Бенфотиамин

Количественно бенфотиамин определяют спектрофотометрическим методом, В качестве растворителя используют фосфатный буферный раствор с рН 4,9-5,1 (при 244 нм).

 

Тема № 27 - Анализ лекарственных средств, производных ксантина: алкалоиды – кофеин, теофиллин, теобромин и их соли, дипрофиллин, ксантинола никотинат (3 часа)

 

Цель: Освоить методики оценки качества лекарственных препаратов, производных ксантина.

Задачи обучения: приобрести экспериментальные навыки по проведению качественной и количественной оценки лекарственных препаратов: алкалоидов – кофеин, кофеин бензоат, теофиллин, теобромин.

Основные вопросы темы:

1. Общая характеристика лекарственных средств, производных ксантина.

2. Химический состав и формулы осадительных (общеалкалоидных) и специальных реактивов на алкалоиды.

3. Специфические реакции на кофеин, теофиллин, теобромин и их соли.

4. Применение указанных выше алкалоидов в медицинской практике.

Методы обучения и преподавания: устный опрос с презентацией основных вопросов по теме занятия на слайдах.

Литература:

1. Арзамасцев А.П. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 3-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 640 с.

2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 2-е изд. – М.: МЕДпресс-информ, 2008. – 616 с.

Контроль (вопросы и ситуационные задачи):

1. Каков химический состав осадительных (общеалкалоидных) реактивов?

2. Напишите формулу гетероцикла, лежащего в основе структуры кофеина, теобромина и теофиллина.

3. Какие способы используют для получения препаратов, производных ксантина? Напишите схему получения кофеина, теобромина и теофиллина из мочевой кислоты.

4. Какие примеси определяют в препаратах, производных ксантина, чем обусловлено их присутствие?

5. В чем особенность способов количественного определения лекарственных препаратов рассматриваемого ряда? Напишите уравнения, происходящих при этом химических реакций.

6. Как применяют препараты, производные ксантина в медицинской практике, в каких дозах и в виде каких лекарственных форм?

7. При выпаривании 0,1 г теобромина с несколькими каплями пергидроля и хлороводородной кислоты и последующем прибавлении раствора гидроксида аммония образовалось пурпурно-красное окрашивание. Напишите уравнение химической реакции. Можно ли эту реакцию считать специфичной? Ответ обоснуйте.

8. В двух пробирках находятся растворы солей ксантиновых алкалоидов. Оба препарата в растворах реагируют с хлоридом железа (III). Что это за препараты? Напищите их структурные формулы и уравнения химических реакций. Можно ли реакцией с хлоридом железа (III) отличить друг от друга соли ксантиновых алкалоидов?

 

ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Установить подлинность лекарственных средств, производных ксантина

1.1 Мурексидная реакция (общая реакция на производные пурина): помещают 0,1 г одного из испытуемых препаратов в фарфоровую чашку, прибавляют 10 капель пергидроля, 10 капель разведенной хлороводородной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 1-2 каплями раствора гидроксида аммония. Появляется пурпурно-красное окрашивание.

а) кофеин:

1. испытания с осадительными реактивами: к 1-2 каплям 1-2 %-ного раствора препарата алкалоида (кроме теобромина и теофиллина) на стеклянной пластинке прибавляют 1 каплю реактива. Наблюдают образование осадка и его окраску: Вагнера-Бушарда (бурый осадок), Майера (реакция отрицательная), Драгендорфа (оранжевый, переходящий в бурый), Зонненштейна (желтоватый);

2. испытания со специальными реактивами: к 0,001-0,002 г (1-2 кристалла) препарата алкалоида на стеклянной пластинке прибавляют 1 каплю натрия нитропруссида. Наблюдают появление желтоватого осадка.

б) теобромин, теофиллин:

1. встряхивают 0,1 г препарата 2-3 мин с 2 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия. К полученному раствору или фильтрату прибавляют 3 капли раствора хлорида кобальта. Появляется осадок серовато-голубого цвета (теобромин) или бело-розового цвета (теофиллин);

2. растворяют 0,05 г препарата в смеси 3 мл воды и 6 мл раствора гидроксида натрия, добавляют 1 мл раствора гидроксида аммония и 2 мл 5 %-ного раствора нитрата серебра. После встряхивания теобромин и теофиллин образуют белый студенистый осадок солей серебра.

