Вирус натуральной оспы

История открытия. Околоядерные включения, представляющие собой конгломераты вирионов натуральной оспы, впервые описал Д. Гварнери в 1892 г. в клетках роговицы зараженного кролика. Элементарные тельца возбудителя натуральной оспы в отделяемом везикул были открыты в 1906 г. Э. Пашеном.

Особенности вируса. Размеры вириона натуральной оспы – самого крупного вируса животных – составляют 300-450_*170-260 нм. Геном представлен линейной двухниточной ДНК длиной 186_*10³ пар нуклеотидов. Зрелые вирионы содержат суперкапсид, незрелые его лишены. В состав вириона входит 30 структурных белков и 15 ферментов, расположенных внутри капсида. Видоспецифические антигены представлены гемагглютинином и растворимыми термолабильным (Л) и термостабильным (С) антигенами. В геноме имеется короткий терминальный повтор (725 пар нуклеотидов), отличающийся от повтора вируса осповакцины (10_*10³ пар нуклеотидов). Геном содержит несколько десятков генов, очень стабилен.

Известно 2 штамма вируса натуральной оспы. Первый штамм вызывает классическую оспу (variola major) с летальностью 20-40 %, второй – алястрим (variola minor) – легкое течение оспы с летальностью 1-2 %. Репродуктивный цикл вирусов натуральной оспы составляет 6-7 ч.

Резистентность. Вирусы сохраняют жизнеспособность при 5-7˚С в течение 2-3 месяцев и дольше; хорошо переносят замораживание. В глицерине при 4-6˚С вирусы жизнеспособны в течение нескольких лет. Вирусы гибнут через 15-30 минут при 60˚С в жидкой среде; в составе сухого патологического материала – по истечении 1 ч. Чувствительны к ультрафиолетовым лучам. Устойчивы к эфиру; к 50 % этанолу - в течение часа. Дезинфицирующие средства (1 % фенол, 0,2 % формальдегид, 0,5 % хлорамин) инактивируют вирусы натуральной оспы в течение 2-24 ч.

Культивирование вирусов возможно в куриных эмбрионах, в первичных и перевиваемых культурах клеток человека и животных (свиней, овец, обезьян и других). В куриных эмбрионах на хорион-аллантоисной оболочке вирусы натуральной оспы образуют так называемые «оспины» – белые, резко очерченные возвышающиеся точечные поражения. В клеточных культурах ЦПД проявляется очаговой дегенерацией клеточного монослоя.

Эпидемиология. Источником инфекции является больной человек. Основной механизм передачи возбудителя – аэрогенный, который наиболее часто осуществляется воздушно-капельным путем и реже – воздушно-пылевым. Дополнительный механизм передачи – перкутанный, реализуемый контактно-бытовым и парентеральным путями. Больной заразен с последних дней инкубационного периода до отпадения корочек. Наибольшая заразность отмечается на 7-10 день болезни.

Патогенез. Вирусы натуральной оспы проникают в организм человека через слизистую оболочку верхних дыхательных путей. В эпителиальных клетках слизистой оболочки происходит первичная репродукция вирусов, после чего они попадают в регионарные лимфатические узлы. Здесь происходит дальнейшее размножение вирусов с последующим их проникновением в кровь (первичная вирусемия). Вирусы натуральной оспы с кровью заносятся во все внутренние органы, где в течение 10 дней размножаются в системе мононуклеарных фагоцитов. Выход вновь образованных вирионов сопровождается развитием повторной вирусемии, которая определяет начало клинических проявлений заболевания.

При повторной вирусемии вирусы натуральной оспы проникают в клетки сосочкового и сетчатого слоя кожи и слизистых оболочек, где также происходит репродукция вирусов. Пораженные слои кожи отекают и инфильтрируются лейкоцитами, что ведет к образованию плотных папул (бугорков) с вдавленной центральной частью. В дальнейшем цитоплазма клеток сосочкового и сетчатого слоев аструктурируется и клетки разрушаются, образуя многокамерные везикулы, которые вскоре превращаются в пустулы, или вскрываются, образуя поверхностные язвы с возникновением рубцов. Пустулы нередко утрачивают многокамерность, контаминируются стафилококком (contamination - примесь) и нагнаиваются с образованием корочек. Развитие везикул на роговице глаз ведет к потере зрения.

Клиника. Инкубационный период при натуральной оспе, в среднем, составляет 10-14 дней (5-22 дня). Заболевание начинается внезапно с озноба и лихорадки, головной боли, болей в мышцах, нередко возникает преходящая сыпь на теле. С 3-4 дня болезни лихорадка снижается и появляется обильная розеолёзно-папуллёзная сыпь на коже и слизистых оболочках. Характерна этапность высыпания: вначале сыпь появляется на голове, на второй день поражается кожа туловища, на третий – конечности. К 9-10 дню папулы превращаются в везикулы, которые, лопаясь, образуют эрозии и язвы. При нагноении везикул образуются пустулы, что сопровождается повторной лихорадкой. С 12-14 дня болезни пустулы подсыхают с образованием корочек. Общая летальность составляет 20-40 %, при тяжелых формах болезни – 100 %.

Иммунитет. После перенесенного заболевания остается стойкий пожизненный иммунитет, обусловленный антигенспецифическими антителами и Т-киллерами.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования является кровь, сыворотка крови, смывы из ротоглотки, слюна, содержимое элементов сыпи. Забор и транспортирование заразного материала должны исключать возможность распространения инфекции.

При диагностике натуральной оспы используются вирусоскопический, вирусологический и серологический методы.

Исследование материала начинают с экспресс-методов: световой, люминесцентной, электронной микроскопии, РПГА и ИФА.

Световая микроскопия. Метод Пашена: из материала готовят мазки, окрашивают по методу Морозова в модификации Гипсена (импрегнация серебром). Тельца Пашена имеют вид мелких округлых образований темно-коричневого или черного цвета, расположенных поодиночно, парами, короткими цепочками и в виде скоплений.

Люминесцентная микроскопия проводится в прямом варианте, при использовании люминесцирующих антител против вирусов натуральной оспы. При их наличии в исследуемом материале отмечается зеленое свечение различной интенсивности.