Проведение анализа.
Смешать и инкубировать в кипящей водяной бане в течение 10 мин. По окончании инкубации пробы охладить в проточной воде и измерить оптическую плотность пробы (Епр.) и калибратора (Екал.) против контрольного раствора при длине волны 540 (500-560) нм, кювета – 1 см. Окраска стабильна в течение 15 мин.
Расчёт: , ммоль/л, где Cкал. – концентрация мочевины в калибраторе; Eпр. – оптическая плотность опытной пробы; Eкал. – оптическая плотность стандартной пробы. Примечание: Если определяют мочевину в гемолитических или липемических сыворотках, то пробу необходимо депротеинировать 10% раствором ТХУ. В центрифужную пробирку вносят 0,4 мл дистиллированной воды, 0,1 мл сыворотки и 0,5 мл 10% раствора ТХУ. Содержимое смешивают и центрифугируют 5-10 мин. при 3000 об/мин. Затем 0,01 мл надосадочной жидкости переносят в новую пробирку, добавляют 2,0 мл рабочего раствора цветного реагента. Далее определение проводят, как при анализе без депротеинирования
Мочу перед анализом разводят дистиллированной водой в соотношении 1:50, 1:100 и исследование проводят в той же последовательности, как описано для сыворотки.. Расчёт: , ммоль/л, где K – коэффициент разведения; Vсут. – объём суточной мочи, л.
Референтные пределы: в сыворотке крови – 2,5-8,1 ммоль/л; моча суточная – 430-710 ммоль/ сут.
|