в) кофеина бензоата:

1. обнаружение связанной бензойной кислоты: к 2 мл 1 %-ного водного раствора препарата прибавляют 0,2 мл раствора хлорида железа (III). Образуется осадок розовато-желтого цвета;

2. обнаружение иона натрия: отмеривают 1 мл 1%-ного раствора, подкисляют разведенной уксусной кислотой, если необходимо фильтруют, затем прибавляют 0,5 мл раствора цинк-уранил ацетата. Образуется желтый кристаллический осадок.

2. Выполнить испытания на чистоту препаратов

а) кофеин:

кислотность или щелочность: растворяют 0,2 г препарата в 10 мл свежепрокипяченной горячей воды. При добавлении к охлажденному раствору 5 капель тимолфталеина не должно появляться голубое окрашивание. Последнее должно появляться при последующем прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора гидроксида натрия;

потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 80 ^оС до постоянной массы, потеря которой не должна превышать 8,5 % для кофеина моногидрата и 0,5 для безводного кофеина;

органические примеси: масса 0,3 г препарата должна растворяться в 3 мл концентрированной серной кислоты, а также в 3 мл концентрированной азотной кислоты с образованием прозрачных, бесцветных растворов;

посторонние алкалоиды: приготовленные 10 мл раствора препарата (1:100) не должны давать опалесценции от прибавления нескольких капель реактива Майера.

б) кофеин-бензоат натрия:

прозрачность и цветность раствора: раствор 0,5 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным и бесцветным;

щелочность или кислотность: к раствору 0,25 г препарата в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды прибавляют несколько капель раствора фенолфталеина. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет. Розовая окраска должна появляться от прибавления не более 0,15 мл 0,05 М раствора гидроксида натрия;

потеря массы при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 80 ^оС до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 5 %;

органические примеси: растворяют 0,3 г препарата в 3 мл концентрированной серной кислоты. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона № 5а.

в) теобромин

потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 100-105 ^оС до постоянной массы, потеря которой не должна превышать 0,5 %;

органические примеси: раствор 0,1 г препарата в 2 мл концентрированной серной кислоты должен быть прозрачным и бесцветным.

г) теофиллин

кислотность: растворяют 0,5 г препарата в 75 мл свежепрокипяченной воды и прибавляют 1 каплю раствора метилового красного. Появившееся красное окрашивание должно переходить в желтое от прибавления не более 0,4 мл 0,05 М раствора гидроксида натрия;

потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 100-105 ^оС до постоянной массы, потеря которой не должна превышать 9,5 %;

органические примеси: раствор 0,1 г препарата в 2 мл концентрированной серной кислоты должен быть прозрачным и бесцветным;

другие пуриновые основания: раствор 0,2 г препарата в 5 мл раствора гидроксида аммония должен быть прозрачным и бесцветным.

3. Выполнить количественное определение лекарственных препаратов

а) кофеин: около 0,15 г предварительно высушенного при 80 ^оС до постоянной массы препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл уксусного ангидрида при нагревании на водяной бане, прибавляют 20 мл бензола, 5 капель раствора индикатора кристаллического фиолетового и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до получения желтого окрашивания. Параллелшьно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 0,01942 г кофеина, которого в высушенном препаратае должно быть не менее 99,0 %.

б) кофеин-бензоат натрия:

1) кофеин: около 0,3 г препарата (точная масса) растворяют в 30 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл. К раствору прибавляют 10 мл разведенной серной кислоты, 50 мл 0,1 н раствора йода, доводят объем раствора водой до метки и тщательно перемешивают. После отстаивания в течение 15 мин раствор быстро фильтруют через небольшой комок ваты в сухую колбу, прикрыв воронку часовым стеклом. Первые 10-15 капель фильтрата отбрасывают. В 50 мл фильтрата избыток йода оттитровывают 0,1 н раствором тиосульфата натрия, добавляя в конце титрования раствор крахмала. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н раствора йода соответствует 0,004855 г кофеина, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 38,0 % и не более 40,0 %.

2) бензоат натрия: около 1,5 г препарата (точная масса) растворяют в 20 мл воды в колбе с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 45 мл эфира, 3-4 капли смешанного индикатора (2 капли раствора метилового оранжевого и 1 капля раствора метиленового синего) и титруют 0,5 М раствором хлороводородной кислоты до появления сиреневой окраски в водном слое. В уконце титрования содержимое колбы хорошо встряхивают.

