Тема: Функциональная система лейкоцитов. Иммунитет. Система гемостаза

 

Лейкоциты – белые клетки крови, имеют ядро, отличаются характерной структурой и полиморфизмом Количество лейкоцитов в крови здоровых людей составляет 0, 1 – 0, 2% от количества эритроцитов, т.е. 4, 0 –9, 0 10⁹/л. Количество лейкоцитов колеблется в зависимости от времени суток, функционального состояния организма, сезона, климата, периодов солнечной активности, при различных физиологических состояниях организма, а также при различной патологии.

Увеличение количества лейкоцитов – лейкоцитоз, может быть физиологическим и патологическим. Физиологический лейкоцитоз, в свою очередь, делят на относительный и абсолютный. Относительный лейкоцитоз возникает после приема пищи – алиментарный, при физических нагрузках, эмоциях, болевых ощущениях, по природе это перераспределительный лейкоцитоз и он не сопровождается изменениями в лейкоцитарной формуле. Абсолютный физиологический лейкоцитоз наблюдается при беременности.

Патологический (реактивный) лейкоцитоз характерен для воспалительных процессов и инфекционных заболеваний. Он связан с усилением продукции лейкоцитов органами кроветворения, причем в крови увеличивается количество молодых форм лейкоцитов.

Снижение количества лейкоцитов – лейкопения, наблюдается при вирусных инфекциях, некоторых хронических инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, лучевых поражениях, приеме некоторых лекарственных препаратов. Истинная лейкопения – результат угнетения лейкопоэза.

Лейкопоэз – процесс образования и развития лейкоцитов происходит непрерывно и регулируется КСФ (колоний-стимулирующими факторами), лейкопоэтинами. Лейкопоэтины действуют непосредственно на органы кроветворения, усиливая дифференциацию клеток в сторону лейкопоэза.

Опосредованная регуляция лейкопоэза осуществляется нервными и гуморальными механизмами. Симпатическая нервная система стимулирует продукцию лейкоцитов, а парасимпатическая – тормозит. Гормоны надпочечников, щитовидной железы, передней доли гипофиза (СТГ и КТГ) стимулируют продукцию лейкоцитов.

Помимо оценки количества лейкоцитов, в клинике решающее значение придается изменениям взаимоотношений отдельных форм лейкоцитов. Процентное содержание отдельных форм лейкоцитов называется лейкоцитарной формулой.

Лейкоциты делятся на 2 группы: зернистые (гранулоциты), цитоплазма которых содержит специфическую зернистость и незернистые (агранулоциты), не имеющие зернистости. Гранулоциты делятся в свою очередь на 3 формы: нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. Нейтрофилы составляют 50 – 70 % всех лейкоцитов, в цитоплазме имеют мелкую зернистость, окрашенную нейтральными красками в сине – фиолетовый цвет. По зрелости они делятся на юные или метамиелоциты с бобовидным ядром (0-1%), палочкоядерные (2-5%) и сегментоядерные (50-65%).

Нейтрофилез (повышение числа нейтрофилов), как правило, сочетается с увеличением общего числа лейкоцитов в крови и наблюдается при острых воспалительных процессах, интоксикациях, шоковых состояниях, кровотечениях.

Нейтропения (снижение числа нейтрофилов) сочетается с лейкопенией и наблюдается при вирусных инфекциях, после приема цитотоксических медикаментов, после лучевой терапии.

Эозинофилы составляют 2 – 4 %, зернистость цитоплазмы окрашивается кислыми красками в розовый цвет. Они разрушают и обезвреживают токсины белкового происхождения, абсорбируют и расщепляют гистамин. Эозинофилия сопутствует аллергическим реакциям, некоторым детским инфекциям, особенно скарлатине, гельминтозам. Уменьшение их числа – типичная реакция на стресс.

Базофилы составляют 0 – 1%, гранулы окрашиваются основными красителями в синий цвет и содержат биологически активные вещества, в частности гистамин и гепарин. Базофилия может наблюдаться во время заключительной фазы острого воспаления. Дегрануляция базофилов - типичный ответ на реакции антиген – антитело, а также гипоксию и шок.

Агранулоциты не имеют специфической зернистости, но могут иметь неспецифическую зернистость, красящуюся азуром. К агранулоцитам относятся лимфоциты и моноциты.

