутствует остаток аминокислоты цистеина.

Помимо ингибирующей активности цистатин SA-III содержит 4 остатка фосфосерина и возможно он вовлекается в связывание фосфорнокальциевых соединений с эмалью зуба, и часть цистатинов определена в приобретенной пелликуле зуба. Высокая степень присоединения SAI, SAIII вероятно связана с тем, что цистатины имеют сходство в аминокислотной последовательности с другими адгезивными белками - фибронектином и ламинином. Сходный участок включает около 100 аминокислотных остатков и находится в ламинине вблизи участка связывания с клетками.

Считается, что через ингибирование активности цистеиновых протеиназ слюнные цистатины выполняют антимикробную и антивирусную функции. Они также защищают белки слюны от энзиматического расщепления, поскольку секреторные белки могут функционировать только в интактном состоянии.

Альбумин. В смешанной слюне этот белок определяется в небольшом количестве. В слюну альбумин попадает из плазмы крови с десневой жидкостью, а также вместе с RPR в секрете околоушных слюнных желез. Количество альбумина в слюне может меняться при стоматитах и ряде других заболеваний, например, хроническом панкреатите.

Ферменты слюны. В смешанной слюне определяется активность более 100 ферментов (табл. 4.3), различных по происхождению и выполнению биологических функций.

Гликозидазы. В слюне определяется активность эндо- и экзогликозидаз. К эндогликозидазам в первую очередь относится α-амилаза слюны и лизоцим.

α-Амилаза. Слюнная α-амилаза расщепляет 1—4 гликозидные связи в крахмале и гликогене. По своим иммунохимическим свойствам и аминокислотному составу слюнная α-амилаза очень сходна с панкреатической амилазой. У обеих амилаз определяется 94% сходства в аминокислотной последовательности. Определенные различия между этими амилазами обусловлены тем, что слюнная и панкреатическая амилазы кодируются различными генами (АМУ1 и АМУ2). α-Амилаза выделяется с секретом паротидной железы, где концентрация ее составляет 648-803 мкг/мл и не зависит от возраста, но меняется в течение суток и зависит от чистки зубов и приема пищи.

Таблица 4.3

Лизоцим. Гидролизует гликозидную связь между С-1 N-ацетилмурамовой кислотой (NАМ) и С-4 N-ацетилглюкозамина (NАС), которые формируют полисахарид муреин клеточной стенки бактерий. Фермент представляет собой одну полипептидную цепь из 129 аминокислотных остатков и массой 14,6 кДа. Стабильность фермента обеспечивают четыре поперечных дисульфидных мостика. Лизоцим определяется не только в слюне, но и в десневой жидкости, слезах, курином белке, и является компонентом неспецифической антибактериальной защиты. Активность этого фермента в ротовой полости может уменьшаться при тяжелых формах пародонтита.

Другие гпикозидазы. В смешанной слюне определяется активность еще нескольких гликозидаз, это α-L-фукозидазы, α и β-гликозидаз -, α и β-галактозидаз, α-D-маннозидаза, β-глюкуронидазы, β-гиалуронидазы, β-N-ацетилгексозаминидазы, нейраминидазы. Все они имеют различное происхождение и разные свойства. Если α-L-фукозидаза выделяется с секретом околоушной железы и расщепляет (α 1→2 связи) в коротких олигосахаридных цепях, то β-N-D-ацетилгексозаминидаза содержится как в смешанной слюне, так и в секретах больших слюнных желез, и образуется смешанной культурой микрофлоры полости рта.

α и β-Глюкозидазы, α и β-галактозидазы, β-глюкуронидаза, нейраминидаза и гиалуронидаза имеют бактериальное происхождение и наиболее активны в кислой среде. β-D-гиалуронидаза катализирует гидролиз β 1,4 связей в гиалуроновой кислоте, хондроитинсульфате и дерматансульфате. Изменение гиалуронидазной активности в слюне и десневой жидкости коррелирует с повышением числа Гр+ бактерий и возрастает при воспалении десны. Вместе с гиалуронидазной активностью возрастает активность β-глюкуронидазы, которая в норме подавляется ингибитором β-глюкуронидазы, поступающего из плазмы крови. Хотя активность кислых гликозидаз в слюне невелика, все же было показано, что слюнные гликозидазы расщепляют белково-гликозидные группы в слюнных муцинах. Во время инкубации слюны при 37°С из слюнных муцинов быстро образуются сиаловые кислоты и аминосахара.

