ГЕЛЬПРОНИКАЮЩАЯ (МОЛЕКУЛЯРНО-СИТОВАЯ) ХРОМАТОГРАФИЯ

Гельпроникающая хроматография (ГПХ) представляет собой метод разделения молекул, основанный на различии их размеров. Этот метод известен под названием гель-хроматография, эксклюзионная и молекуляр­но-ситовая хроматография.

В качестве НФ в ГПХ используют частицы, имеющие определенные размеры пор. ПФ служат водные или органические элюенты. Наиболее простое объяснение механизма разделения молекул в ГПХ состоит в том, что молекулы анализируемых веществ распределены между неподвижным растворителем в порах сорбента и растворителем, протекающим через слой НФ. Молекулы, которые имеют размеры, позволяющие им проникать в поры сорбента при движении вдоль колонки, часть времени теряют на пребывание в порах. Молекулы, имеющие размеры, превышающие размер пор, не проникают в сорбент и вымываются из колонки со скоростью движения элюента. Молекулы, проникающие в поры всех размеров, движут­ся наиболее медленно. Замедление скорости движения веществ вдоль колонки тем больше, чем в большее количество пор способны диффундиро­вать распределяемые частицы. Таким образом, при помощи ГПХ можно разделять смеси веществ в зависимости от размеров их молекул. Выход веществ из колонки происходит в порядке уменьшения их молекулярной массы.

Сорбенты, применяющиеся в ГПХ, имеют различные свойства. Как правило, их подразделяют на мягкие, полужесткие и жесткие гели. В современной ВЖХ мягкие гели на основе полисахаридов не используются из-за недостаточной механической прочности. Применяют полужесткие гели, получаемые на основе сополимеризации стирола и дивинилбензола (стирогели) или полимеризации винилацетата. Жесткие гели представляют собой стекла или силикагели, имеющие фиксированные размеры пор.

ГПХ часто используют для определения молекулярно-массового распре­деления полимеров и нахождения радиуса частиц. Для этой цели с помощью стандартов полистирола строят градуировочный график зависи­мости логарифма молекулярной массы от объема элюирования. Опираясь на полученную кривую, определяют концентрацию частиц опреде­ленного размера в анализируемой смеси.