Билет №10. Гидролазы — ферменты, осуществляющие разрыв внутримолекулярных связей в

1)

Гидролазы — ферменты, осуществляющие разрыв внутримолекулярных связей в

субстрате (за исключением С-С связей) путем присоединения элементов Н2О. под-

разделяется на 13 подклассов. Ввиду сложности многих субстратов у ряда фермен-

тов сохранены тривиальные названия: пепсин, трипсин. Коферменты отсутствуют.

Гидролазы сосредоточены в основном в желудочно-кишечном тракте и в лизосо-

мах клеток тканей. Осуществляют распад макромолекул, образуя легко адсорбируе-

мые мономеры.

Дополнение

Например, в подклассы выделяются группы ферментов, дейст-

вующие на сложные эфиры (3.1.), на простые эфиры (3.3.), на пеп-

тиды (3.4.), на углерод-углеродные связи (3.7.).

Среди подподклассов выделяют гидролазы карбоновых кислот

(3.1.1.), гидролазы фосфомоноэфиров (3.1.3.).

Название образуется:

гидролизуемый субстрат + отделяемая группа + гидролаза

 

Пример: Ацетилхолин:ацетил-гидролаза

 

Класс: 3. Гидролазы

Подкласс: 3.1. Действующие на сложные эфиры

Подподкласс: 3.1.1. Гидролазы карбоновые кислоты

Классификационный номер: КФ 3.1.1.7.

 

2)

Понятием витамины в настоящее время объединяется группа низкомолекуляр-

ных веществ разнообразной природы, которые необходимы для биохимических ре-

акций, обеспечивающих рост, выживание и размножение организма. Витамины

обычно выступают в роли коферментов – таких молекул, которые непосредственно

участвуют в работе ферментов. Витамины называют <пламень жизни>, так как жизнь

без витаминов невозможна.

Различают следующие группы витаминов:

1. Жирорастворимые А, D, E, K, F

2. Водорастворимые B1, B2, B3, B5, B6, B9= ВС, B12, H, C

3. Также выделяют витаминоподобные вещества: жирорастворимые – Q, водо-

растворимые – B4, P, B8, U, N, BT B13, B15

Общая характеристика

Независимо от своих свойств витамины характеризуются следующими общебио-

логическими свойствами:

1. Биосинтез осуществляется вне организма человека, т.е. витамины должны

поступать с пищей. Тех витаминов, которые синтезируются кишечной микрофлорой

обычно недостаточно для покрытия потребностей организма (строго говоря, это то-

же внешняя среда). Исключением является витамин РР, который может синте-

зироваться из триптофана;

2. Витамины не являются пластическим материалом. Исключение – витамин F;

3. Витамины не служат источником энергии. Исключение – витамин F;

4. Витамины необходимы для всех жизненных процессов и биологически активны

уже в малых количествах;

5. При поступлении в организм они оказывают влияние на биохимические про-

цессы, протекающие в любых тканях и органах, т.е. они неспецифичны по органам;

6. В повышенных дозах могут использоваться в лечебных целях в качестве не-

специфических средств: при сахарном диабете – B1, B2, B6, при простудных и ин-

фекционных заболеваниях – витамин С, при бронхиальной астме – витамин РР,

при язвах ЖКТ – витаминоподобное вещество U;

7. Жирорастворимые витамины при увеличении дозы накапливаются и могут вы-

зывать гипервитаминозы с рядом общих симптомов (потеря аппетита, расстрой-

ство ЖКТ, сильные головные боли, повышенная возбудимость нервной u1089 системы,

выпадение волос, шелушение кожи) и со специфическими признаками. Яркая карти-

на гипервитаминозов отмечается только для витаминов А. и D;

Дополнение

Витамины А и Е при избыточном потреблении оказывают канце-

рогенный эффект, что выяснилось после массового использования

непроверенных методик профилактики опухолей в западных стра-

нах в 1980-х годах.

6. Нехватка витаминов ведет к развитию патологических процессов в виде спе-

цифических гиповитаминозов или авитаминозов. Скрытые формы витаминной

недостаточности не имеют каких-либо внешних проявлений и симптомов, но оказы-

вают отрицательное влияние на работоспособность, общий тонус организма и его

устойчивость к разным неблагоприятным факторам.

