Задание 3. Заражение и вскрытие лабораторного животного

Имитировать заражение белых мышей (введение стерильного изотонического раствора натрия хлорида) внутримышечно и внутрибрюшинно. Умертвить животное, закрепить трупик на эмалированном лотке с парафиновой пластинкой, вскрыть. Выполнить мазки (крови, содержимого лимфоузлов, ткани легких и печени, асцитной жидкости), посев крови, содержимого лимфоузлов, ткани легких и печени, асцитной жидкости в пробирки с питательным бульоном и чашки Петри с питательным агаром.

Контрольные ВОПРОСЫ

1. С какой целью выявляют факторы патогенности микроорганизмов?

2. Какие факторы патогенности можно выявить, используя микроскопические методы?

3. На чем основаны биохимические методы оценки патогенности микроорганизмов?

4. Как выявить способность микроорганизмов синтезировать цитотоксины?

5. С какой целью используют биологические методы?

6. Каких принципов следует придерживаться при работе с лабораторными животными?

7. Какие способы заражения животных используют и от каких причин зависит их выбор?

8. Какие принципы нужно соблюдать при вскрытии лабораторных животных?

9. В какой последовательности проводят вскрытие трупов лабораторных животных и посев патологического материала?

Раздел 4. экология микроорганизмов
и основы санитарной микробиология

4.1. Микрофлора организма человека

Цель занятия

Знакомство с методами изучения микрофлоры человека. Изучение количественных и качественных показателей микрофлоры человека.

Основные сведения

Микрофлору человека составляет совокупность микробных биоценозов, встречающихся в организме здоровых людей и сформировавшихся в процессе эволюции. Качественный о количественный состав микрофлоры организма человека меняется в течение жизни и зависит от пола, возраста, питания, климата. Изменения микробных биоценозов могут быть обусловлены заболеваниями, применением лекарственных препаратов.

Микрофлору организма человека можно условно разделить на облигатную (резидентную) и факультативную (транзиторную). В последнее время все большее значение в патологии человека приобретают внутрибольничные (госпитальные) инфекции, возбудителями которых являются условно-патогенные микроорганизмы, относящиеся к резидентной микрофлоре человека. Их патогенность реализуется при ослаблении резистентности макроорганизма. Для изучения качественного состава микрофлоры человека и количественного содержания некоторых групп микроорганизмов используют микроскопический и микробиологический методы исследования.

1. Анализ микрофлоры кожи проводится двумя методами:

а) посев отпечатков пальцев рук на питательный агар в чашки Петри с последующим макроскопическим и микроскопическим изучением выросших колоний;

б) посев смывов с кожи для определения общего микробного числа и колиформных бактерий (бактерий группы кишечной палочки) – косвенного показателя свежего фекального загрязнения.

2. Анализ микрофлоры полости рта:

а) исследование зубного налета. С помощью стерильной петли или деревянной палочки берут зубной налет, готовят фиксированные мазки, окрашивают по методу Грама или Романовского-Гимзе и изучают морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов. Из зубного налета можно приготовить нативные препараты и обнаружить подвижные микроорганизмы с помощью темнопольной или фазово-контрастной микроскопии;

б) посев микрофлоры слизистой глотки (зева). Материал для исследований забирают при помощи стерильного ватного тампона. Тампоном делают посев на поверхность плотной питательной среды в чашки Петри (на питательный, кровяной агар или на другие среды в зависимости от цели исследования). После суточной инкубации изучают выросшие колонии.

3. Анализ микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Для изучения микрофлоры толстого кишечника исследуют фекалии, которые забирают ватным тампоном, стерильной деревянной или стеклянной палочкой. Проводят микроскопическое исследование мазков, окрашенных по Граму. Затем производят посев фекалий (обычно предварительно делают ряд разведений в физиологическом растворе) на агар Эндо (для выделения E.coli), кровяной агар (для выявления гемолитических стафилококков и стрептококков), агар Сабуро (для выделения дрожжевых грибов рода Candida), молочно-солевой агар. При необходимости проводят биохимическую идентификацию и серотипирование выделенных видов микроорганизмов.

Для количественных посевов берут определенный объем (или навеску) исследуемого материала, при необходимости разводят в изотоническом растворе и делают посевы соответствующих разведений на питательные среды. Исследования нормальной микрофлоры человека повторяют через определенные сроки, чтобы сделать заключение о количественных изменениях состава микрофлоры в динамике. Состав микрофлоры человека и количественное содержание отдельных представителей приведено в приложении 3.

Содержание лабораторной работы