Студопедия — А н я т и е 28. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ГЕМОГЛОБИНА, ГЕМАТОКРИТНОГО И ЦВЕТОВОГО ПОКАЗАТЕЛЯ
Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

А н я т и е 28. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ГЕМОГЛОБИНА, ГЕМАТОКРИТНОГО И ЦВЕТОВОГО ПОКАЗАТЕЛЯ






Цель занятия. Освоить методику определения количества гемоглобина в кро­ви, гематокритного и цветового показателя, приобрести навыки диагностической оценки результатов анализа.


Объекты исследования и оборудование. Кровь стабилизированная.

0, 1 н. раствор соляной кислоты, трансформирующий раствор (ацетонциангидрид 0, 5 мл, калий железосинеродистый 200 мг, гидрокарбонат натрия 1 г, дистиллирован­ная вода до 1л), стандартный раствор гемиглобинцианида «Реанал» (концентрация 59, 75мг на 100мл, что соответствует 15 г гемоглобина на 100мл крови, или 150г/л).

Гемометр, фотоэлектроколориметр, центрифуга ЦЛК-1, мерные колбы на 1 л, градуированные пипетки на 5 мл, капиллярные пипетки на 0, 02 мл, микрокапил­ляры для определения гематокритного показателя, пробирки.

Определение гемоглобина в крови. Концентрацию гемоглобина в крови определяют гематиновым и гемиглобинцианидным методом.

Гематиновый метод (по Сали). В градуированную пробирку гемо­метра ГС-3 (рис. 7.3) вносят глазной пипеткой до метки «2» 0, 1 н. ра­створ соляной кислоты. Капиллярной пипеткой набирают 0, 02 мл крови, кончик пипетки снаружи вытирают ватой и, не вызывая обра­зования пены, кровь выдувают на дно пробирки. Чтобы удалить ос­татки крови, пипетку 2...3 раза промывают раствором соляной кис­лоты. Содержимое пробирки перемешивают и выдерживают 5 мин (при исследовании крови кур — 15 мин). Смесь за это время приобре­тает коричневую окраску вследствие образования хлоргематина. До­бавляют по каплям дистиллированную воду, помешивая стеклянной палочкой до тех пор, пока цвет жидкости в пробирке не станет таким же, как цвет стандарта. Количество гемоглобина (г/100 мл крови) ус­танавливают по делению шкалы, с которым совпадает уровень жид­кости. Для пересчета в г/л умножают результат на коэффициент 10.

Гемиглобинцианидный метод (по М. Л. Пименовой и Г. В. Дервизу). При определении содержания гемоглобина этим методом 0, 02 мл крови вносят в 5 мл трансформирующего раствора (разводят в 251 раз), хорошо перемешивают, выдерживают 10 мин. Колоримет-рируют при длине волны 500...5б0нм (зеленый светофильтр) в кю­вете, толщина рабочей грани которой со­ставляет 10 мм; в качестве «холостой» про­бы используют трансформирующий раст­вор или воду, стандартной — стандартный раствор гемиглобинцианида, который ис­следуют так же, как и опытную пробу.

Концентрацию гемоглобина определя­ют по формуле

НЬ = ЕСК- 0, 001/£ ст = Еоп15/ЕСТ,

где НЬ— концентрация гемоглобина, г на 100мл; Еоп — оптическая плотность опытной пробы; Е^ — оптичес­кая плотность стандартной пробы; С—концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе (59, 75 мг на 100мл); А" —коэффициент разведения крови (251); 0, 001 — коэффициент для пересчета мг в г.

Рис. 7.3. Схема гемометра ГС-3:

5 6 5

1 — матовое стекло; 2 — две запаянные пробирки со стан­дартной жидкостью; 3— матовое стекло; 4 — корпус-стойка; 5 — два винта; 6 — крышка

13 Васильев М. Ф. и др.


Для пересчета в г/л вычис­ленную по формуле концен­трацию гемоглобина умножают на коэффициент 10.

По стандартному раствору гемиглобинцианида можно по­строить калибровочный график и по нему рассчитать концентра­цию гемоглобина в крови.

Гемоглобин можно опреде­лять и с помощью прибора — гемоглобинометра: в этом слу­чае результат (г/л) высвечива­ется на табло (рис. 7.4).

Рис. 7.4. Гемоглобинометр ГФ-Ц-04: 1 — табло для высвечивания цифр; 2 — место для кюветы (под крышкой); 3 — тумблер включения в сеть

У здоровых животных со­держание гемоглобина крови составляет (г/л): у крупного рогатого скота 90... 130; овец 90...133; коз 100...150; лошадей 80...140; свиней 90...ПО; собак 110...170; кур 80...120.

