Возбудители неклостридиальных анаэробных инфекций.
Особенностью этиологии неклостридиальных анаэробных инфекций является большое количество облигатных анаэробов из разных таксономических групп, входящих в состав нормальной микрофлоры человека и при ишемии тканей вызывающих гнойно-воспалительные заболевания различной локализации. К числу возбудителей относятся представители родов Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas, Fusobacterium, Peptococcus, Peptostreptococcus и др. Микробиологическая диагностика включает · микроскопию исследуемого материала (низкая специфичность); · экспресс-диагностику: ПЦР, ГЖХ. Использование газо-жидкостной хроматографии (ГЖХ) основано на хроматографическом определении в исследуемом материале специфических продуктов метаболизма анаэробов — летучих жирных кислот С2-С7 (ЛЖК). При этом маркёрами анаэробов являются изовалериановая, изокапроновая, уксусная, пропионовая кислоты; время исследования 30-40 мин. Аэробные бактерии ЛЖК не продуцируют. · бактериологический метод с соблюдением анаэробных условий при транспортировки и исследовании патологического материала!
5.3. Самостоятельная работа по теме: 1. Проведите микробиологическое исследование биоптата (аутоптата) из глубины раны больного с подозрением на анаэробную газовую гангрену, для чего: 1.1. Промикроскопируйте препарат из биоптата, окрашенный по Граму. Сделайте заключение. Учитывая быстрое развитие клиники газовой гангрены и зависимость исхода заболевания от своевременности и целенаправленности специфического (иммунотерапия) и неспецифического лечения, важно использовать ускоренные методы диагностики. К числу ускоренных методов микробиологической диагностики относится микроскопическое исследование мазков-отпечатков полученных биоптатов. Клостридии – крупные (0,4-1,2х3-10 мкм) грамположительные палочки, не образующие капсулы, за исключением C. perfringens. Обнаружение характерных микроорганизмов позволяет дать ориентировочный ответ о присутствии в исследуемом биоптате C. perfringens (капсульные бациллы) или других клостридий. 1.2. Учтите результаты посева биоптата в среду Вильсона-Блера и молоко. Сделайте заключение. Посев на среды Вильсона-Блера и молоко позволяет получить ориентировочный ответ о наличии C. perfringens – основного возбудителя анаэробной газовой гангрены уже через 2-6 ч культивирования. На среде Вильсона-Блера отмечают почернение среды, на среде с молоком образуется губкообразный сгусток, пронизанный пузырьками газа («штормовая реакция»). Остальные клостридии также изменяют среду Вильсона-Блера (почернение и образование газа у газообразователей) и молоко (пептонизируют, как C. histolyticum, или свертывают), но происходит это медленнее по сравнению с C. perfringens. 1.3. Проведите бактериологическое исследование по выделению и идентификации предполагаемого возбудителя с целью установления этиологии заболевания. На 1 этапе, помимо вышеуказанных исследований, производят посев исследуемого материала на среду для контроля стерильности (СКС) или какую-либо среду для выделения анаэробов (анаэробный кровяной агар, среда Китта-Тароцци и т. д.). На 2 этапе изучите и оцените результаты посева исследуемого материала на СКС визуально и на основании микроскопии препаратов, окрашенных по Граму, сделайте вывод. На среде СКС клостридии вызывают помутнение и газообразование. При микроскопии выявляют крупные грамположительные палочки, образующие споры, превышающие диаметр клетки и занимающие субтерминальное или центральное расположение. В случае получения накопительной культуры, соответствующей характеристике клостридий, осуществляется ее посев на плотную питательную среду с целью получения изолированных колоний. Чашки инкубируют в анаэробных условиях. На 3 этапе характерные колонии отсевают на соответствующие питательные среды для выделения и накопления чистой культуры. На 4 этапе полученная чистая культура подлежит идентификации. Укажите в протоколе свойства и методы, позволяющие определить видовую принадлежность. - учтите результаты посева культуры на «пестрый ряд»; для оценки результатов используйте таблицу 1. Таблица 1
|