1 мл 0,5 М раствора хлороводородной кислоты соответствует 0,07205 г бензоата натрия, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 58,0 % и не более 62,0 %.

в) теобромин: около 0,3 г препарата (точная навеска) помещают в коническую колбу вместимостью 250-300 мл, прибавляют 100 мл кипящей воды (предварительно прокипяченной в течение 5 мин) и кипятят до полного растворения препарата. К горячему раствору прибавляют 25 мл 0,1 М раствора нитрата серебра, перемешивают, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1-1,5 мл раствора фенолового красного и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия до появления фиолетово-красного окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 0,01802 г теобромина, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 99,0 %.

г) теофиллин: около 0,4 г предварительно высушенного препарата (точная масса) растворяют в 100 мл кипящей воды (предварительно прокипяченной в течение 5 мин). К охлажденному раствору прибавляют 25 мл 0,1 М раствора нитрата серебра, 1,0-1,5 мл раствора фенолового красного и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия до появления фиолетово-красного окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 0,01802 г теофиллина, которого в высушенном препарате должно быть не менее 99,0 %.

Тема № 28 - Анализ лекарственных средств, производных птеридина и изоаллоксазина: фолиевая кислота и её аналог – метотрексат, рибофлавин и рибофлавина мононуклеотид (3 часа)

 

Цель: Освоить методики оценки качества лекарственных препаратов, производных птеридина и изоаллоксазина.

Задачи обучения: приобрести экспериментальные навыки по проведению качественной и количественной оценки лекарственных препаратов: кислота фолиевая и метотрексат, рибофлавин.

Основные вопросы темы:

1. Химическая структура, свойства и способы контроля качества кислоты фолиевой и метотрексата.

2. Особенности строения рибофлавина и рибофлавина мононуклеотида.

3. Лекарственные формы и применение витаминов, производных птеридина и изоаллоксазина, в медицинской практике.

Методы обучения и преподавания: устный опрос с презентацией основных вопросов по теме занятия на слайдах.

Литература:

1. Арзамасцев А.П. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 3-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 640 с.

2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 2-е изд. – М.: МЕДпресс-информ, 2008. – 616 с.

3. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии: Э.Н. Аксенова, О.П. Андрианова, А.П. Арзамасцев и др. – М.: Медицина, 2001. – 384 с.

4. Государственная фармакопея Республики Казахстан. 2 т. – Алматы: Изд. дом «Жибек жолы», 2009. – 804 с.

Контроль (вопросы):

1. Как классифицируют витамины гетероциклического ряда?

2. Опишите синтез рибофлавина.

3. Какими химическими реакциями доказывают подлинность кислоты фолиевой, рибофлавина?

4. Какими особенностями химической структуры объясняется окраска и флюоресценция рибофлавина?

 

Тесты

1. К производным птеридина относится только один из перечисленных препаратов:

A) рибофлавин;

B) кислота фолиевая;+

C) кислота аскорбиновая;

D) рибофлавина мононуклеотид;

E) ретинол.

 

2. Специфический запах имеет один из приведенных препаратов:

A) кислота фолиевая;

B) метотрексат;

C) рибофлавин;+

D) кислота аскорбиновая;

E) пикамилон.

 

3. Одновременное гидролитическое расщепление и окисление характерно для препарата:

A) кислота фолиевая;+

B) рибофлавин;

C) лейкорибофлавина;

D) рибофлавина мононуклеотид;

E) кислота аскорбиновая.

 

4. Для количественного определения содержания кислоты фолиевой используют метод:

A) рефрактометрии;

B) фотоэлектроколориметрии;

C) йодометрии;

D) перманганатометрии;

E) цериметрии.

 

ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Установить подлинность лекарственных препаратов

а) кислота фолиевая:

1. растворяют 0,01 г препарата в 5 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия, приливают 5 мл 0,1 М раствора хлороводородной кислоты и 1 мл раствора перманганата калия. Раствор помещают на 3 мин в водяную баню с температурой 80-85 ^оС. После охлаждения прибавляют по каплям 0,2 мл раствора пероксида водорода и фильтруют. Фильтрат имеет голубую флуоресценцию в УФ свете.

2. раствор 0,001 %-ного препарата в 0,1 М растворе гидроксида натрия имеет максимумы поглощения при 256, 283 и 365 нм. Отношение оптических плотностей при 256 и 365 нм составляет 2,8-3,0.