Причины нехватки витаминов могут быть:

а. Экзогенные:

• нерациональное питание, т.е. недостаточное потребление с пищей;

Дополнение

Установлено, что в сравнении с серединой XX века содержание ви-

таминов в продуктах питания в среднем снизилось примерно на

50%. Это связывают с интенсивным земледелием и истощением

почв, с селекцией овощей и фруктов в пользу повышения зеленой

массы и красивого внешнего вида.

• гельминтозы, лямблиозы, дизентерия

• дисбактериоз кишечника

б. Эндогенные:

• нарушение всасывания (энтероколиты, гастроэнтериты различного проис-

хождения). Например, пернициозная анемия Аддисон-Бирнера;

• заболевания печени и желчного пузыря (для жирорастворимых витаминов);

• повышенная потребность (беременность, лактация, физические нагрузки);

• генетические дефекты кофермент-образующих ферментов.

Дополнение

В России 89% населения испытывают дефицит витамина С даже

летом, 43% - дефицит витамина В1, 44% - витамина В2, 68% - ви-

тамина В6, 22% - витамина В12. У 39% женщин обнаружен дефи-

цит фолиевой кислоты (одна из основных причин недоношенности

и уродств будущих детей); 45% страдают от нехватки β-

каротина (провитамина А), у 21% отсутствует витамин Е в дос-

таточном количестве.

7. Некоторые витамины поступают в организм в виде провитаминов. В организ-

ме провитамины превращаются в активные формы, например.

􀂾 каротиноиды превращаются в витамин А;

􀂾 пищевой эргостерин или метаболит 7-дегидрохолестерин под

действием ультрафиолетовых лучей превращаются соответст-

венно в эргокальциферол (D2) и холекальциферол (витамин D3).

8. Вещества, которые замещают витаминные коферменты в биохимических ре-

акциях, или препятствуют синтезу кофермента или еще каким-либо образом препят-

ствуют действию витамина, получили название антивитамины, например:

􀂾 дикумарол (антивитамин К) – препятствует образованию активной

формы витамина К, что блокирует синтез факторов свертывания

крови,

􀂾 изониазид (антивитамин РР) – образует «неправильные» кофер-

менты, аналогичные НАД и НАДФ, что блокирует протекание

окислительно-восстановительных реакций,

􀂾 птеридины (антифолаты) – вытесняют витамин В9 из реакций и

препятствуют синтезу пуриновых и пиримидиновых оснований и,

как следствие, нуклеиновых кислот.

􀂾 авидин (антивитамин Н) – связывается с витамином в кишечнике

и не допускает его всасывания в кровь.

 

3)

Осадочная проба Вельтмана в модификации Тайфля Принцип

При добавлении к сыворотке крови раствора СаС1₂ и нагрева­нии снижается коллоидная устойчивость белков вследствие умень­шения электрического заряда частиц при действии электролита. Ьелки при этом выпадают в осадок.

Реактивы

0,5% СаС1₂.

Проведение анализа

В химическую пробирку добавляют 0,1 мл сыворотки, 4,9 мл дистиллированной воды и 0,1 мл хлорида кальция. Встряхивают, нагревают на спиртовке или электроплитке до однократного заки­пания и охлаждают. Если хлопья в пробирке не обнаруживаются, to в нее добавляют еще 0,1 мл хлорида кальция и раствор вновь нагревают до кипения. Процедуру повторяют до выпадения хлопь­евидного осадка. Учитывают количество CaCI₂, пошедшее на об­разование хлопьевидного осадка сывороточных белков, и опреде­ляют состояние по коагуляционной ленте Вельтмана по схеме

Тимоловая проба

Принцип Сывороточные р-, у-глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7,55 тимоловым реактивом вследствие образования глобулин-тимол-липидного комплекса.

Реактивы Тимоловый буфер, рН 7,55-7,6.

Практическое значение Как и все коагуляционные тесты, тимоловая проба является неспецифической реакцией. Вместе с тем, она гораздо более спе­цифична для функционального исследования печени, чем другие коллоидные пробы. В 90-100% случаев тимоловая проба положи­тельна при болезни Боткина (уже в преджелтушной стадии или при безжелтушной форме) и при токсическом гепатите. При механи­ческой желтухе тимоловая проба отрицательна.

Оформление работы Отмечают принцип методов, регистрируют результаты анализа и делают вывод.