Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ЗОНДЫ НА ОСНОВЕ ПРОДУКТОВ МЕТАБОЛИЗМА ГОМОЦИСТЕИНА ДЛЯ 19F-ЯМР-СПЕКТРОСКОПИИ И МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ





 

Чубаров А.С.

Новосибирский государственный университет, Институт химической биологии и фундаментальной медицины,

Новосибирск, Россия.

Аспирант 1г.

chubarovalesha@mail.ru

Научный руководитель: Годовикова Т.С.

 

Результаты исследований, проведенных в последние годы, свидетельствуют о том, что процессы метилирования играют чрезвычайно важную, если не ключевую, роль в этиологии и патогенезе сердечно-сосудистых, онкологических и нейродегенеративных заболеваний. Клинические наблюдения показали, что уровень гомоцистеина, а также продуктов метаболизма гомоцистеина (тиолактона гомоцистеина и гомоцистеинилированных белков) в крови пациентов с вышеперечисленными заболеваниями значительно повышен. Повышение концентрации гомоцистеина (гипергомоцистеинемия) цитотоксично в силу активации нескольких механизмов воздействия его на клетку: ингибирования метилтрансфераз; активации оксидантного стресса вследствие подавления активности ферментов-антиоксидантов. Среди способствующих возникновению окислительного стресса факторов существенным представляется обнаруженный недавно процесс, приводящий к образованию свободных радикалов остатками гомоцистеинамида. Однако до сих пор остается открытым вопрос: являются ли гомоцистеин и продукты его метаболического превращения маркерами заболеваний или их причиной. В связи с этим изучение механизмов развития патологических процессов при гипергомоцистеинемии на уровне живого организма представляет собой актуальную задачу, поскольку ее решение обеспечит разработку подходов не только для раннего выявления патологий, но и для выбора оптимальных путей их устранения.

Для исследования объектов живой природы всё шире и плодотворнее применяют метод ЯМР-спектроскопии и магнитно-резонансной томографии (МРТ). Выбор для визуализации в качестве репортёрной группы фторорганических соединений обусловлен высокой чувствительностью ЯМР на ядрах фтора (19F) и оптимальным соотношением сигнала и шума за счет крайне низкого содержания фтора в живых организмах. Введение в белки фторсодержащей репортёрной группы открывает уникальные возможности исследования фундаментальных биологических процессов в норме и при развитии патологий.

Цель настоящей работы − разработка подходов для получения in vitro и in vivo молекулярных зондов на основе продуктов метаболизма гомоцистеина, содержащих магнитно-резонансную метку (ядра 19F), для изучения процессов, протекающих при гипергомоцистеинемии, с помощью методов ЯМР-спектроскопии и магнитно-резонансной томографии.

В ходе исследования были получены следующие результаты:

· Синтезирован на основе тиолактона гомоцистеина новый молекулярный зонд, в структуре которого присутствуют: а) остаток тиолактона, реакционноспособный в отношении функциональных групп белков; б) остаток трифторацетила, обеспечивающий регистрацию соединения методом 19F-ЯМР-спектроскопии и регистрацию изображения продукта метаболизма гомоцистеина методом магнитно-резонансной томографии по сигналу ЯМР-19F [1].

· Осуществлено N -гомоцистеинилирование человеческого сывороточного альбумина с помощью N -трифторацетилтиолактона гомоцистеина и получен новый высокомолекулярный зонд для 19F-МРТ. Конъюгат охарактеризован методами 19F-ЯМР-спектроскопии и MALDI-TOF масс-спектрометрии. При N -гомоцистеинилировании альбумина in vitro происходит присоединение к молекуле белка до четырех остатков N -трифторацетилгомоцистеина [1].

· Обнаружено, что при проведении N -гомоцистеинилирования in situ белков плазмы крови с помощью N -трифторацетилтиолактона гомоцистеина основной мишенью модификации является человеческий сывороточный альбумин (~ 75% от всех меченых белков) [1].

· Выявлено, что при взаимодействии тиолактона гомоцистеина с перфтортолуолом, в качестве основного продукта образуется фторсодержащее производное дикетопиперазина гомоцистеина. Кроме того наблюдается образование двух трипептидов, несущих остатки перфтортолуола.

Структуры полученных соединений подтверждены методами масс спектрометрии, многоядерной ЯМР и электронной спектроскопии.

Автор благодарит: В.Е. Платонова (НИОХ СО РАН) за предоставление перфтортолуола, М.М. Шакирова (НИОХ СО РАН) и И.В. Коптюга (МТЦ СО РАН) за содействие в выполнении представленной работы.

Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант № 11-04-01377-а), НШ-64.2012.4, фонда «Современное естествознание» (образовательный грант № P12-061).

 

Литература:

[1] Chubarov A.S., Shakirov M.M., Koptyug I.V., Sagdeev R.Z., Knorre D.G., Godovikova T.S. Bioorg. Med. Chem. Lett. 21,4050-4053 (2011)

 

 







Дата добавления: 2015-09-07; просмотров: 478. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!




Практические расчеты на срез и смятие При изучении темы обратите внимание на основные расчетные предпосылки и условности расчета...


Функция спроса населения на данный товар Функция спроса населения на данный товар: Qd=7-Р. Функция предложения: Qs= -5+2Р,где...


Аальтернативная стоимость. Кривая производственных возможностей В экономике Буридании есть 100 ед. труда с производительностью 4 м ткани или 2 кг мяса...


Вычисление основной дактилоскопической формулы Вычислением основной дактоформулы обычно занимается следователь. Для этого все десять пальцев разбиваются на пять пар...

Кишечный шов (Ламбера, Альберта, Шмидена, Матешука) Кишечный шов– это способ соединения кишечной стенки. В основе кишечного шва лежит принцип футлярного строения кишечной стенки...

Принципы резекции желудка по типу Бильрот 1, Бильрот 2; операция Гофмейстера-Финстерера. Гастрэктомия Резекция желудка – удаление части желудка: а) дистальная – удаляют 2/3 желудка б) проксимальная – удаляют 95% желудка. Показания...

Ваготомия. Дренирующие операции Ваготомия – денервация зон желудка, секретирующих соляную кислоту, путем пересечения блуждающих нервов или их ветвей...

Броматометрия и бромометрия Броматометрический метод основан на окислении вос­становителей броматом калия в кислой среде...

Метод Фольгарда (роданометрия или тиоцианатометрия) Метод Фольгарда основан на применении в качестве осадителя титрованного раствора, содержащего роданид-ионы SCN...

Потенциометрия. Потенциометрическое определение рН растворов Потенциометрия - это электрохимический метод иссле­дования и анализа веществ, основанный на зависимости равновесного электродного потенциала Е от активности (концентрации) определяемого вещества в исследуемом рас­творе...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2025 год . (0.008 сек.) русская версия | украинская версия