3. 0,01 г препарата взбалтывают с 1-1,5 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия в течение 2-3 мин и фильтруют; по 1-2 капли фильтрата переносят на часовое стекло и прибавляют 1 каплю раствора соли тяжелого металла. При этом образуются окрашенные осадки: со свинца ацетатом – лимонно-желтый; с меди (II) сульфатом – зеленый; серебра нитратом – желто-оранжевый: кобальта нитратом – темно-желтый; железа (III) хлоридом – красно-желтый.

б) метотрексат:

1. регистрируют УФ спектр 0,001 %-ного раствора препарата в 0,1 М растворе натрия гидроксида (l_max при 258, 303 и 370 нм);

2. 0,01 мл (100 мкг) 1 %-ного раствора препарата в 0,05 М растворе карбоната натрия при помощи микропипетки или капилляра хроматографируют на полоске Ленинградской бумаги (марки «С», 6 ´30 см) восходящим методом до распространения фронта растворителя (фосфатного буфера) на 23-25 см (3-3,5 ч). Хроматограмму вынимают из камеры, сушат и просматривают в УФ свете при длине волны 253 нм. НА хроматграмме должно быть одно пятно с R_f 0,65-0,75 (метотрексат) и не более трех флюоресцирующих пяте (птеридин).

в) рибофлавин:

1. растворяют 1 мг препарата в 100 мл воды. Раствор имеет яркую зеленовато-желтую окраску при дневном свете и зеленую флюоресценцию при облучении ультрафиолетовым светом. Флюоресценция исчезает при добавлении растворов кислот или щелочей, а под действием гидросульфита натрия [пентаоксодисульфата (IV) натрия] пропадает и флюоресценция, и зеленая окраска раствора;

2. образование с солями металлов нерастворимых интенсивно окрашенных комплексов (Ag⁺, Hg⁺, Cu²⁺, Fe²⁺, Co²⁺ и др.): к 2 мл 0,1 %-ного раствора рибофлавина прибавляют 1 мл 2 %-ного раствора нитрата серебра, появляется оранжевое окрашивание, переходящее со временем в красное.

2. Провести определение чистоты лекарственных препаратов

а) кислота фолиевая:

потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат до постоянной массы в вакууме при 110 ^оС и остаточном давлении 2·10³-2,6·10³ Па (15-20 мм рт. ст.). Потеря в массе не должна превышать 8,5 %.

б) метотрексат

Вода: около 0,05 г препарата (точная навеска) титруют реактивом Фишера с титром 1-1,2 мг воды на 1 мл. Конец титрования определяют электрометрически. Воды в препарате должно быть не более 10,00 %.

б) рибофлавин:

удельное вращение: от -110 ^о до -130 ^о. Около 0,1 г препарата (точная масса) растворяют в 4 мл 0,1 М спиртового раствора гидроксида калия и доводят свежепрокипяченной и охлажденной водой до 20 мл. Определение проводят не позже чем через 30 мин после приготовления раствора.

Удельное вращение рассчитывают по формуле:

[α]_D²⁰ = (α·100)/(l·C),

где α – измеренный угол вращения, град; l – длина рабочего слоя жидкости, дм; C – концентрация раствора, г на 100 мл раствора;

потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная масса) сушат при 100-105 ^оС до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 1,5 %.

3. Выполнить количественное определение лекарственных препаратов

а) кислота фолиевая (провести фотоколориметрическим методом)

Около 0,5 г препарата (точная навеска) растворяют в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Переносят 1 мл испытуемого раствора в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора до метки раствором гидрофосфата калия, перемешивают и используют для приготовления испытуемого раствора.

В две колбы вместимостью 50 мл наливают по 5 мл рабочего раствора стандартного образца кислоты фолиевой (колбы № 1 и № 2). В две другие колбы наливают по 5 мл испытуемого раствора (колбы № 3 и № 4). В пятую колбу наливают 5 мл раствора гидрофосфата калия (колба № 5).

