Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

КОНСТРУИРОВАНИЕ И СИНТЕЗ ПОЛИФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ЛИНКЕРНЫХ ГРУПП НА ОСНОВЕ ПЕПТИДОВ – СУБСТРАТОВ ЦИСТЕИНОВЫХ КАТЕПСИНОВ





 

Яринич Л.А.

Новосибирский государственный университет, Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,

Новосибирск, Россия.

Аспирант 1г.

yarinich-1@yandex.ru

Научный руководитель: Сильников В. Н.

 

В настоящее время активно ведутся работы по исследованию транспортных систем для адресной доставки терапевтических олигонуклеотидов в клетки-мишени. В направлении, основанном на применении противоопухолевых препаратов в онкологии, требуется повысить избирательность и эффективность их действия. В качестве молекулярного вектора для доставки препаратов в опухолевые клетки можно использовать человеческий сывороточный альбумин. После проникновения терапевтической конструкции в клетки-мишени требуется отсоединение антисмыслового нуклеотида от белка-транспортера. Эту задачу можно решить путем использования пептидного мостика, который является субстратом для катепсинов, принимающих участие в раковой прогрессии, для сшивания белка с олигонуклеотидом.

Целью настоящей работы является синтез пептидных бифункциональных мостиков – субстратов цистеиновых протеаз – для получения на их основе конъюгатов белка-транспортера с антисмысловым олигонуклеотидом или лекарственным препаратом.

Синтез Ala-Leu-содержащих пептидов проводили в растворе методом активированных эфиров с использованием Boc‑стратегии. На их основе были синтезированы различные бифункциональные реагенты. Для повышения нуклеофильности концевой аминогруппы пептида были получены бифункциональные реагенты на основе b-Ala(AlaLeu)2 и GABA(AlaLeu)2 (соединения IVII).

 

Все вышеперечисленные бифункциональные реагенты содержат малеимидный остаток и аминогруппу. Также нами было получено бифункциональное соединение, содержащее малеимидную и карбоксильную функции (соединение VIII).

 

 

Свободная аминогруппа обеспечивает возможность присоединения по N -концу пептида антисмыслового олигонуклеотида или лекарственного препарата. Наличие малеимидного остатка в структуре синтезированного пептидо-олигонуклеотидного конъюгата позволяет осуществить сшивку с транспортным белком крови.

При помощи конфокальной микроскопии возможно изучение механизма транспорта флуоресцентно меченых конструкций в клетке, а также проверка субстратных свойств используемых пептидов. Для исследования поведения белковых конъюгатов в культурах клеток нами было синтезировано флуоресцентное производное на основе бифункционального реагента VI и N,N,N’,N’‑тетраметил-5‑карбоксиродамина. При взаимодействии полученного флуоресцентно меченого биодеградируемого пептида с человеческим сывороточным альбумином нами был получен белковый конъюгат IX через образование сульфидной связи между сульфгидрильной группой остатка цистеина в белке и малеимидным остатком реагента.

 

Строение полученных соединений было подтверждено методами ЯМР спектроскопии и масс-спектрометрии.

 

Работа выполнена при поддержке фонда «Современное естествознание» (образовательный грант № P12-061).








Дата добавления: 2015-09-07; просмотров: 461. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!




Картограммы и картодиаграммы Картограммы и картодиаграммы применяются для изображения географической характеристики изучаемых явлений...


Практические расчеты на срез и смятие При изучении темы обратите внимание на основные расчетные предпосылки и условности расчета...


Функция спроса населения на данный товар Функция спроса населения на данный товар: Qd=7-Р. Функция предложения: Qs= -5+2Р,где...


Аальтернативная стоимость. Кривая производственных возможностей В экономике Буридании есть 100 ед. труда с производительностью 4 м ткани или 2 кг мяса...

СПИД: морально-этические проблемы Среди тысяч заболеваний совершенно особое, даже исключительное, место занимает ВИЧ-инфекция...

Понятие массовых мероприятий, их виды Под массовыми мероприятиями следует понимать совокупность действий или явлений социальной жизни с участием большого количества граждан...

Тактика действий нарядов полиции по предупреждению и пресечению правонарушений при проведении массовых мероприятий К особенностям проведения массовых мероприятий и факторам, влияющим на охрану общественного порядка и обеспечение общественной безопасности, можно отнести значительное количество субъектов, принимающих участие в их подготовке и проведении...

Случайной величины Плотностью распределения вероятностей непрерывной случайной величины Х называют функцию f(x) – первую производную от функции распределения F(x): Понятие плотность распределения вероятностей случайной величины Х для дискретной величины неприменима...

Схема рефлекторной дуги условного слюноотделительного рефлекса При неоднократном сочетании действия предупреждающего сигнала и безусловного пищевого раздражителя формируются...

Уравнение волны. Уравнение плоской гармонической волны. Волновое уравнение. Уравнение сферической волны Уравнением упругой волны называют функцию , которая определяет смещение любой частицы среды с координатами относительно своего положения равновесия в произвольный момент времени t...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2025 год . (0.011 сек.) русская версия | украинская версия