Оформление работы. Записывают принцип метода, ход работы и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение

Записывают принцип метода, ход работы и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение, делают вывод о возможной патологии.

Лабораторная работа 3

Обнаружение желчных пигментов в моче

Материал исследования

Нормальная моча и моча с желчью.

Реактивы

1) 1% спиртовый р-р йода, 2) конц. HNO₃, 3) конц. H₂SO₄, 4) сухой порошок аммония молибдата.

Проба с молибдатом аммония

Принцип

Метод основан на способности желчных пигментов билирубина и биливердина легко окисляться молибдатом аммония в присутствии серной кислоты с образованием билицианина, имеющего синюю окраску.

Проведение анализа

На предметное стекло отдельно наносят каплю мочи с желчью, соль аммония молибдата и каплю концентрированной серной кислоты. Стеклянной палочкой все хорошо смешивают. В присутствии билирубина развивается синее окрашивание.

Проба Розина

Принцип

Под действием йода билирубин мочи окисляется в биливердин (зеленого цвета).

Проведение анализа

Берут две пробирку, в одну пробирку наливают 2 мл нормальной мочи, в другую – 2 мл патологической мочи (с желчью). В обе пробирки на мочу наслаивают раствор йода. При наличии билирубина на границе между жидкостями образуется зеленое кольцо.

Нормальные величины

Моча	отсутствие

Проба Гмелина

Принцип

Под действием азотной кислоты, содержащей примесь азотистой, билирубин мочи окисляется в биливердин (зеленого цвета), билицианин (сине-фиолетовый), холетелин (желтый).

Проведение анализа

В пробирку с 5-10 каплями концентрированной HNO₃ осторожно, по стенке наслаивают равный объем исследуемой мочи. При наличии в моче желчных пигментов на границе жидкостей появляются цветные кольца. Первым появляется зеленое кольцо биливердина.

Нормальные величины

Моча	отсутствие

Проба Розенбаха

Принцип

Принцип метода аналогичен пробе Гмелина.

Проведение анализа

Фильтруют 1-2 мл исследуемой мочи через небольшой фильтр. Желчные пигменты, если они присутствуют в моче, частично задерживаются на фильтре. Затем в конус фильтра вносят 1 каплю концентрированной азотной HNO₃, содержащей следы азотистой кислоты (HNO₂), и наблюдают на фильтре появление окрашенных колец, как в пробе Гмелина.

Нормальные величины

Моча	отсутствие

Клинико-диагностическое значение

Моча

Билирубинурия характерна для обтурационной и паренхиматозной желтух при повышении уровня прямого билирубина в сыворотке, но отсутствует при гемолитической. При гепатите билирубин может быть обнаружен в моче до появления желтухи.