Пероксидаза.

Слюнная пероксидаза (СПО) катализирует окисление тиоцианатов (SCN-) путем расщепления H2O2 образованием -ОSСN (гипотиоцианат) и НOSСN, которые оказывают антимикробное действие. В цельной смешанной слюне определяется две разных группы СПО, имеющих ИЭТ в кислой и щелочной средах. Фермент с ИЭТ в щелочной среде образуется в околоушной и подчелюстной слюнных железах и представлен множественными формами с м.м. 78; 80 и 28 кДа. Это гликопротеин, т.к. содержит до 4,6% углеводов. Поскольку СПО содержит гем, она также относится к гемопротеинам.

Бактерии зубной бляшки, мелкие слюнные железы и эпителиальная выстилка лишены этого фермента.

В процессе очистки и выделения СПО было обнаружено, что фермент находится в комплексе с одним из белков богатых пролином. Образование этого комплекса неясно. Изучение кинетик равновесного состояния окисления тиоцианата (SСN-), катализируемого СПО позволиловыяснить, что, механизм окисления SСN- включает несколько реакций. Окисление начинается с рН независимого окисления фермента Н2О2 с последующим образованием соединения I, которое затем протонируется и вызывает окисление SСN-. Эта реакция также независима от значения рН. Однако, второе протонирование соединения I порождает образование неактивного продукта. Наибольшее окисление SСN- СПО протекает при рН = 5-6. Это имеет определенное значение, поскольку кинетические свойства СПО показывают, что ее антибактериальный эффект увеличивается при кислых значениях рН. Известно, что Str.mutans наиболее чувствителен к ингибированию гипотиоцианатом при рН < 7,0, что позволяет говорить о том, что таким способом включается пероксидазная система слюны и ее антибактериальные свойства при кислых значениях рН увеличиваются до предела. Это формирует в свою очередь опасность деминерализации твердых тканей зубов хозяина.

Образовавшийся гипотиоционат оказывает в 10 раз более мощное антибактериальное действие, чем Н2О2. При спонтанном распаде Н2О2 образуются реакционные формы О2, гидроксидный радикал, супероксидный анионрадикал. O2-; ОН-; OSCN- совместно воздействуют на ненасыщенные жирные кислоты (ПНЖК), белки и нуклеиновые кислоты, что приводит к образованию продуктов свободно радикального окисления, нарушению структур клеток и их гибели.

Таким образом, биологическая роль СПО в полости рта заключается в том, что с одной стороны продукты окисления тиоцианатов ингибируют рост и метаболизм лактобацилл и некоторых других микроорганизмов, а с другой стороны предотвращают аккумуляцию H2O2многими видами стрептококков полости рта, а также клетками хозяина. Интересно, что антимикробная активность СПО модулируется углеводными компонентами смешанной слюны. Глюкозамины и сахароза стимулируют образование Н2О2.

Протеиназы слюны.

В слюне определяется невысокая активность протеиназ, рН оптимум которых находятся в кислой и слабощелочной среде. Низкая их активность в норме связана с присутствием в слюне ингибиторов протеиназ белковой природы. Из слабощелочных трипсиноподобных протеиназ в слюне наиболее активен калликреин. Кислые протеиназы представлены катепсинами D и В, активность которых увеличивается при гингивитах и пародонтитах.

Ингибиторы протеиназ. В смешанной слюне человека определяется активность α1-ингибитора протеиназ (α1-ПИ), α2-макроглобулина (α2-М), цистатинов и низкомолекулярных кислотостабильных ингибиторов трипсиноподобных протеиназ (КСИ).