Моноциты составляют 5 – 10% всех лейкоцитов. Моноциты способны к фагоцитозу и проявляют бактерицидную активность, они появляются в очаге воспаления после нейтрофилов и проявляют максимум активности в кислой среде, когда нейтрофилы неактивны. Моноциты фагоцитируют микробы, погибшие лейкоциты, поврежденные клетки воспаленной ткани и очищают очаг воспаления. Моноциты являются центральным звеном мононуклеарной фагоцитарной системы (МФС), имеют рецепторы для антител и комплемента. Моноциты могут мигрировать в ткани, где превращаются в макрофаги, участвующие в формировании реакций иммунитета.

Лимфоциты составляют 20 –35% всех лейкоцитов и представляют центральное звено иммунной системы организма. Они осуществляют синтез антител, лизис чужеродных клеток, обеспечивают реакции отторжения трансплантата, иммунную память, уничтожение собственных мутантных клеток и др. Лимфоциты делят на Т- лимфоциты (тимус зависимые) – 60%, В – лимфоциты (бурса – зависимые) – 30%, нулевые – 10% от общего числа лимфоцитов.

Различают несколько форм Т – лимфоцитов, каждая из которых выполняет определенную функцию.

Гемостаз – это совокупность механизмов, обеспечивающих целостность сосудистого русла и оптимальную проходимость сосудов. Среди механизмов гемостаза основная роль принадлежит регуляции агрегатного состояния крови. Различают:

1. Временный гемостаз

а) сосудистый

б) тромбоцитарный

в) коагуляционный

2. Постоянный гемостаз

а) ретракция сгустка

б) реканализация сосуда

В гемостатических реакциях участвуют ткань, окружающая сосуд, плазменные факторы крови, тромбоциты. Вещества, участвующие в реакциях гемостаза делят на 3 категории:

а) способствующие свертыванию;

б) препятствующие свертыванию;

в) обеспечивающие растворение тромба.

Функции тромбоцитов

Адгезивно – агрегационная

Концентрационно – транспортная

Ангиотрофическая

Гемокоагуляционная

Вазоконстрикторная

Для изучения свертывающей системы определяют время свертывания крови, для чего кровь выпускают через иглу на часовое стекло или в пробирку и при температуре 37^о замечают время образования сгустка (внутренний путь).

Более точный показатель – протромбиновое время: это время свертывания цитратной плазмы в оптимальных концентрациях Са и избытка тканевого тромбопластина (характеризует работу внешнего пути свертывания).

Протромбиновый индекс – выраженное в процентах отношение протромбинового времени нормальной плазмы к протромбиновому времени исследуемой плазмы. Норма 95 – 100%.

Помимо свертывающей существует противосвертывающая система. Физиологические антикоагулянты поддерживают кровь в жидком состоянии и ограничивают тромбообразование. К ним относят антитромбин 111, гепарин, протеины С и S, альфа – 2 – макроглобин, гепариноподобные соединения эндотелия, простациклин.

Свертывающая и противосвертывающая системы находятся в организме в состоянии очень тонкого динамического равновесия.

Система фибринолиза осуществляет рассасывание тромбов.

 

УЧЕБНЫЕ ЦЕЛИ ЗАНЯТИЯ.

Студент должен знать: количественное содержание лейкоцитов в крови в норме; виды лейкоцитоза и их отличительные признаки, причины возникновения; регуляцию лейкопоэза, роль нервных и гуморальных факторов; виды лейкоцитов; морфологические особенности, функции, лейкоцитарную формулу; роль В - и Т- лимфоцитов в гуморальном и клеточном иммунитете; Факторы и условия, изменяющие время свертывания крови; протромбиновое время; протромбиновый индекс; количество, свойства и функции тромбоцитов; современную схему свертывания крови; механизмы регуляции гемостаза.

Студент должен уметь: произвести подсчет лейкоцитов в счетной камере Горяева и интерпретировать результаты подсчета; производить подсчет лейкоцитарной формулы и анализировать содержание различных форм лейкоцитов в крови; интерпретировать результаты исследования свертывающей системы.

 

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИСХОДНОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ

1. Каково содержание лейкоцитов в крови у здорового человека, от чего оно зависит?

2. Что такое лейкоцитоз?

3. Какие виды лейкоцитоза Вы знаете?

4. Что такое лейкопения?

5. Почему лейкоциты называют белыми клетками крови?

6. Что такое лейкопоэз?