В колбы № 1 и № 3 наливают по 1 мл 0,4 %-ного раствора перманганата калия, а в колбы № 2, 4 и 5 – по 1 мл воды. Содержимое колб перемешивают и оставляют на 2-3 мин. Затем во все колбы приливают по 1 мл 2 %-ного раствора нитрита натрия и по 1 мл раствора хлороводородной кислоты, получаемого смешиванием 4 объемов концентрированной хлороводородной кислоты и 6 объемов воды, хорошо перемешивают и оставляют на 2 мин. Во все колбы приливают по 1 мл 5 %-ного раствора сульфамата аммония или сульфаминовой кислоты, осторожно перемешивают вращательным движением, пока не прекратится выделение пузырьков газа. После этого во все колбы приливают по 1 мл 0,1 %-ного раствора N-(1-нафтил)-этилендиамина дигидрохлорида, хорошо перемешивают и оставляют на 10 мин. Измеряют оптическую плотность растворов на фотоэлектроколориметре со светофильтром, имеющим максимум пропускания 550 нм, в кювете с рабочей длиной 10 мм. Измерение проводят относительно контрольного раствора (колба № 5).

Содержание (%) безводной кислоты фолиевой вычисляют по формуле:

х = [(A₃-A₄) ·C·500]/[(A₁-A₂) ·m],

где A₁, A₂, A₃, A₄ – оптические плотности растворов в колбах № 1, 2, 3, 4; C – концентрация безводной кислоты фолиевой раствора стандартного образца, мг/мл; m – масса препарата, г.

Приготовление основного раствора стандартного образца кислоты фолиевой: около 0,05 г стандартного образца кислоты фолиевой (точная масса) растворяют в смеси 50 мл воды и 2 мл концентрированного раствора аммиака в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и хорошо перемешивают. Прибавляют несколько капель толуола. Хранят в прохладном месте в темноте. Основной раствор стандартного образца годен в течение 1 месяца.

Приготовление рабочего раствора стандартного образца кислоты фолиевой: помещают 1 мл основного раствора стандартного образца в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора до метки раствором гидрофосфата калия. Рабочий раствор стандартного образца содержит 0,01 мг кислоты фолиевой в 1 мл. Он годен только в день приготовления.

б) метотрексат

Количественное определение проводят методом бумажной хроматографии.

в) рибофлавин

Около 0,06 г препарата (точная масса) растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в смеси ледяной уксусной кислоты и 500 мл воды при нагревании на водяной бане. Раствор охлаждают и доводят объем раствора водой до метки. Переносят 10 мл этого раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл, приливают 3,5 мл 0,1 М раствора ацетата натрия и доводят объем раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с рабочей длиной 10 мм при 267 нм. Содержание (%) рибофлавина вычисляют по формуле:

х = (А · 10000)/(т · 850),

где А – оптическая плотность испытуемого раствора; т – масса, г; 850 – удельный показатель поглощения (Е_{1 см}^{1 %}) чистого рибофлавина при 267 нм.

Содержание рибофлавина в препарате должно быть 98,0-102,0 % в пересчете на сухое вещество.

 

 

Тема № 29 - Анализ лекарственных средств, производных фенотиазина: аминазин, пропазин, этаперазин, фторфеназин, фторфеназина деканоат, этмозин, этацизин (3 часа)

 

Цель: Освоить методики оценки качества лекарственных препаратов, производных фенотиазина.

Задачи обучения: приобрести экспериментальные навыки по проведению качественной и количественной оценки лекарственных препаратов: аминазина, пропазина, этаперазина и фторфеназина.

Основные вопросы темы:

1. Связь между строением и фармакологическим действием лекарственных средств, производных фенотиазина, в зависимости от заместителей.

2. Химические свойства лекарственных препаратов, производных фенотиазина.

3. Требования к качеству и анализ препаратов, производных фенотиазина.

4. Лекарственные формы, стабильность и условия хранения препаратов группы фенотиазина.

Методы обучения и преподавания: устный опрос по вопросам темы с презентацией химических формул и реакций на слайдах.

Литература:

1. Арзамасцев А.П. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 3-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 640 с.

2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 2-е изд. – М.: МЕДпресс-информ, 2008. – 616 с.

3. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии: Э.Н. Аксенова, О.П. Андрианова, А.П. Арзамасцев и др. – М.: Медицина, 2001. – 384 с.

Контроль (вопросы):

1. Напишите общую химическую формулу лекарственных веществ группы фенотиазина; укажите различия в строении и связь между химической структурой и фармакологическим действием в зависимости от заместителей.

2. Охарактеризуйте кислотно-основные свойства лекарственных веществ группы фенотиазина и значение этих свойств для качественной и количественной оценки препаратов.

3. Объясните способность препаратов группы фенотиазина к окислению; напишите химические структуры продуктов окисления.

