Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ЗОНДЫ НА ОСНОВЕ ПРОДУКТОВ МЕТАБОЛИЗМА ГОМОЦИСТЕИНА ДЛЯ 19F-ЯМР-СПЕКТРОСКОПИИ И МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ





 

Чубаров А.С.

Новосибирский государственный университет, Институт химической биологии и фундаментальной медицины,

Новосибирск, Россия.

Аспирант 1г.

chubarovalesha@mail.ru

Научный руководитель: Годовикова Т.С.

 

Результаты исследований, проведенных в последние годы, свидетельствуют о том, что процессы метилирования играют чрезвычайно важную, если не ключевую, роль в этиологии и патогенезе сердечно-сосудистых, онкологических и нейродегенеративных заболеваний. Клинические наблюдения показали, что уровень гомоцистеина, а также продуктов метаболизма гомоцистеина (тиолактона гомоцистеина и гомоцистеинилированных белков) в крови пациентов с вышеперечисленными заболеваниями значительно повышен. Повышение концентрации гомоцистеина (гипергомоцистеинемия) цитотоксично в силу активации нескольких механизмов воздействия его на клетку: ингибирования метилтрансфераз; активации оксидантного стресса вследствие подавления активности ферментов-антиоксидантов. Среди способствующих возникновению окислительного стресса факторов существенным представляется обнаруженный недавно процесс, приводящий к образованию свободных радикалов остатками гомоцистеинамида. Однако до сих пор остается открытым вопрос: являются ли гомоцистеин и продукты его метаболического превращения маркерами заболеваний или их причиной. В связи с этим изучение механизмов развития патологических процессов при гипергомоцистеинемии на уровне живого организма представляет собой актуальную задачу, поскольку ее решение обеспечит разработку подходов не только для раннего выявления патологий, но и для выбора оптимальных путей их устранения.

Для исследования объектов живой природы всё шире и плодотворнее применяют метод ЯМР-спектроскопии и магнитно-резонансной томографии (МРТ). Выбор для визуализации в качестве репортёрной группы фторорганических соединений обусловлен высокой чувствительностью ЯМР на ядрах фтора (19F) и оптимальным соотношением сигнала и шума за счет крайне низкого содержания фтора в живых организмах. Введение в белки фторсодержащей репортёрной группы открывает уникальные возможности исследования фундаментальных биологических процессов в норме и при развитии патологий.

Цель настоящей работы − разработка подходов для получения in vitro и in vivo молекулярных зондов на основе продуктов метаболизма гомоцистеина, содержащих магнитно-резонансную метку (ядра 19F), для изучения процессов, протекающих при гипергомоцистеинемии, с помощью методов ЯМР-спектроскопии и магнитно-резонансной томографии.

В ходе исследования были получены следующие результаты:

· Синтезирован на основе тиолактона гомоцистеина новый молекулярный зонд, в структуре которого присутствуют: а) остаток тиолактона, реакционноспособный в отношении функциональных групп белков; б) остаток трифторацетила, обеспечивающий регистрацию соединения методом 19F-ЯМР-спектроскопии и регистрацию изображения продукта метаболизма гомоцистеина методом магнитно-резонансной томографии по сигналу ЯМР-19F [1].

· Осуществлено N -гомоцистеинилирование человеческого сывороточного альбумина с помощью N -трифторацетилтиолактона гомоцистеина и получен новый высокомолекулярный зонд для 19F-МРТ. Конъюгат охарактеризован методами 19F-ЯМР-спектроскопии и MALDI-TOF масс-спектрометрии. При N -гомоцистеинилировании альбумина in vitro происходит присоединение к молекуле белка до четырех остатков N -трифторацетилгомоцистеина [1].

· Обнаружено, что при проведении N -гомоцистеинилирования in situ белков плазмы крови с помощью N -трифторацетилтиолактона гомоцистеина основной мишенью модификации является человеческий сывороточный альбумин (~ 75% от всех меченых белков) [1].

· Выявлено, что при взаимодействии тиолактона гомоцистеина с перфтортолуолом, в качестве основного продукта образуется фторсодержащее производное дикетопиперазина гомоцистеина. Кроме того наблюдается образование двух трипептидов, несущих остатки перфтортолуола.

Структуры полученных соединений подтверждены методами масс спектрометрии, многоядерной ЯМР и электронной спектроскопии.

Автор благодарит: В.Е. Платонова (НИОХ СО РАН) за предоставление перфтортолуола, М.М. Шакирова (НИОХ СО РАН) и И.В. Коптюга (МТЦ СО РАН) за содействие в выполнении представленной работы.

Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант № 11-04-01377-а), НШ-64.2012.4, фонда «Современное естествознание» (образовательный грант № P12-061).

 

Литература:

[1] Chubarov A.S., Shakirov M.M., Koptyug I.V., Sagdeev R.Z., Knorre D.G., Godovikova T.S. Bioorg. Med. Chem. Lett. 21,4050-4053 (2011)

 

 







Дата добавления: 2015-09-07; просмотров: 478. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!




Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...


Композиция из абстрактных геометрических фигур Данная композиция состоит из линий, штриховки, абстрактных геометрических форм...


Важнейшие способы обработки и анализа рядов динамики Не во всех случаях эмпирические данные рядов динамики позволяют определить тенденцию изменения явления во времени...


ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ МЕХАНИКА Статика является частью теоретической механики, изучающей условия, при ко­торых тело находится под действием заданной системы сил...

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦЕНТРА ТЯЖЕСТИ ПЛОСКОЙ ФИГУРЫ Сила, с которой тело притягивается к Земле, называется силой тяжести...

СПИД: морально-этические проблемы Среди тысяч заболеваний совершенно особое, даже исключительное, место занимает ВИЧ-инфекция...

Понятие массовых мероприятий, их виды Под массовыми мероприятиями следует понимать совокупность действий или явлений социальной жизни с участием большого количества граждан...

Ученые, внесшие большой вклад в развитие науки биологии Краткая история развития биологии. Чарльз Дарвин (1809 -1882)- основной труд « О происхождении видов путем естественного отбора или Сохранение благоприятствующих пород в борьбе за жизнь»...

Этапы трансляции и их характеристика Трансляция (от лат. translatio — перевод) — процесс синтеза белка из аминокислот на матрице информационной (матричной) РНК (иРНК...

Условия, необходимые для появления жизни История жизни и история Земли неотделимы друг от друга, так как именно в процессах развития нашей планеты как космического тела закладывались определенные физические и химические условия, необходимые для появления и развития жизни...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2025 год . (0.011 сек.) русская версия | украинская версия