Проведение анализа.

Отмерить	Опытная проба, мл	Калибратор, мл	Контроль, мл
Сыворотка крови	0,01	-	-
Рабочий раствор цветного реагента	2,0	2,0	2,0
Дистиллированная вода	-	-	0,01
Калибратор	-	0,01	-

Смешать и инкубировать в кипящей водяной бане в течение 10 мин. По окончании инкубации пробы охладить в проточной воде и измерить оптическую плотность пробы (Е_пр.) и калибратора (Е_кал.) против контрольного раствора при длине волны 540 (500-560) нм, кювета – 1 см. Окраска стабильна в течение 15 мин.

 

Расчёт:

, ммоль/л,

где C_кал. – концентрация мочевины в калибраторе; E_пр. – оптическая плотность опытной пробы; E_кал. – оптическая плотность стандартной пробы.

Примечание: Если определяют мочевину в гемолитических или липемических сыворотках, то пробу необходимо депротеинировать 10% раствором ТХУ. В центрифужную пробирку вносят 0,4 мл дистиллированной воды, 0,1 мл сыворотки и 0,5 мл 10% раствора ТХУ. Содержимое смешивают и центрифугируют 5-10 мин. при 3000 об/мин. Затем 0,01 мл надосадочной жидкости переносят в новую пробирку, добавляют 2,0 мл рабочего раствора цветного реагента. Далее определение проводят, как при анализе без депротеинирования

 

Мочу перед анализом разводят дистиллированной водой в соотношении 1:50, 1:100 и исследование проводят в той же последовательности, как описано для сыворотки..

Расчёт:

, ммоль/л,

где K – коэффициент разведения; V_сут. – объём суточной мочи, л.

 

Референтные пределы: в сыворотке крови – 2,5-8,1 ммоль/л; моча суточная – 430-710 ммоль/ сут.