Методы, применяемые при изучении биологических объектов

а) Цитоспектрофотометрия — метод изучения химического состава
клетки, основанный на избирательном поглощении теми или иными веществами лучей с определенной длиной волны. По интенсивности поглощения
света, которая зависит от концентрации вещества, производится количественное определение его содержания в клетке.

б) Радиоавтография - важный информационный метод, позволяющий изучать распределенные в клетках и тканях веществ, в состав которых искус­ственно введены радиоактивные изотопы (³Н, ¹⁴С, ³²Р и др.). Введенный в организм животного (или в среду культивирования клеток) изотоп включается в соответствующие структуры (например, меченый тимидин — в ядра кле­ток синтезирующих ДНК). Метод основан на способности включенных в клетки изотопов, восстанавливать бромистое серебро фотоэмульсии, которой покрывают срезы ткани или клетки, Образующиеся после проявления фото­
эмульсии зерна серебра (треки) служат своего рода автографами, по локализации которых судят о включении в клетку примененных веществ. Примене­ние меченых тритием предшественников нуклеиновых кислот (тимидина, аденина, цитидина, уридина) позволило выяснить многие важные аспекты синтеза ДНК. РНК и клеточных белков.

в) Метод культуры клеток, тканей заключается в выращивании кле­ток и тканей вне организма в искусственных питательных средах (в условиях in vitro). Для получения изолированных клеток производят предварительную обработку материала ферментами трипсином или коллагеназой. Метод по­зволяет изучать реакции клеток на различные воздействия; механизмы регу­ляции пролиферации дифференцировки и гибели. Особенно важное значение данный метод имеет для эмбриологических и цитофизиологических исследо­ваний, а также для трансплантации эмбриональных клеток при лечении вро­жденных и приобретенных дефектов обмена веществ.

г) Микроскопическая хирургия клетки - совокупность методических приемом, осуществляемых с помощью специального прибора - микроманипулятора. Этот прибор позволя­ет производить различного рода тончайшие операции ни клетке (введение веществ, удаление или пересадка структурных компонентов клетки, нанесе­ние уколов-разрезов и пр.) и нашел широкое применение в эмбриологии.

д) Центрафферная, или замедленная микрокино- или видеосъемка - изучение живых клеток. Такой способ позволяет проследить за медленно протекаю­щими изменениями клеток.

е) Метод фракционирования (дифференциально­го центрифугирования) клеток. Его суть заключается в получении из клеток изолированных структурных компонентов. Метод основан на различных скоро­стях осаждения этих компонентов при вращении гомогенатов клеток в ульт­рацентрифугах. Данный метод сыграл и играет очень важную роль в изуче­нии химического состава и функциональных свойств субклеточных элемен­тов - прежде всего, органелл.