Некоторые микробы помимо специфических видовых антигенов содержат также и групповые антигены. При иммунизации организм отвечает на них выработкой соответствующих видовых и групповых антител. Поэтому сыворотка, содержащая групповые агглютинины, агглютинирует родственные между собой микробные виды, имеющие общий групповой антиген.
Метод Кастеллани основан на удалении из иммунной сыворотки антител, реагирующих с групповыми антигенами. Насыщение сыворотки культурой гомологичного (специфичного) микроба ведет к полному удалению как специфических, так и групповых антител. Однако насыщение сыворотки культурой гетерологичного (родственного) микроба ведет к удалению только групповых антител, и она будет агглютинировать только гомологичные микробы (табл.8).
| Таблица 8 Использование реакции Кастеллани для серологической диагностики брюшного тифа и паратифов
|
| Вид микробов, которые агглютинирует испытуемая сыворотка больного Агглютинация исследуемой сыворотки до адсорбции агглютининов
| Агглютинация исследуемой сыворотки после адсорбции агглютининов
|
| взвесью S.typhi
| взвесью S.рaratyphi А*
| Взвесью S. paratyphi В
|
| S.paratyphi А (антигены 1,2.12)
| +
| +
|
| +
|
| S.paratyphi В (антигены 1,4,12)
| +
| +
| -
| -
|
| S.typhi (антигены 5,9,12)
| +
| -
| -
| +
|
| *Можно предположить, что заболевание вызвано S.paratyphi A.
|
Делают разведения сыворотки 1:100. Затем готовят антигены, т.е. взвесь суточных агаровых культур разных видов микробов, которые агглютинируются этой сывороткой. Взвеси центрифугируют при 3000 об/мин, к осадку добавляют по 2 мл исследуемой сыворотки в разведении 1:100. Опытным путем было установлено, что для истощения 1 мл иммунной сыворотки 1:100 надо брать осадок микробной взвеси, полученной из 5-6 пробирок со скошенным агаром. Содержимое пробирок перемешивают, помещают на 2 ч в термостат, а затем на 18 ч в холодильник (4°С). После этого взвесь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 20 мин. Надосадочную жидкость (истощенная сыворотка) испытывают в развернутой РА с теми видами микробов, которые агглютинировались ею до насыщения.
