Рабочее задание

1. Внимательно прочитайте данное методическое руководство.

2. Разделитесь на пары и подготовьте предложенные препараты карпа к изъятию гипофиза следуя инструкции ниже.

 

Рис.27. Расположение мозга и гипофиза в черепе леща(а), вид снизу мозга и гипофиза(б).	Рис.28 Схема среза крышки черепа

Для заготовки гипофиза используют только свежее пойманную рыбу, полежавшую в тени не более 2 часов.

Работу по вскрытию выполняет 1 человек. Рыбу оборачивают сухой грубой материей, чтобы не скользила. Перерезают жабры и дают некоторое время (10 мин) стечь крови. Левой рукой держат рыбу в районе спинного плавника, правой работают ножом. Кладут рыбу брюхом вниз на простой стол. Крепким ножом делают надрез в районе затылочных костей, где начинается чешуйчатый покров, разрушая спинной мозг. Сильно надавливая правой рукой срезают крышку черепа, как показано на рисунке 28.

Тампоном ваты или кистью удаляют жировую ткань и головной мозг. Дно черепа вытирают насухо. Вскрытая черепная коробка показана на рис.29. В таком виде рыбу подают для изъятия гипофиза.

3. Используя пинцет, скальпель, нож Грефе или лопатку извлеките гипофиз.

На дне черепной коробки выделяется белесое пятно, покрытое пленкой – это гипофиз. Он расположен в костной ямке. Осторожно надрезаем пленку ножом Грефе как показано на рис.29 а, б.

Отметим, что укарповых, гипофиз лежит в углублении в основании черепа и прикрыт пленкой. У судака гипофиз прикреплен к мозгу и легко отделяется от него и поэтому он иногда остается в ямке в основании черепа, откуда его извлекают пинцетом.

В месте пореза образуется «окошечко». Его расширяют тем же инструментом, чтобы открылся гипофиз (рис.29в). Отмечено, что у особей более 1 кг соединительно тканная пленка покрывающая гипофиз заметно тоньше и легче подрезается, чем у более мелких особей.

 

Если особь менее 1 кг а	Если особь более 1 кг б
в	г

Рис.29 Схема извлечения гипофиза:

Освобожденный гипофиз вытаскивают из костной ямки, поддевая его снизу лопаткой. Делается это аккуратно, так как вероятность его раздавливания весьма высока (рис. 29г).

У плотвы и жереха гипофиз расположен в вертикально вытянутой ямке.

Вынутый гипофиз помещают в бокс с ацетоном и проводят обезвоживание по принятой методике.

4. Полученные гипофизы обработайте в соответствии с методикой.

Извлеченные гипофизы погружают в сосуд с ацетоном, так чтобы он лишь покрывал их. Держат около часа. Затем раствор выливают, а гипофизы помещают в специальную склянку и заливают химически чистым безводным ацетоном, объем которого 10-15 раз превышает объем гипофизов. После 12-часовой выдержки ацетон заменяют на новую его порцию такого же сухого безводного ацетона на 6-8 часов.

Рис. 30. Гипофизы карповых рыб для целей искусственного воспроизводства.

 

После последней выдержки гипофизов в ацетоне их высушивают фильтровальной бумагой, а затем на сухой марле в тени в сухом помещении при комнатной температуре. Окончание сушки определяют по отсутствию характерного запаха ацетона. При длительном хранении гипофизов рекомендуется их помещать в сухую пробирку, закрытую пробкой и залитую парафином. Хранят гипофизы при температуре 0-5 град. С.