4. Объясните особенности определения хлорид-иона и ковалентно связанного хлора в лекарственных веществах группы фенотиазина.

 

Тесты

1. Реакцию образования азокрасителя можно применить для всех препаратов, кроме одного:

A) кислоты фолиевой;

B) аминазина;+

C) рутина;

D) феназепама;

E) диэтилстильбэстрол.

 

2. В основе химического строения лекарственных веществ, производных фенотиазина, лежит гетероциклическая система, включающая гетероатомы:

A) азота и кислорода;

B) азота и фосфора;

C) азота и серы;+

D) серы и кислорода;

E) кислорода и фосфора.

 

3. Какой из приведенных препаратов группы фенотиазина содержит ковалентно связанный хлор?

A) пропазин;

B) аминазин;+

C) дипразин;

D) трифтазин;

E) этацизин.

 

4. Для предотвращения окисления системы фенотиазина в препаратах его группы при определении хлорид-иона реакцией с серебра нитратом препарат предварительно обрабатывают:

A) раствором хлороводородной кислоты;

B) раствором серной кислоты;

C) раствором щелочи;+

D) раствором хлорида меди (II);

E) раствором хлорида железа (III).

 

ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Определение подлинности лекарственных препаратов, производных фенотиазина:

1. выделение оснований при действии растворов щелочей: 0,1 г препарата растворяют в 5 мл воды и прибавляют 0,5 мл раствора натрия гидроксида; выпадает осадок, спустя 5 мин осадок отфильтровывают через плотный бумажный фильтр; фильтрат дает характерную реакцию на хлориды;

2. образование пикратов: 0,05 г препарата растворяют в 5 мл воды и прибавляют 3 мл 1 %-ного раствора кислоты пикриновой в 95 %-ном спирте; выпадает осадок желтого цвета;

3. реакции окисления (в качестве окислителей применяют концентрированную кислоту серную, бромную воду и др.): к 1 мл 0,1 %-ного водного раствора препарата прибавляют 3 капли 1 %-ного водного раствора калия бромата (или калия йодата) и 3 капли раствора разведенной кислоты хлороводородной. Аминазин и этаперазин образуют малиновое окрашивание; пропазин – красно-коричневое; дипразин – красное; трифтазин, фторфеназин – оранжевое; метеразин – бледно-розовое;

4. частные реакции:

а) аминазин:

- к 2 мл раствора препарата (1:25) прибавляют 2 капли раствора хлорида железа (II); вначале получается синее быстро исчезающее окрашивание, затем образуется хлопьевидный коричневый осадок. После подкисления этой жидкости несколькими каплями разведенной хлороводородной кислоты появляется интенсивное сине-фиолетовое окрашивание;

- 2 мл такого же, как выше, раствора смешивают с 1 мл раствора нитрата серебра; появляется вначале сине-фиолетовое окрашивание, затем выпадает серый порошкообразный осадок.

2. Провести испытания на чистоту

а) аминазин:

прозрачность, цветность и щелочность: раствор препарата (1:25) должен быть прозрачным, бесцветным и иметь слабо щелочную реакцию;

- 1 г препарата взбалтывают в течение 1 мин с 5 мл теплой воды. По охлаждении раствор фильтруют, фильтр промывают 2 мл воды, прибавляют 10 мл насыщенного вт течение суток водного раствора бензальдегида, перемешивают и оставляют на 5 мин. Затем прибавляют к раствору 1,5 г ацетата натрия, перемешивают до растворения его и через 5 мин сравнивают с эталоном, приготовленным из 10 мл эталона мутности № 3, 1 мл 5 %-ного раствора карбоната натрия и 7 мл воды. Муть, образовавшаяся в испытуемом растворе, не должна превышать эталон (аминоантипирин);

3. Выполнить количественное определение

а) аминазин: около 0,5 г препарата (точная масса) растворяют при перемешивании в 20 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды, прибавляют 3 капли свежеприготовленного смешанного индикатора (раствор метилового оранжевого и раствор метиленового синего 3:2) и титруют 0,5 М раствором хлороводородной кислоты из полумикробюретки до окраски контрольного опыта, состоящего из 25 мл свежепрокипяченной охлажденной воды, 0,05 мл 0,5 М раствора хлороводородной кислоты и 3 капель смешанного индикатора.

