РАЗДЕЛ 3. ВИТАМИНЫ

РАБОТА 8. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И МОЧЕ

Цель работы: ознакомиться с одним из методов количественного определения витамина в пищевых продуктах и биологических объектах.

Задачи:

· определить содержание витамина С в пищевых продуктах и моче;

· сравнить полученные результаты и сделать выводы.

Принцип метода. Метод основан на способности витамина С восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол:

2,6-дихлорфенолиндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой среде – красную, в восстановленном состоянии – бесцветную:

 

При определении количества витамина С исследуемый раствор, подкисленный соляной кислотой, титруют 2,6-дихлорфенолиндофено-лятом натрия. Как только всё количество витамина С, имеющееся в исследуемом растворе, окислится, раствор приобретает розовую окраску, характерную для 2,6-дихлорфенолиндофенола в кислой среде.

1. Определение количества витамина С в пищевых продуктах

Аскорбиновая кислота не синтезируется в организме человека. Основным источником этого витамина являются, в основном, свежие овощи и фрукты. В различных пищевых продуктах содержится следующее количество витамина С (в мг%):

чёрная смородина – 100-400;

укроп – 120-135;

лимон – 40-55;

капуста (свежая и квашеная) – 30-40;

томаты – 20-40;

лук зелёный – 16-33;

яблоки северные – 20-40;

яблоки южные – 5-17;

смородина красная – 5-15;

картофель – 7-10;

бананы – 7-10;

печень – 20-50;

селезёнка – 20-50;

кумыс – 20-25.

Источником витамина С может быть хвоя ели и сосны, содержащая 150-250 мг% (иногда до 400 мг%) аскорбиновой кислоты.

А. Определение содержания витамина C в плодах шиповника

Ход работы

а) гомогенизация биоматериала и экстракция витамина С. 1 г сухих плодов измельчают в фарфоровой ступке с 2 мл дистиллированной воды, смесь количественно переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят объём водой до метки. Через 10 минут смесь фильтруют через бумажный фильтр в мерную пробирку.

б) количественное определение витамина C в экстракте. К 2 мл полученного фильтрата добавляют 2-3 капли 10%-го раствора соляной кислоты и 2 мл дистиллированной воды. Содержимое переливают в колбочку на 50 мл и титруют 0,001н раствором 2,6-дихлорфенолиндо-фенола до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.

в) расчёт:

Х = (0,088 × А × 25 × 100) / Б × В (мг%),

где А – количество раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола (в мл), пошедшее на титрование;

В – количество сухого вещества в г, взятое для анализа;

Б – количество вытяжки в мл, взятое для титрования;

25 – общее количество вытяжки в мл;

0,088 – количество аскорбиновой кислоты в мг, эквивалентное 1 мл 0,001н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола.

 

Б. Определение содержания витамина С в пищевых продуктах

Ход работы

а) гомогенизация биоматериала и экстракция витамина С. Этот этап работы выполняют так же, как в предыдущем случае (при определении содержания аскорбиновой кислоты в шиповнике).

б) количественное определение витамина C в экстракте. 10 мл фильтрата приливают в колбочку на 50 мл, подкисляют 2-3 каплями 10%-го раствора соляной кислоты и титруют так же, как в предыдущем случае.

в) расчёт делают по той же формуле, что и при определении витамина C в шиповнике, только количество вытяжки (Б), взятое для титрования, будет равно 10 мл.

Примечание: если исходный цвет фильтрата сильно окрашен (например, у моркови или петрушки), берут 2 мл фильтрата и 8 мл дистиллированной воды, но это учитывают при расчётах.

2. Определение содержания витамина С в моче

Ход работы. В коническую колбу вносят 10 мл мочи и 10 мл дистиллированной воды. Добавляют 1 мл концентрированной уксусной кислоты и титруют 0,001н раствором 2,6-дихлорфенолиндо-фенола до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд.

Расчёт:

Х = (0,088 × А × 100) / 10 (мг %),

где А – количество 0,001н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола в мл, пошедшее на титрование;

10 – количество мочи в мл, взятое на титрование;

100 – коэффициент для выражения результата в мг %;

0,088 – эквивалент аскорбиновой кислоты.

Выводы: