ИЗМЕНЕНИЯ ЛЕЙКОГРАММЫ

Цель занятия. Научиться дифференцировать форменные элементы крови по окрашенным мазкам, выводить лейкограмму.

Объекты исследования и оборудование. Окрашенные мазки крови животных разных видов.

Микроскопы, препаратоводители, 11-клавишные счетчики, стеклянные па­лочки, иммерсионное масло, бензин, вата.

Исследование окрашенных мазков крови. Окрашенные мазки крови исследуют под микроскопом, используя при этом объектив х90 и иммерсионное масло. Последнее после работы удаляют с мазка сухой ваткой, чтобы сохранить препарат.

В окрашенных мазках крови определяют размер, форму, харак­тер окраски клеток и их структурных элементов — ядра, цитоплаз­мы и включений; соотношение между форменными элементами различных видов.

Эритроциты. При оценке эритроцитов обращают внимание на их размер, форму, окраску и клеточные включения. Эритроциты млекопитающих в мазках крови округлой формы (у верблюдов и лам овальной), у птиц и рыб — овальной формы и содержат ядро. Эритроциты окрашиваются кислыми красителями в розовый цвет {ацидофилъны), причем центральная часть оказывается более бледной, так как центр эритроцита вогнут. Такое окрашивание — более интенсивное по периферии и бледное в центре — называют ортохромазией, а эритроциты — ортохромными клетками. Диаметр эритроцитов составляет (1 ■ Ю^-3 мм): у крупного рогатого скота 4, 4...7, 7; овец 3, 0...5, 6; коз 2, 1...4, 9; лошадей 4, 5...7, 5; свиней 4, 0...9, 0; собак 4, 2...10, 0; кошек 5, 0...6, 2; кур 9, 3х5, 6...12, 2х7, 2; рыб 9, 8 х14, 0...10, 2х 16, 8.

Тромбоциты. В мазках крови тромбоциты, или кровяные плас­тинки, овальной, округлой или угловатой формы. Периферичес­кая, гомогенная их часть — гиаломер — окрашивается в голубой цвет, а центральная, состоящая из зернышек, — грануломер — в фиолетовый или в красно-фиолетовый. Чаще тромбоциты в маз­ках лежат группами, образуя конгломераты из 5...6 пластинок и

более, что указывает на их хорошую агглютинабельность. Диаметр тромбоцитов 1...4мкм.

Лейкоциты. В зависимости от свойств цитоплазмы и харак­тера зернистости лейкоциты подразделяют на гранулоциты, или зернистые (базофилы, эозинофилы и нейтрофилы), и агрануло-циты, или незернистые (лимфоциты и моноциты) (см. цветную вклейку).

Базофилы (Б) — круглой или овальной формы клетки ди­аметром 11... 17 • Ю^-3 мм. У зрелых форм ядро полиморфное, пло­хо заметное, с неясными очертаниями, окрашено в фиолетовый цвет или слабо-фиолетовый с бордовым оттенком. Цитоплазма бледно-розовая или бледно-фиолетовая (что обусловлено раство­рением гранул в процессе приготовления мазка). Крупные грану­лы округлые или расплывчатые, окрашены в темно-фиолетовый, темно-синий или черный цвет, нередко разрушены — на их месте образуются вакуоли.

Эозинофилы (Э) — крупные круглой формы клетки ди­аметром 9...22- Ю^-3 мм. Ядро окрашено в фиолетовый цвет. Ци­топлазма нежно-голубая с розово-красной или ярко-красной зер­нистостью (гранулы круглые или слегка овальные). Характер ядра зависит от степени зрелости клетки: у зрелых форм ядро сегмен­тировано, у молодых — округлое. У лошадей, крупного рогатого скота и свиней ядро чаще состоит из двух сегментов, а у овец, коз и собак — из трех. Наиболее крупные гранулы встречаются в ци­топлазме эозинофилов у лошадей (до 3 • Ю^-3 мм), собак и кроликов (до 1, 5 • Ю^-3 мм); у кошек гранулы расположены очень густо, неред­ко они палочковидной формы и неодинаковых размеров. При раст­ворении гранул на их месте образуются вакуоли, в раздавленных клетках гранулы лежат свободно, «рассыпавшись».

Нейтрофилы (Н) — клетки округлой формы, размером от 9, 5 до 14, 5 • 10~³ мм. В зависимости от формы и степени окрас­ки ядра различают миелоциты, юные (метамиелоциты), пал очко-ядерные и сегментоядерные нейтрофилы.

Миелоциты (М) — наиболее молодые клетки с неравномерно окрашенным в фиолетовый цвет массивным круглым или оваль­ным ядром, расположенным чаще эксцентрично. Для ядерного хроматина характерно чередование темных и светлых участков. Цитоплазма клеток розового или светло-синего цвета, с мелкой нежной розовой зернистостью. В крови здоровых животных мие­лоциты не встречаются.

Юные (Ю) нейтрофилы содержат окрашенное в фиолетовый цвет ядро: широкое с центральным вдавлениеМ (бобовидной формы) или немного вытянутое (подковообразное). Светлые участ­ки хроматина сменяются более темными. Цитоплазма розового Цвета, иногда плохо прокрашена, с мелкой, нежной розовой іернистостыо. В периферической крови взрослых животных юные нейтрофилы не всегда удается обнаружить.

 

Палочкоядерные (Л) нейтрофилы характеризуются трансформа­цией ядра в колбасовидную или палочковидную форму. Ядро не­равномерно окрашено в темно-фиолетовый цвет; приблизитель­но одного диаметра по всей длине, но может быть изогнуто в виде дужки, полумесяца, латинской буквы S, на концах булавовидно вздуто; в отдельных местах на ядре заметны небольшие перехва­ты-мостики шириной не менее 1/2 основной части ядра. Цито­плазма бледно-розового цвета, с азурофильной зернистостью, со­держит большое количество мелких (часто плохо видных), равно­мерно расположенных гранул.

Сегментоядерные (Q нейтрофилы отличаются от палочкоядер-ных лишь характером ядра, которое состоит из 2...5 сегментов, со­единенных тонкими, иногда едва заметными перемычками. Ядро окрашивается неравномерно в темно-фиолетовый цвет.

Лимфоциты (Л) по размеру подразделяют на малые (6...9 • 10~³ мм), средние (10... 14 • 10^-Змм) и большие (14 • 10~³ мм и более). Доминирующий компонент лимфоцита — ядро округлой или слегка овальной формы, интенсивно окрашенное в темно-си­ний цвет. Характер хроматина облаковидный, т. е. более темные участки переходят без резкой границы в более светлые. Цитоплаз­ма светло-синяя, обычно с перинуклеарной зоной (просветление вокруг ядра), иногда в ней выявляют азурофильную зернистость. Больше всего в периферической крови обнаруживают малых лим­фоцитов (до 95 %), у которых цитоплазма расположена в виде уз­кого ободка, или «серпа», вокруг темноокрашенного ядра.

Моноциты (М) — это крупные клетки диаметром 12...24 ■ Ю^-3 мм, округлой или нередко неправильной формы. Ядро характеризуется разнообразием формы: может быть бобо­видным, округлым, многолопастным, подковообразным; окраши­вается неравномерно в слабо-фиолетовый цвет с темно-фиолето­выми пятнами, так как хроматин ядра рыхлый, распределен не­равномерно, как бы образуя ячейки разных размеров и формы. Цитоплазма моноцитов серо-голубого, серо-синеватого цвета со светлым фиолетовым оттенком, вблизи от ядра содержит мелкую пылевидную зернистость.

Особенности клеток крови птиц. У всех птиц в отличие от млекопитающих эритроциты овальной (эллипсоидной) формы, по размеру больше лейкоцитов, содержат ядро. Тромбоциты ве­ретенообразной формы и тоже содержат ядро. Среди лейкоци­тов выделяют псевдоэозинофилы, которые соответствуют ней-трофилам млекопитающих. Цитоплазма псевдоэозинофилов со­держит крупную красного цвета грануляцию в виде зерен или палочек; ядро окрашено в сине-фиолетовый цвет. У истинных эозинофилов гранулы округлой формы и неодинаковые по раз­мерам, розового цвета; ядро состоит из 2...5 сегментов, окраши­вается в темно-сине-фиолетовый цвет более интенсивно, чем у псевдоэозинофилов.

Форменные элементы крови (схема) кур: /-базофил; 2, 3 - эозинофилы; 4... 6 -псевдоэозинофилы; 7-моноцит; 8...10 -лимфоциты; // - пролимфоцит; 12 -тромбоциты; 13- полихроматофильныйэритробласт; 14 - разрушенная

клетка («тень»); 15 — ортохромный эритроцит

25(50) 25(50) 25(50) 25(50)

35(70)35(70)30(60) ІІІЙГ

Выведение лейкограммы (лейкоцитар­ной формулы). Лейкограмма представ­ляет собой процентное соотношение между отдельными видами лейкоцитов в крови.

2 *ЙН

100(200)

Методы дифференциального подсче­та лейкоцитов. Лейкограмму выводят по окрашенным мазкам в иммерсион­ной системе путем дифференциально­го подсчета 100 (лучше 200) лейкоци­тов одним из приводимых далее мето­дов (рис. 7.11).

100(200)

Четырехпольный метод (по Шиллингу): с каждой стороны мазка в начале и в конце его (т. е. на 4 исследуе­мых участках) определяют по 25 лейко­цитов (или по 50, если считают 200 кле­ток). При этом от края мазка углубляются на 3...4 поля зрения, за­тем продвигаются на 2...3 поля вдоль мазка и возвращаются к его краю. Каждый найденный лейкоцит регистрируют на 11-клавиш­ном счетчике.

Трехпольный метод (по Филиппченко): клетки под­считывают на трех участках, расположенных поперек мазка (от одного края до другого). В начале мазка подсчитывают 35 (или 70) лейкоцитов, в середине 30 (или 60) и в конце мазка 35 (или 70) клеток.

Однопольный метод (по Мухину): подсчитывают 100 лейкоцитов в средней части мазка, проходя поперек его от одного края до другого и обратно.

Ступенчатый метод: подсчет клеток начинают от од­ного края и ведут по зигзагообразной линии к концу мазка. Выво­дить лейкограмму этим способом рекомендуют у крупного рогато­го скота при диагностике лейкозов.

При записи результатов отдельные виды лейкоцитов рас­полагают в такой последовательности: базофилы (Б), эозино-филы (Э), нейтрофилы — миелоциты (М), юные (Ю), палоч-коядерные (П), сегментоядерные (С), лимфоциты (Л), моноци­ты (М). Лейкограмма крови здоровых животных представлена в таблице 7.3.

Для дифференциального подсчета клеток «белой» крови можно использовать такие приборы, как «Техникой», Hemalog D (H-D), «Культер» модель Diff-3.

14 Васильев М. Ф. и др.