Из количества мл 0,5 М раствора хлороводородной кислоты, израсходованных на титрование навески, вычитают 0,05 мл 0,5 М раствора хлороводородной кислоты, взятые в контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора хлороводородной кислоты соответствует 0,1156 г амидопирина, которого в препарате должно быть не менее 99,0 %.

 

 

Тема № 30 - Анализ лекарственных средств, производных 1,4-бензодиазепина: хлордиазепоксид, диазепам, оксазепам, нитразепам и феназепам (3 часа)

 

Цель: Освоить методики оценки качества лекарственных препаратов, производных 1,4-бензодиазепина.

Задачи обучения: приобрести экспериментальные навыки по проведению качественной и количественной оценки лекарственных препаратов: хлозепид, диазепам, феназепам.

Основные вопросы темы:

1. Взаимосвязь между химической структурой и биологическим действием препаратов группы 1,4-бензодиазепина.

2. Физические и химические свойства лекарственных препаратов группы 1,4-бензодиазепина.

3. Требования к качеству и методы качественной идентификации и количественного анализа.

4. Применение препаратов группы 1,4-бензодиазепина в медицинской практике.

Методы обучения и преподавания: устный опрос с презентацией основных вопросов по теме занятия на слайдах.

Литература:

1. Арзамасцев А.П. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 3-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 640 с.

2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебное пособие, 2-е изд. – М.: МЕДпресс-информ, 2008. – 616 с.

3. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии: Э.Н. Аксенова, О.П. Андрианова, А.П. Арзамасцев и др. – М.: Медицина, 2001. – 384 с.

4. Государственная фармакопея Республики Казахстан. 2 т. – Алматы: Изд. дом «Жибек жолы», 2009. – 804 с.

Контроль (вопросы):

1. Охарактеризуйте внешний вид, растворимость, поглощение в УФ и ИК спектрах лекарственных препаратов группы бензодиазепина.

2. Объясните кислотно-основные свойства препаратов, производных бензодиазепина, и укажите их значение для идентификации и количественного определения препаратов.

3. Приведите продукты кислотного гидролиза и щелочного гидролиза в жестких условиях (сплавление с натрия гидроксидом) и способы их подтверждения.

4. Напишите химизм реакции образования азокрасителя и укажите её значение для качественного и количественного анализа препаратов группы бензодиазепина.

 

Тесты

1. Каким фармакологическим действием обладают лекарственные препараты группы диазепинов?

A) сосудисто-расширяющим;

B) седативным;+

C) спазмолитическим;

D) гипотензивным;

E) антибиотическим.

 

2. Жесткое гидролитическое расщепление препаратов группы бензодиазепина под действием натрия гидроксида приводит к выделению:

A) O₂;

B) NO₂;

C) NH₃;+

D) SO₂;

E) NO.

 

3. Количественное определение препаратов группы бензодиазепина после предварительной минерализации можно провести методом:

A) нитритометрии;+

B) цериметрии;

C) перманганатометрии;

D) кислотно-основного титрования в водной среде;

E) кислотно-основного титрования в неводной среде;

 

4. Легкая способность к окислению препаратов группы бензодиазепина обусловлена присутствием в их структуре:

A) карбонильной группы;

B) атомов азота;

C) гидратированного бензодиазепинового цикла;+

D) фенильного радикала;

E) атома хлора.

 

ПРИЛОЖЕНИЕ

1. Установить подлинность лекарственных препаратов

а) хлозепид

1) Кислотный гидролиз: 0,05 г хлозепида нагревают до кипения с разведенной кислотой хлороводородной в течение 2 мин и охлаждают. Полученный раствор дает характерную реакцию на первичные ароматические амины с образованием оранжево-красного осадка (ГФ ХI, вып. 1, с.159).

2) 0,3 г порошка растертых таблеток втряхивают с 10 мл ацетона в течение 3 мин и фильтруют. Фильтрат упаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют 2 мл разведенной кислоты хлороводородной и кипятят 1 мин. Полученный раствор после охлаждения дает характерную реакцию на первичные ароматические амины с образованием оранжево-красного осадка (ГФ Х, с.743).

б) диазепам

1) Около 10 мг субстанции растворяют в 3 мл кислоты серной; раствор при просмотре в УФ свете при длине волны 365 нм должен иметь зеленовато-желтую флюоресценцию.