α1-ИП поступают в ротовую полость из сыворотки крови и определяется только в одной трети исследуемых образцов слюны. Это одноцепочечный белок, состоящий из 294 амк, синтезируется в печени а виде предшественника. α1-ИП ингибирует эластазу, коллагеназу, плазмин, калликреин, микробные сериновые протеиназы.

α2-макроглобулин - поливалентный ингибитор протеиназ. Это гликопротеин с м.м. 725 кДа, состоящий из 4-х субъединиц. Синтезируется в печени и поступает из сыворотки крови в слюну у 10% обследуемых. В последние годы выполнены исследования, раскрывающие механизм взаимодействия α2-М с протеиназами. На первом этапе активная протеиназа (П) реагирует с определенным участком молекулы α2-М. При этом образуется непрочный комплекс α2-М-П. На втором этапе фермент расщепляет специфическую пептидную связь (приманку), что приводит к конформационным изменениям молекулы белка (α2-М). На третьем этапе протеиназа ковалентно присоединяется к особому участку в молекуле α2-М, что сопровождается образованием более компактной структуры.

В слюнных железах человека и животных содержатся ингибиторы типа семейства Кунитца и другие кислотостабильные ингибиторы протеиназ. Это низкомолекулярные белки с м.м. от 6,5 до 10 кДа, они ингибируют калликреин, трипсин, эластазу, катепсин G. В смешанной слюне часть этих ингибиторов находятся в комплексе с протеиназами (около 15%), а другая часть в свободном состоянии. Слюнные железы животных используют для получения ингибиторов протеиназ как лекарственных препаратов. Они выпускаются фирмами под названиями "трасалол", "контрикал", "гордокс" и др.

Из подчелюстных слюнных желез кошки выделен двуглавый ингибитор протеиназ, который имеет 2 центра связывания с ферментами. Один центр связывал трипсин, а второй химотрипсин.

Вполне возможно, что часть ингибиторов трипсиноподобных протеиназ в смешанную слюну поступает не только из слюнных желез и плазмы крови, но из лейкоцитов, десны и микроорганизмов.

Щелочная и кислая фосфатазы.

Кислая фосфатаза (рНopt= 4,8) отщепляет неорганический фосфат от органических соединений.

Фермент в смешанную слюну попадает с секретами больших слюнных желез, а также из бактерий, лейкоцитов и эпителиальных клеток. В слюне определяется до 4 изоферментов кислой фосфатазы. Кислая фосфатаза слюны по своим свойствам близка к ферменту из простаты, но не из плазмы крови. Активность фермента в слюне, как правило, увеличивается при пародонтите, гингивите. Имеется противоречивые сведения об изменении активности этого фермента при кариесе зубов.

Щелочная фосфатаза (рНopt= 9,1-10,5). Активность фермента очень низка в секретах слюнных желез и ее происхождение в слюне связывают с клеточными элементами.Активность этого фермента, как и кислой фосфатазы, может увеличиваться при воспалении мягких тканей полости рта, кариесе. Однако, полученные данные очень противоречивы и не всегда укладываются в какую-то определенную схему. Вместе с тем, выявлено, что повышенная растворимость эмали при использовании реминерализующей терапии совпадает с высокой активностью слюнной щелочной фосфатазы.

Низкомолекулярные органические вещества ротовой жидкости.

Липиды. Общее количество липидов в слюне невелико. Оно непостоянно и считается, что большая их часть поступает с секретом околоушной и подчелюстной желез и только около 2% из плазмы и клеток. Так, количество общих липидов в нестимулированном секрете околоушной железы не превышает 60-70 мг/л. Часть слюнных липидов представлена свободными длинноцепочечными насыщенными и полиненасыщенными жирными кислотами - пальмитиновой, стеариновой, эйкозопентаеновой (С20:5) олеиновой (C18:1) и др. Кроме жирных кислот в слюне определяются свободный холестерин и его эфиры (около 28% от общего количества), триацилглицеролы (около 40-50%) и в очень небольшом количестве глицерофосфолипиды. Следует отметить, что данные о содержании и характере липидов в слюне неоднозначны. Это связано в первую очередь с методами очистки и выделения липидов, а также способом получения слюны, возрастом доноров и др. факторами.

