Студопедия — РАЗДЕЛ 6. ОБМЕН ПРОСТЫХ БЕЛКОВ И АМИНОКИСЛОТ
Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

РАЗДЕЛ 6. ОБМЕН ПРОСТЫХ БЕЛКОВ И АМИНОКИСЛОТ






РАБОТА 13. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА МОЧЕВИНЫ

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И МОЧЕ ДИАЦЕТИЛМОНООКСИМОВЫМ МЕТОДОМ

Цель работы: ознакомиться с одним из методов определения концентрации мочевины в крови и моче, который широко используется в диагностике для оценки тяжести патологического процесса, для наблюдения за течением заболевания и оценки эффективности проводимого лечения, а также оценки состояния выделительной функции почек.

Задачи:

Ÿ определить концентрацию мочевины в сыворотке крови и моче и сделать выводы.

Мочевина является одним из основных конечных продуктов белкового обмена. Азот мочевины составляет около 50% остаточного азота крови. Количество мочевины в сыворотке крови в норме составляет 2,49-8,33 ммоль/л (20-50 мг/дл).

Содержание мочевины в крови возрастает при любых патологических состояниях. Однако наиболее важное диагностическое значение имеет увеличение количества мочевины при заболеваниях почек (в 2-10 раз). Уменьшение количества мочевины в крови наблюдается при болезнях печени (цирроз, гепатиты).

Количество мочевины, выделяемое из организма, свидетельствует об интенсивности белкового обмена. При употреблении пищи, богатой белками, а также при усиленной мышечной работе содержание мочевины в моче увеличивается, а при безбелковой диете – снижается. Количество мочевины в суточной моче подвержено возрастным изменениям и составляет:

у новорожденных – следы;

1-3-месячных – 0,7-1,4 г/сутки;

4-6-месячных – 1,0-3,3 г/сутки;

7-9-месячных – 3,8-5,7 г/сутки;

2-5-летних – 5-11 г/сутки;

14-летних – 20 г/cутки;

у взрослых – 20-35 г/сутки (333-582 ммоль/сутки).

Определение количества мочевины в моче представляет клинический интерес. Увеличение содержания мочевины наблюдается при лихорадочных состояниях, сахарном диабете. Количество мочевины в моче резко снижается при почечной недостаточности, патологиях печени (цирроз, дистрофия, гепатиты), а также при общем и белковом голодании.

Принцип метода. Мочевина взаимодействует с диацетилмоноокси-мом в присутствии тиосемикарбазида и трёхвалентного железа в кислой среде при нагревании с образованием комплексного соедине-ния розово-красного цвета. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевины.

1. Определение концентрации мочевины в сыворотке крови

Ход работы. В три пробирки вносят автоматической пипеткой:

1) в опытную – 0,01 мл свежей негемолизированной сыворотки крови,

2) в стандартную – 0,01 мл стандартного раствора мочевины,

3) в контрольную – 0,01 мл дистиллированной воды.

Во все пробирки добавляют по 2 мл рабочего реагента и содержимое перемешивают. Пробирки накрывают кусочками фольги, помещают в бурно кипящую водяную баню на 10 минут, после чего охлаждают под струёй проточной воды. Затем опыт и стандарт колориметрируют против контроля в кюветах с рабочей длиной 5 мм с зелёным светофильтром (длина волны 540 нм). Окраска растворов стабильна около 15 минут после снятия проб из бани.

Результаты: количество мочевины в сыворотке крови рассчитывают по формуле:

С = (Еоп × Сст) / Ест,

где С – количество мочевины в сыворотке крови (ммоль/л);

Сст – концентрация стандартного раствора мочевины (8,33 ммоль/л);

Еоп – оптическая плотность опытной пробы;

Ест – оптическая плотность стандартной пробы.

 

2. Определение концентрации мочевины в моче

Ход работы. Мочу перед анализом разбавляют дистиллированной водой в 25 раз (к 1 мл мочи добавляют 24 мл Н2О). В три пробирки вносят автоматической пипеткой:

1) в опытную – 0,01 мл разведенной мочи,

2) в стандартную – 0,01 мл стандартного раствора мочевины (8,33 ммоль/л),

3) в контрольную – 0,01 мл дистиллированной воды.

Во все пробирки добавляют по 2 мл рабочего реагента, перемешивают, накрывают кусочками фольги и помещают в бурно кипящую водяную баню на 10 минут. После кипячения пробы охлаждают под струёй проточной воды и колориметрируют (опыт и стандарт) против контроля в кюветах с рабочей длиной 5 мм с зелёным светофильтром (длина волны 540 нм).

Окраска растворов стабильна в течение 15 минут после снятия проб из бани.

Результаты: количество мочевины в моче рассчитывают по формуле:

С = (Еоп × Сст × А × 1,5) / Ест,

где С – количество мочевины в суточной моче (ммоль/сутки);

Сст – концентрация стандартного раствора мочевины (8,33 ммоль/л);

Еоп – оптическая плотность опытной пробы;

Ест – оптическая плотность стандартной пробы;

А – разведение мочи;

1,5 – коэффициент пересчёта на среднесуточное количество мочи (у мужчин – 1,5 л, женщин – 1,2 л).

Выводы:

Техника безопасности:

Ø Будьте внимательны при отмеривании рабочего реагента.

Ø Соблюдайте правила техники безопасности, пользуясь кипя-щей водяной баней.

 







Дата добавления: 2015-09-15; просмотров: 521. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!



Расчетные и графические задания Равновесный объем - это объем, определяемый равенством спроса и предложения...

Кардиналистский и ординалистский подходы Кардиналистский (количественный подход) к анализу полезности основан на представлении о возможности измерения различных благ в условных единицах полезности...

Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...

Композиция из абстрактных геометрических фигур Данная композиция состоит из линий, штриховки, абстрактных геометрических форм...

Мотивационная сфера личности, ее структура. Потребности и мотивы. Потребности и мотивы, их роль в организации деятельности...

Классификация ИС по признаку структурированности задач Так как основное назначение ИС – автоматизировать информационные процессы для решения определенных задач, то одна из основных классификаций – это классификация ИС по степени структурированности задач...

Внешняя политика России 1894- 1917 гг. Внешнюю политику Николая II и первый период его царствования определяли, по меньшей мере три важных фактора...

Механизм действия гормонов а) Цитозольный механизм действия гормонов. По цитозольному механизму действуют гормоны 1 группы...

Алгоритм выполнения манипуляции Приемы наружного акушерского исследования. Приемы Леопольда – Левицкого. Цель...

ИГРЫ НА ТАКТИЛЬНОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ Методические рекомендации по проведению игр на тактильное взаимодействие...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2024 год . (0.008 сек.) русская версия | украинская версия