2) 80 мг субстанции помещают в фарфоровый тигель, прибавляют 0,3 г натрия карбоната безводного и нагревают на открытом пламени в течение 10 мин. После охлаждения полученный остаток растворяют в 5 мл кислоты азотной разведенной и фильтруют. К 1 мл фильтрата прибавляют 1 мл воды; раствор дает реакцию на хлориды.

в) феназепам

1) к 1 мл раствора феназепама 3 % для инъекций прибавляют 3и капли концентрированной серной кислоты и перемешивают. Раствор окрашивается в желтый цвет. В УФ свете раствор дает ярко-зеленую флюоресценцию;

2) образование азокрасителя после кислотного гидролиза: 0,02 г феназепама нагревают до кипения с 2 мл разведенной кислоты хлороводородной в течении е 3 мин и охлаждают. Полученный раствор дает характерную реакцию на первичные ароматические амины с образованием оранджево-красного осадка (ГФ ХI, вып. 1, с.159);

3) щелочной гидролиз: 0,2 г феназепама кипятят с 10 мл раствора натрия гидроксида в течение 10 мин; выделяющийся аммиак определяют по посинению влажной красной лакмусовой бумаги; раствор подкисляют кислотой хлороводородной и фильтруют. Полученный раствор дает характерную реакцию А на бромиды (ГФ ХI, вып, 1, С159);

4) 0,2 г препарата растворяют в 2 мл хлороформа, прибавляют 2 мл 95 %-ного спирта, 2 капли 42 %-ного иди 57 %-ного раствора хлорной кислоты и перемешивают. Раствор окрашивается в зеленовато-желтый цвет. В ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм обнаруживается яркая зеленая флюоресценция.

2. Выполнить испытания на чистоту

Специфическими примесями препаратов группы бензодиазепинп являются соответствующие аминобензофеноны как исходные вещества при синтезе или продукты разложения Определяют их с помощью ТСХ, УФ спектрофотометрии и других физико-химических методов.

а) хлозепид

б) диазепам

1. Потеря массы при высушивании: 1,000 г субстанции сушат в вакууме при температуре 60 ^оС в течение 4 ч. Потеря в массе не должна превышать 0,5 %.

в) феназепам

1. реакции на галогены: хлор и бром в феназепаме определяют после минерализации, для чего его нагревают с раствором щелочи;

2. окрашенные плавы: при осторожном нагревании 10 мг феназепама в сухой пробирке над пламенем горелки препарат плавится с образованием плава фиолетового или красно-фиолетового цвета. Окраска плава феназепама изменяется в зависимости от значения рН. Так, при добавлении раствора натрия гидроксида красно-фиолетовая окраска раствора плава в 95 %-ном спирте переходит в сине-фиолетовую, а при добавлении разведенной кислоты серной – в сине-зеленую, а затем желтую;

3. прозрачность и цветность: раствор 0,2 г препарата в 10 мл хлороформа должен быть бесцветным и прозрачным;

4. потеря в массе при высушивании: около 0,5 г препарата (точная навеска) сушат при 100-105 ^оС до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5 %.

3. Выполнить количественное определение

Индивидуальные лекарственные вещества группы бензодиазепина количественно определяют методом кислотно-соновного титрования в среде уксусного ангидрида или ледяной уксусной кислоты (как однокислотные основания). Можно использовать методы нитритометрии, Къельдаля, аргентометрии после минерализации атомов галогено и сжиганием в колбе с кислородом:

а) хлозепид

б) диазепам

0,5 г субстанции растворяют в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором кислоты хлорной до желтовато-зеленого окрашивания, используя в качестве индикатора 0,3 мл раствора нильс кого синего А.

1 мл 0,1 М раствора кислоты хлорной соответствует 28,47 мг диазепама.

в) феназепам

Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 40 мл ъхлороформа, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до желтого окрашивания (индикатор – кристаллический фиолетовый). Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 0,03496 г феназепама.

 

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ ПОД РУКОВОДСТВОМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ (СРСП)

Тема № 1 – Производные пара- и мета-аминофенола. Требования к качеству, методы анализа

 

Цель: представление группы производных пара- и мета-аминофенола в медицинской практике

 

Задачи обучения: испытание лекарственных препаратов по требованиям нормативной документации, представление в качестве лекарственных препаратов.

 

Форма проведения: групповое обсуждение по материалам темы

 

Задания по теме:

1. Общая характеристика производных пара- и мета-аминофенола.

2. Медицинское применение лекарственных препаратов произв