Методом Кофрани

 

Цель работы: освоение количественного определения белковых веществ методом Кофрани в молоке и молочных продуктах.

 

Оборудование, реактивы и материалы: э лектроплитка, песочная баня или газовая горелка, установка для отгонки аммиака, колбы Кьельдаля или термостойкие круглодонные колбы с длинным горлышком, конические колбы Эрленмейера вместимостью 10 см³, капельницы, мерные цилиндры вместимостью 10 см³; раствор гидроксида натрия с концентрацией 10 моль/дм³, раствор хлорида бария с массовой долей 10 %, раствор серной кислоты с концентрацией 0, 05 моль/дм³, индикатор Тоширо (смешивают 100 см³ спиртового раствора метилового красного с массовой долей 0, 03 % и 15 см³ спиртового раствора метиленовой сини с массовой, долей 0, 1 %, раствор гидроксида натрия с концентрацией 0, 05 моль/дм³; молоко, молочная сыворотка, казеин, растворенный в гидроксиде натрия.

 

Теоретические сведения

 

Метод Кофрани можно использовать для определения белковых веществ в молоке и сыворотке. Он основан на способности концентрированной щелочи выделять при нагревании свободный аммиак из азотсодержащего сырья. Количество выделившегося аммиака пропорционально содержанию азотистых веществ.

Массовую долю белка в молоке вычисляют используя коэффициент, установленный экспериментально с помощью параллельных опытов по определению белков в молоке методами Кьельдаля и Кофрани.

 

Ход работы

 

Установку для отгонки аммиака (см. рисунок с. 37) прогревают паром из парообразователя в течение 10 мин. Затем закрывают зажим 3 и открывают зажим 2. В коническую колбу 8 отмеривают 40 см³ раствора серной кислоты с концентрацией 0, 05 моль/дм³ и добавляют индикатор Тоширо. Помещают колбу под холодильник 7, форштосс которого погружают в жидкость. В круглодонную колбу 6 наливают 10 см³ исследуемого раствора казеина, молока или сыворотки и соединяют с установкой.

Через воронку 4 в колбу 6 небольшими порциями добавляют раствор гидроксида натрия концентрацией 10 моль/дм³ и раствор хлорида бария (для предотвращения вспенивания жидкости). Открывают зажим 3 и закрывают зажим 2. Проходящим паром содержимое колбы нагревают до кипения. Выделяющийся аммиак через каплеуловитель и холодильник поступает в колбу 8. Перегонку осуществляют в течение 10 мин. Отсчет времени начинают с момента появления первой капли в холодильнике. Через 9 мин опускают колбу 8 так, чтобы конец холодильника был выше уровня жидкости на 2-3 см. После окончания перегонки содержимое колбы 8 титруют раствором гидроксида натрия концентрацией 0, 05 моль/дм³ до изменения фиолетово-красного цвета жидкости на бледно-зеленый. Массовую долю белка х, %, вычисляют по формуле

 

х = (а – б) × 0, 154,

 

где а – первоначальной объем кислоты в приемной колбе, см³;

б – объем раствора гидроксида натрия, пошедшего на титрование избытка кислоты, см³;

0, 154 – коэффициент пересчета, установленный экспериментально.

 

Оформление результатов

 

Полученные результаты вносят в таблицу.

 

Наименование объекта исследований	Массовая доля белка, %
Молоко Молочная сыворотка Казеин

 

Контрольные вопросы и задания

 

1. Рассчитать содержание белка в молоке определенного методом Кофрани, если известно, что на титрование израсходовано 17, 3 см³ гидроксида натрия, в приемную колбу отмеривали 40 см³ раствора серной кислоты с концентрацией 0, 02 моль/дм³.

2. На чем основан метод Кофрани?

 

Лабораторная работа № 11