Увеличение концентрации гемоглобина в крови — гиперхроме-мию — наблюдают при поносах, рвоте, потливости, образовании экссудатов и транссудатов, миоглобинурии, эмфиземе легких; уменьшение содержания — олигохромемию — при анемиях раз­личной этиологии.

Определение гематокритного показателя. Гематокритный пока­затель дает представление о соотношении объемов плазмы и фор­менных элементов крови (в первую очередь — эритроцитов).

Относительный объем форменных элементов крови — гемато-крит — определяют в микроцентрифуге МЦГ-6 или ЦЛК-1. Стек­лянный капилляр промывают раствором гепарина или оксалата натрия, высушивают и заполняют кровью на 7/8 длины; с одного конца закупоривают пластилином или специальной пастой. Ка­пилляры помещают в ротор центрифуги таким образом, чтобы за­купоренные концы упирались в резиновую прокладку. Центрифу­гируют при 8000 мин-1 5 мин. Гематокритную величину определя­ют по специальной шкале, прилагаемой к центрифуге.

У здоровых животных значения гематокритного показателя на­ходятся в пределах (л/л): у крупного рогатого скота 0, 34...0, 40; овец 0, 25...0, 45; лошадей 0, 35...0, 45; свиней 0, 39...0, 43; собак 0, 42...0, 48; кур 0, 38...0, 42.

Уменьшение значения показателя наблюдают при анемиях (же­лезо-, В12-дефицитной и особенно при инфекционной анемии ло­шадей), гидремии, гемоспоридиозах, лептоспирозе и т.д.

Высокий показатель отмечают при врожденных пороках серд­ца, сопровождающихся цианозом, при шоковых состояниях, ожо­гах, недостаточности коры надпочечников, полицитемии, дегид­ратации крови (токсикоз, понос, рвота) и т. д.


Показатель гематокрита используют при определении объема отдельного эритроцита, отношения гемоглобина к объему клетки, среднего содержания гемоглобина в одном эритроците и др.

Определение цветового показателя. Цветовой показатель отра­жает степень насыщенности эритроцита гемоглобином; его опре­деляют по формуле

ЦП= ИЪ2ЕХІНЪХЕЪ

где ЦП— цветовой показатель; НЪ\ — средняя концентрация гемоглобина в нор­ме, г/л; НЬ2 — концентрация гемоглобина у исследуемого животного, г/л; Ех средняя концентрация эритроцитов в норме (1012/л); ^ — концентрация эритро­цитов у исследуемого животного (1012/л).

Значения цветового показателя крови у здоровых животных следующие: у крупного рогатого скота 0, 7...1, 1; овец 0, 5...0, 7; коз 0, 44...0, 49; лошадей 0, 8...1, 2; свиней 0, 8...1, 0; кур 2...3.

Отклонение показателя на 15 % и более от нормы свидетель­ствует о нарушении состава крови, что учитывают при дифферен­цировании анемии.

Увеличение значения показателя — гиперхромемию — наблюдают при гемолитических анемиях; уменьшение — гипохромемия — ха­рактерный признак постгеморрагических анемий.







Дата добавления: 2014-11-10; просмотров: 2635. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!



Картограммы и картодиаграммы Картограммы и картодиаграммы применяются для изображения географической характеристики изучаемых явлений...

Практические расчеты на срез и смятие При изучении темы обратите внимание на основные расчетные предпосылки и условности расчета...

Функция спроса населения на данный товар Функция спроса населения на данный товар: Qd=7-Р. Функция предложения: Qs= -5+2Р,где...

Аальтернативная стоимость. Кривая производственных возможностей В экономике Буридании есть 100 ед. труда с производительностью 4 м ткани или 2 кг мяса...

Деятельность сестер милосердия общин Красного Креста ярко проявилась в период Тритоны – интервалы, в которых содержится три тона. К тритонам относятся увеличенная кварта (ув.4) и уменьшенная квинта (ум.5). Их можно построить на ступенях натурального и гармонического мажора и минора.  ...

Понятие о синдроме нарушения бронхиальной проходимости и его клинические проявления Синдром нарушения бронхиальной проходимости (бронхообструктивный синдром) – это патологическое состояние...

Опухоли яичников в детском и подростковом возрасте Опухоли яичников занимают первое место в структуре опухолей половой системы у девочек и встречаются в возрасте 10 – 16 лет и в период полового созревания...

Механизм действия гормонов а) Цитозольный механизм действия гормонов. По цитозольному механизму действуют гормоны 1 группы...

Алгоритм выполнения манипуляции Приемы наружного акушерского исследования. Приемы Леопольда – Левицкого. Цель...

ИГРЫ НА ТАКТИЛЬНОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ Методические рекомендации по проведению игр на тактильное взаимодействие...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2024 год . (0.023 сек.) русская версия | украинская версия