Мочевина. Мочевина в полость рта поступает с секретами слюнных желез. Наибольшее ее количество выделяется малыми слюнными железами (28,0 ммоль/л), затем околоушными слюнными железами (25 ммоль/л) и подчелюстными слюнными железами (10,0 ммоль/л). Количество выделяемой мочевины зависит от скорости слюноотделения и обратно пропорционально количеству выделенной слюны. Известно, что уровень мочевины в слюне повышается при почечных заболеваниях. Мочевина в полости рта расщепляется при участии уреолитических бактерий осадка слюны. Освобождающееся количество аммиака влияет на рН зубной бляшки и смешанной слюны (способствует подщелачиванию).

Помимо мочевины в слюне определяется мочевая кислота. Содержание ее в слюне (до 0,18 ммоль/л) отражает концентрацию в сыворотке крови. В слюне также присутствует креатинин в количестве 2-3 мкмоль/л. Все эти вещества определяют уровень остаточного азота в слюне.

Слюна содержит лактат, пируват и другие органические кислоты, нитраты и нитриты. В осадке слюны в 2-4 раза больше содержится лактата, чем в жидкой ее части, в то время как пируват определяется больше в надосадочной жидкости. Увеличение содержания органических кислот, в частности, лактата в слюне, и зубном налете способствует очаговой деминерализации эмали и развитию кариеса. С пищей, табачным дымом, водой в слюну поступают нитраты (NО3-) и нитриты (NO2-). Нитраты при участии нитратредуктазы бактерий превращаются в нитриты. Содержание нитритов зависит от курения. Показано, что при лейкоплазии слизистой оболочки полости рта у курильщиков и лиц занятых в табачном производстве в слюне растет количество нитритов и активность нитратредуктазы. Образовавшиеся нитриты в свою очередь могут вступить в реакцию со вторичными аминами (аминокислоты, лекарства) с образованием канцерогенных нитрозосоединений. Эта реакция протекает в кислой среде, а ускоряют ее добавленные в реакцию тиоцианаты.

Углеводы. Углеводы в слюне находятся, преимущественно, в связанном состоянии с белками. Свободные углеводы появляются после гидролиза полисахаридов и гликопротеинов ферментами бактерий слюны и α-амилазой. Однако, образовавшиеся моносахара (глюкоза, галактоза, манноза, гексозамины) и сиаловые кислоты быстро утилизируются микробами ротовой полости и превращаются в органические кислоты. Часть глюкозы может также поступать с секретами слюнных желез и отражать концентрацию глюкозы в плазме крови. Поэтому, при тяжелых формах сахарного диабета количество глюкозы в паротидной слюне возрастает параллельно с увеличением в плазме крови. В смешанной слюне количество глюкозы превышает 0,06-0,17 ммолъ/л.

Гормоны. В слюне определяется целый ряд гормонов, в основном, стероидов. В слюну они попадают из плазмы крови через слюнные железы, десневую жидкость, а также при приеме гормонов через рот. Таким образом, концентрация гормонов зависит от скорости слюноотделения, химической природы и молекулярной массы гормонов, В слюне обнаруживается кортизол, альдостерон, тестостерон, эстрогены и прогестерон, а также их метаболиты. Стероидные гормоны в слюне находятся, преимущественно, в свободном состоянии, и в небольших количествах в комплексе со стероидсвязывающими белками. Количество андрогенов и эстрогенов зависит от полового созревания и может меняться при патологии репродуктивной системы. Уровень прогестерона и эстрогенов в слюне, как плазме крови, меняется в зависимости от фазы менструального цикла. В норме в слюне также можно обнаружить инсулин, тироксин, тиреотропин, кальцитриол. Концентрация этих гормонов в слюне невелика и не коррелирует с показателями плазмы крови, поэтому их исследование малоинформативно.







Дата добавления: 2015-08-12; просмотров: 4418. Нарушение авторских прав


Рекомендуемые страницы:


Studopedia.info - Студопедия - 2014-2019 год . (0.009 сек.) русская версия | украинская версия