Билет №6. 1) Ферменты катализируют окислительно-восстановительные ре­акции, лежащие в основе биологического окисления

 

1) Ферменты катализируют окислительно-восстановительные ре­акции, лежащие в основе биологического окисления. Класс насчи­тывает 17 подклассов. Подклассы: Дегидрогеназы: ферменты катализирующие реакции перено­са атомов водорода. а) Аэробные дегидрогеназы (катализируют перенос протонов и электронов непосредственно на кислород). Коферментами аэробных дегидрогеназ являются ФАД (флавинадениндинук-леотид) и ФМН (флавинмононуклеотид). Пример:

D-глюкопираноза D-глюконолактон

Фермент: глюкозооксидаза. Кофермент: ФАД. Витамин: Рибофлавин.

б) Анаэробные дегидрогеназы катализируют перенос протонов

и электронов на промежуточный субстрат, но не на кислород.

Коферментами анаэробных дегидрогеназ являются НАД (никотинамиддинуклеотид) и ФАД. fL^*/ рр Пример 1

Реакция:

СНо СНо

нс-он ₊.. с=о

I + НАД⁺ „,» | + НАДН + Н⁺

соон соон

Молочная Пировиноградная

кислота кислота

Фермент: лактатдегидрогеназа. Кофермент: НАД.

 

Пример 2 Реакция:

соон соон

^сн2 _{+ ФАД} j сн _{+ фАдн}^

СНо НС

I ^l I

соон соон

Сукцинат Фумарат

Фермент: сукцинатдегидрогеназа. Кофермент: ФАД.

 

Цитохромы - ферменты, катализирующие перенос электро­нов. Они являются гемопротейнами, отличающимися друг от друга не только строением простетических групп, но и белковы­ми компонентами. В ходе каталитического процесса валентность железа, входящего в состав гема цитохромов, обратимо изме­няется:

Fe³⁺< ^+e > Fe²⁺ Цитохромы Ь, с, с, а и а₃ выполняют функцию переноса элект­ронов в митохондриях дыхательной цепи. Цитохром Р₄₅₀ - компо­нент микросомальной цепи окисления. Каталаза и пероксидаза - ферменты, катализирующие разложение пероксида водорода. Эти ферменты являются сложными белками-гемопротеинами. Пероксидаза для своей работы нуждаются в присутствии субстрата - донора водорода.

Пример 1

Реакция:

Н₂0₂ + Н₂0₂ -> 2Н₂0 + 0₂-

Фермент: каталаза. Пример 2

Реакция:

2 Глутатион-SH + Н₂0₂ -» Глутатион-З-в-Глутатион + 2Н₂0

Фермент: глутатионпероксидаза.

 

3)Свидетельствует о наличии аминокислот и белков в моче

Биуретовая реакция

Универсальная реакция на обнаружение пептидной связи в бел­ках и пептида^. Биуретовую реакцию дают вещества, содержащие не менее двух пептидных группировок.

Принцип реакции Пептидная группа образует в щелочной среде с ионами Си²⁺ комплексное соединение фиолетового цвета с красным или синим оттенком в зависимости от числа пептидных связей. Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству пептидных групп.

Проведение анализа В пробирку с раствором белка вносят 3 капли 10% NaOH и 1 каплю CuS0₄.

Нингидриновая реакция

Это универсальная реакция для обнаружения любых а-амино-групп, содержащихся в аминокислотах, пептидах, белках.

Принцип сс-Аминогруппа аминокислот, взаимодействуя с нингидрином, образует комплекс синего или сине-фиолетового цвета. При нагре­вании аминокислот с нингидрином происходит окислительное дезминирование ос-аминогрупп и восстановление нингидрина. Вос­становленный нингидрин реагирует с аммиаком и другой молеку­лой окисленного нингидрина с образованием окрашенного продук-iii. Пролин и оксипролин дают продукт желтого цвета. Проведение анализа Раствор белка смешивают с 5 каплями раствора нингидрина. Пробирки нагревают и кипятят 1 минуту. Отмечают появление сине-фиолетового окрашивания.