| Запасное вещество
| Структурные характеристики
| Химический
состав
| Функции
| Распространение
|
| Гранулы гликогена
| Æ20–100 нм
| высокомолекулярные полимеры глюкозы
| источник углерода
и энергии
| широко распространены
|
| Гранулы поли- β-оксимасляной кислоты
| Æ100–1000 нм; окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–3 нм
| 98% полимера поли-β-оксимасляной кислоты,
2% белка
| источник углерода
и энергии
| широко распространены
|
| Гранулы полифосфата
| Æ» 500 нм, зависит
от условий культивирования
| линейные полимеры ортофосфата
| источник фосфора
и энергии
| широко распространены
|
| Гранулы серы
| Æ100–800 нм;
окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–3 нм
| включения жидкой серы
| источник энергии
| бактерии, окисляющие H2S
|
| Углеводородные гранулы
| Æ200–300 нм;
окружены однослойной белковой мембраной толщиной 2–4 нм
| углеводороды
того же типа,
что и в среде
| источник углерода и энергии
| представители родов Mycobacterium, Nocardia и другие, использующие углеводороды
|
Функции включений:
1. Трофическая: запасные вещества служат источником питательных веществ. Так, волютиновые гранулы коринебактерий дифтерии играют роль фосфатных депо, за счет которых клетка может при недостатке фосфора в среде осуществить еще несколько делений.
2. Энергетическая: запасные вещества служат источником энергии. Поэтому при отсутствии внешних источников энергии они могут продлить время существования клетки, а у спророобразующих видов — создать условия для образования спор.
3. Дифференциально-диагностическое значение у некоторых бактерий. Напр., зерна волютина обнаруживаются у возбудителя дифтерии (C. diphtheriae) и дифтероидов(C. xerosis, вызывающего конъюнктивиты, и C. ulcerans, вызывающего дифтериеподобные поражения кожи), но отсутствуют у непатогенных ложнодифтерийных палочек(C. pseudodiphtheriticum).
Выявление включений (зерен волютина):
Волютин проявляет хромофильность и метахромазию (имея щелочную реакцию, вопринимает кислые красители), легко выявляется в клетках в виде крупных гранул, особенно при специальных методах окраски. ЦП бактериальной клетки, обладая кислой реакцией, воспринимает щелочные красители.
| 1. Окраска по Леффлеру:
– на фиксированный препарат наливают щелочной раствор метиленовой синьки на 3–5 мин;
– промывают водой, высушивают, наносят иммерсионное масло, микроскопируют: палочки (протоплазма) окрашиваются в светло-голубой цвет, зерна волютина (гранулы полифосфата) — в темно-синий (рис. 28).
|
Рис.28. Окраска по Леффлеру
|
| 2. Окраска по Нейссеру:
– на фиксированный препарат наливают уксусно-кислую метиленовую синьку на 1–2 минуты; краситель сливают, препарат промывают водой;
– наносят раствор Люголя на 30–60 сек (иногда);
– промывают водой;
– докрашивают хризоидином 10–15 сек или везувином 30сек–3мин;
– промывают водой, высушивают, микроскопируют: зерна волютина выявляются у дифтерийной палочки в виде интенсивно прокрашивающихся в темно-синий (без раствора Люголя) или черный (с раствором Люголя) цвет полюсов клетки; ЦП клетки окрашивается в нежно-желтый цвет (рис. 29).
| 
Рис. 29. Окраска по Нейссеру
|
3. Окраска волютина флюорохромом корифосфином: в люминесцентном микроскопе бактерии желто-зеленые, зерна волютина —оранжево-красные.