7. Что такое лейкопоэтины?

8. На какие группы делятся лейкоциты?

9. Назовите виды гранулоцитов?

10. Назовите виды агранулоцитов?

11. Каково содержание нейтрофилов, эозинофилов и базофилов в норме?

12. Назовите основные группы нейтрофилов?

13. Каково содержание моноцитов и лимфоцитов у здорового человека?

14. Что такое лейкоцитарная формула?

15. Что такое иммунитет?

16. Какие лимфоциты ответственны за создание гуморального иммунитета?

17. Какие лимфоциты ответственны за создание клеточного иммунитета?

18. Что такое гемостаз?

19. Строение тромбоцита?

20. Назовите функции тромбоцита?

21. Классификация гемостаза?

22. Назовите этапы свертывания крови?

 

ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ ТЕМЫ

1. Количественное содержание лейкоцитов в крови.

2. Лейкоцитоз: виды, отличительные признаки, причины возникновения. Лейкопения.

3. Виды лейкоцитов. Морфологические особенности отдельных видов.

4. Физиологическая роль отдельных видов лейкоцитов.

5. Лейкоцитарная формула и ее практическое значение.

6. Моноциты и макрофаги, их роль в организме.

7. Защитные системы организма, иммунитет.

8. Система В- и Т-лимфоцитов и их роль в клеточном и гуморальном иммунитете.

9. Тромбоциты – особенности строения, физиологические свойства, функции.

10. Основные механизмы временного гемостаза (сосудистый, тромбоцитарный, коагуляционный).

11. Постоянный гемостаз.

12. Понятие об антисвертывающей и фибринолитической системах.

 

ПРАКТИЧЕСКИЕ РАБОТЫ

Опыт № 1. Подсчет количества лейкоцитов входит в состав общего клинического анализа крови, а также «укороченного» анализа (содержание гемоглобина, число лейкоцитов, СОЭ).

Цель опыта: освоить методику подсчета общего количества лейкоцитов в крови.

Ход работы: разводят исследуемую кровь в 20 раз 3% уксусной кислотой, подкрашенной генцианвиолетом. Для этого в меланжер до метки 0, 5 набирают кровь из пальца, а затем до метки 11 – раствор уксусной кислоты. Кислота разрушает оболочки эритроцитов, а краска окрашивает ядра лейкоцитов. При этом эритроциты становятся невидимыми и не мешают подсчету лейкоцитов. Размешивают и оставляют на 10 минут. Допускается счет лейкоцитов не более чем через 2 – 4 часа после взятия крови.

Подготавливают счетную камеру с сеткой и покровное стекло, затем притирают стекло к камере, слегка надавливая его таким образом, чтобы по краям стекла появились радужные кольца или полосы. Это свидетельствует о том, что высота счетного поля камеры равна 0, 1 мм.

Размешивают содержимое меланжера, удаляют первую каплю, заполняют камеру и оставляют в горизонтальном положении на 1 минуту для оседания лейкоцитов. Подсчет лейкоцитов ведется в 25 больших квадратах, что составляет 400 маленьких.

Формула для вычисления количества лейкоцитов в 1 мкл крови:

 

В х 4000 х20

Х= ------------------

где Х – искомое число лейкоцитов в 1 мкл крови;

В – число лейкоцитов в 25 больших квадратах.

 

Опыт № 2. Подсчет и анализ лейкоцитарной формулы.

Лейкоцитарная формула подсчитывается в окрашенных мазках крови.

Ход работы. С помощью объектива малого увеличения найти край мазка крови. Нанести каплю иммерсионного масла и, не меняя положения стекла, перевести иммерсионный объектив таким образом, чтобы он погрузился в каплю масла. С помощью микровинта подобрать соответствующее фокусное расстояние, чтобы мазок был четко виден.

Подсчет лейкоцитов осуществляют следующим образом: отступив 2 – 3 поля зрения от края мазка, 3 – 5 полей зрения вдоль края мазка, затем 3 – 5 полей зрения по направлению к середине мазка под прямым углом, снова 3 – 5 полей зрения параллельно краю мазка, затем 3 – 5 полей под прямым углом по направлению к краю и т.д., двигая стекло по зигзагу. При этом следует дифференцировать все попадающие в поле зрения не разрушенные лейкоциты. Необходимо сосчитать не менее 100 клеток, причем лучше подсчитать половину клеток на одном крае мазка, а другую половину сосчитать на противоположном крае.

 

Опыт № 3. Определение скорости свертывания крови методом Мас и Магро.

Цель опыта: научиться определять время свертывания капиллярной крови.

Методика определения. На часовое стекло, покрытое тонким слоем парафина, наливают большую каплю вазелинового масла. Определение производят из второй капли крови, полученной из пальца. Кровь насасывают в капиллярную трубку и вводят в каплю масла на часовом стекле. Засекают время и каждые 2 минуты кровь насасывают в трубку. Когда это становится невозможным, отмечают время свертывания. В норме при температуре 15 – 25 ^оС кровь свертывается через 8 – 12 минут.

 

Опыт № 4. Определение времени свертывания крови коагулографом.

Цель опыта: научиться определять время свертывания крови одним из современных способов.

Методика определения. Коагулограф измеряет электрическое сопротивление крови в качающейся ячейке. По записанной коагулограмме можно определить следующие показатели: начало свертывания, конец свертывания, гематокрит, плотность сгустка, скорость свертывания, начало ретракции и фибринолиза, скорость ретракции и фибринолиза.

Исследуемая кровь собирается в ячейку, в которую запрессованы 2 электрода. Ячейка помещается в воздушный термостат, в котором автоматически поддерживается постоянная температура 37 ^оС. При помощи специального устройства, приводимого в движение электродвигателем, ячейка совершает колебательные движения таким образом, чтобы кровь попеременно замыкала и размыкала электроды, стекая с них. При размыкании сопротивление между электродами становится бесконечным. По мере свертывания, перемещение крови по ячейке затрудняется, электрическая цепь перестает размыкаться, сопротивление между электродами становится конечным. Пока кровь не свернулась, амплитуда колебаний большая, а по мере свертывания начинает убывать.

Ход работы:

1. Нажать на кнопку «Вкл. сеть».

2. После 15 минут нагрева нажать кнопку «Р.экв.» и вращением ручки переменного сопротивления «Р.рек.» установить капилляр пишущего устройства на конечную линию диаграммной ленты.

3. Промыть ячейки спиртом, протереть эфиром, прополоскать дистиллированной водой и высушить.

Взятие крови. При взятии крови из пальца, руку предварительно прогревают в теплой воде и вытирают насухо. Прокол производят скарификатором. Первую каплю крови снимают сухой ватой, затем заполняют основание ячейки путем легкого массирования пальца. Необходимо отметить время, прошедшее с момента взятия крови до начала записи. Ячейка, которая заполняется кровью, должна быть извлечена из термостата непосредственно перед ее заполнением, так как она должна быть прогрета. После заполнения ячейка устанавливается в термостат, который закрывается крышкой.

 

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ

 

1. Лейкопоэтины.

2. Роль эозинофилов в аллергических реакциях.

3. Антибактериальные свойства нейтрофилов.

4. Сосудистая стенка как один из факторов гемостаза.

 

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ ПРОВЕРКИ ИТОГОВОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ

 

1. Подсчет количества лейкоцитов в крови произвели утром натощак и после приема пищи. Какие изменения могут быть?

2. Количество лейкоцитов в исследуемой крови 13 х 10 ⁹ /л. При каких физиологических состояниях это возможно?

3. Количество лейкоцитов в исследуемой крови 1, 5 х 10⁹ /л. Как называется это явление? Чем оно может быть вызвано?

4. У больного с ярко выраженным воспалением количество лейкоцитов 3, 5 х10⁹/л. Хорошо это или плохо? Почему?

5. Каковы отличительные признаки физиологического и патологического лейкоцитоза?

6. Каковы основные причины лейкопении?

7. В мазке крови обнаружены лейкоциты с мелкой зернистостью фиолетового цвета и сегментированным ядром. Что это за вид? Каково их процентное содержание в крови?

8. В анализе крови обнаружено 8% палочкоядерных нейтрофилов и 5% юных. Как называется это состояние? Когда встречается?

9. У больного появился очаг воспаления. Какие изменения можно обнаружить в анализе крови? Какие формы лейкоцитов встречаются в начале воспалительного процесса и в последующем?

10. Почему при открытых ранах с кровоточащими паренхиматозными органами в качестве первой помощи рекомендовано прикладывать к ним размозженные ткани самого потерпевшего?

 

 

ЗАНЯТИЕ № 3