Методика выполнения работы. При определении жизнеспособности используют метод окрашивания зародышейПри определении жизнеспособности используют метод окрашивания зародышей. Для этого от фракции чистых семян без выбора отбирают четыре пробы по 100 штук семян, а для всех видов абрикоса, дёрена, лещины, миндаля, ореха, сливы и персика – три пробы по 100 штук семян. На случай замены повреждённых в ходе анализа зародышей рекомендуется дополнительно отсчитать 50 штук страховых семян. Затем при необходимости семена выделяют из околоплодника (при его водонепроницаемости) и намачивают в воде, имеющей температуру 18-200С, до полного набухания. Из подготовленных, таким образом, семян выделяют зародыши с попутным занесением в карточку анализа беззародышевых, заражённых вредителями и явно загнивших семян. Извлечённые здоровые зародыши помещают в воду или на влажную фильтровальную бумагу отдельно по каждой пробе. Непосредственно перед опытом воду аккуратно сливают, а зародыши окрашивают раствором индикатора по условиям предусмотренным стандартом (таблица 8). После соблюдения технических условий, обработанные индикатором зародыши промывают и аккуратно переносят на фильтровальную бумагу. Затем визуально осматривают зародыши и определяют число жизнеспособных и нежизнеспособых семян.
Таблица 8 - Технические условия определения жизнеспособности
Сокращения: ИК – индигокармин; ТЗ – тетразол (2, 3, 5 – трифенилтетразолиумхлорид); ЙЙК – йодистый раствор (йодистый калий + кристаллический, металлический йод); С – свет; Т – темнота.
При окрашивании индигокармином зародышей семян ели обыкновенной, сосны обыкновенной и крымской к жизнеспособным относят: а. совсем неокрашенные; б. окрашенные менее одной трети длины, начиная с кончика корешка зародыша. Жизнеспособными семенами клёна остролистного являются те, у которых зародыши: а. совсем не окрашены; б. имеют пятна на семядолях, не превышающие одной трети их поверхности и расположенные на противоположной стороне от корешка зародыша, и не окрашенные корешки; в. имеют бледноокрашенные корешки, но неокрашенные семядоли; г. имеют едва заметную окрашенную точку на кончике корешка. Для семян остальных видов жизнеспособными являются зародыши: а. совсем неокрашенные; б. со слабо окрашенной точкой на самом кончике корешка зародыша; в. с окрашенными пятнами на семядолях зародыша, если они удалены от места прикрепления корешка; г. с поверхностным бледным окрашиванием. К нежизнеспособным относятся семена всех видов растений со стекловидными неокрасившимися зародышами и окрасившимися, кроме выше перечисленных категорий. Использование тетразола основывается на свойстве индикатора окрашивать живые клетки зародыша в цвет от малинового до красного. При этом мёртвые клетки меристемы остаются неокрашенными. В случае применения тетразола при окрашивании зародышей клёна остролистного к жизнеспособным относят зародыши: а. полностью окрашенные; б. имеющие неокрашенные пятна на семядолях зародыша, не превышающие одной трети их поверхности, если они удалены от места прикрепления корешка; в. имеющие окрашенные семядоли и бледноокрашенные корешки и наоборот; г. имеющие едва заметную неокрашенную точку на кончике корешка. Метод йодистого окрашивания основан на свойстве йода окрашивать кразмалосодержащие клетки (живые). При окрашивании данным индикатором к жизнеспособным зародышам относят: а. окрашенные полностью в тёмный цвет различной интенсивности (от серого до чёрного); б. меристема (образовательная покровная ткань) и корневой чехлик которых окрашены в серый – чёрный цвет, а семядоли – в жёлтый.
Рассчитывают жизнеспособность семян как среднее арифметическое результатов окрашивания четырёх или трёх проб и выражают в процентах. Полученное значение является достоверным, если процент жизнеспособности каждой пробы отклоняется от среднего значения на допустимую величину (таблица 9). Если процентное значение жизнеспособности семян одной из проб отклоняется на большую величину, тогда среднеарифметический процент вычисляется с исключением показателя жизнеспособности данной пробы. В случае повторения недопустимости отклонения процентов жизнеспособности двух (трёх) проб от среднего значения, анализ семян на жизнеспособность осуществляют заново. Аналогичным образом поступают если окончательное значение жизнеспособности семян на 5 % и менее ниже нормы, установленной оценочным стандартом для третьего класса.
Зародыши семян клена остролистного после окрашивания тетразолом: + жизнеспособные; - нежизнеспособные
+ + - + - Зародыши семян сосны обыкновенной после окрашивания йодистым раствором: + жизнеспособные; - нежизнеспособные.
Зародыши семян яблони (а) и ясеня (б) после окрашивания индигокармином: + жизнеспособные; - нежизнеспособные.
Рисунок 10 – Результаты окрашивания зародышей (по ГОСТ Р 50264 – 92) Таблица 9 - Значение допустимых отклонений
В случае, когда при повторном анализе значение жизнеспособности семян двух проб отклоняется от среднеарифметического на недопустимую величину или жизнеспособность не соответствует третьему классу качества, то процент жизнеспособности рассчитывают как среднее арифметическое двух определений, т.е. по восьми или шести пробам. На основании результатов предыдущих лабораторных работ составляются документы о качестве семян согласно формам ГОСТ Р 51173-98 (рисунок 11-16). Сертификат о качестве семян выписывают на партию кондиционных семян, прошедших проверку по всем показателям и сформированную с целью реализации. В этом документе, наряду с показателями посевных качеств и соответствующего им класса качества, указывается срок действия сертификата (таблица 10).
Таблица 10 - Срок действия документов о качестве
Штамп контрольно семенной станции Настоящий Сертификат характеризует качество всей партии семян при соблюдении хозяйством (организацией) правил отбора проб и гарантии о сохранности партии семян
|
ГОСТ Р51173-98
