Работа 1. Расщепление крахмала ферментами слюны

Задача: изучить условия действия ферментов слюны и пронаблюдать расщепление крахмала слюной.

Слюна представляет собой водянистый секрет (98, 5 ¾ 99, 5% воды). Он содержит ферменты ¾ амилазу, лактазу, мальтазу, лизоцим, органические вещества ¾ белок и его фракции, муцин, слизь, анионы хлоридов, бикарбонатов, фосфатов, сульфатов, катионы кальция, магния и ряд микроэлементов.

Слюна имеет слабощелочную реакцию (рН 7, 4 ¾ 8, 0). Наиболее сильно переваривающее действие ферментов проявляется при определенных условиях среды: температуре 37¾ 40⁰ С и слабощелочной реакции. Действие ферментов слюны продолжается и в полости желудка.

Состав и количество слюны зависит от консистенции и химического состава, поступающих в полость рта веществ и функционального состояний организма. У взрослого человека выделяется около 1, 5 л слюны в сутки.

В полости рта происходит распад углеводов, в частности, фермент птиалин расщепляет крахмал до мальтозы, а мальтаза, расщепляет мальтозу до глюкозы. Они действуют при температуре 38 ¾ 39⁰ С в нейтральной и слабощелочной среде.

Объект и материально-техническое обеспечение эксперимента. Штатив с пробирками, стеклограф, маленькая воронка, фильтр, спиртовка, 1% крахмальный клейстер, 1% раствор йода, свежеприготовленный реактив Фелинга (35 г сернокислой меди, растворенной в 55 мл воды; 125 г едкого калия и 175 г сегнетовой соли, растворенных в 500 мл воды. Перед началом работы смешиваются равные количества обоих растворов), 1% раствор соляной кислоты, дистиллированная вода, лакмусовая бумага.

Порядок выполнения работы. Прополощите рот и соберите в пробирку 8 ¾ 10 мл слюны. Профильтруйте ее и испытайте на нейтральную (красную) лакмусовую бумагу.

При наличии щелочной реакции слюны ¾ бумага синеет, так как слюна имеет слабощелочную реакцию. Нередко, чаще после тяжелой физической работы, при наличии патологического процесса в полости рта, реакция может быть нейтральной или слабокислой.

Приготовьте 6 пробирок и пронумеруйте их. В пробирки № 1¾ 5 наливаем по 3 мл крахмального клейстера, а в пробирку № 6 1 мл слюны. Добавьте в них: в пробирку № 1 ¾ 1 мл натуральной слюны, в пробирку № 2 ¾ 1 мл тщательно прокипяченной слюны (после кипячения охладите ее), в пробирку № 3 ¾ 1 мл слюны и 1 мл соляной кислоты, в пробирку № 4 ¾ 1 мл дистиллированной воды. Первые 4 пробирки поместите в водяную баню (температура 40⁰ С) на 10 ¾ 15 мин. Пятую и шестую поставим в холодильник. Через 10 мин содержимое шестой пробирки налейте в пятую и снова поместите в холодильник.

Спустя 10 ¾ 15 мин пробирки № 1 ¾ извлеките из водяной бани. Половину содержимого каждой пробирки перелейте в соответственно пронумерованные пробирки 1 а, 2 а, 3 а, 4 а. В оставшемся содержимом первых четырех пробирок определите наличие крахмала. Для этого в каждую из них добавьте по 3 капли раствора йода. Появление синего цвета свидетельствует о наличии крахмала. В пробирках 1 а, 2 а, 3 а, 4 а определите наличие сахара. Для этого в каждую из них добавьте по 1 мл свежеприготовленного реактива Фелинга, подогрейте на спиртовке до кипячения. Если крахмал расщепился до глюкозы, то под влиянием реактива Фелинга происходит восстановление гидрата окиси меди в закись, которая образует оранжево – красный осадок.

Из холодильника извлеките пробирку № 5, половину содержимого ее перелейте в пробирку № 5 а. В пробирке № 5 определите крахмал, а в № 5 а ¾ сахар.

Оформление протокола. Запишите, в каких пробирках крахмал превратился в сахар (полностью или частично), в каких он остался без изменений. Подумайте, какой момент опыта убеждает вас в том, что переваривание крахмала слюной ¾ процесс ферментативный. Отметьте, как влияют различные условия на ферментативные свойства слюны.

Для удобства анализа полученных данных занесите их в таблицу отметьте большое количество сахара или крахмала знаком «++», следы этих веществ ¾ знаком «+», их отсутствие ¾ знаком «¾».

Таблица …