Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Опыт 1. Пристеночное пищеварение




Цель опыта: показать значение сорбирования ферментов на мембранах клеток слизистой кишечника в пищеварении.

Порядок проведения работы. Кусочек слизистой оболочки верхней четверти тонкой кишки крысы весом 10-15 мг поместить в стаканчик Хагедорна, в который налито 4 мл охлажденного раствора Рингера (t +3,5 градусов). Встряхивая в течение 30 секунд, смывают амилазу, которая не была сорбирована на поверхности кишки. Эта фракция (амилаза С) участвует в полостном пищеварении и используется как показатель полостного пищеварения.

Кусочек отмытой слизистой перенести в ступку и проводят его гомогенизацию в 4 мл раствора Рингера. Гомогенизат перелить в стаканчик Хагедорна и встряхивать 5 минут. Так отмывается фракция амилазы гомогената (Г-амилаза), которая характеризует мембранное пищеварение.

Профильтровать экстракты С и Г фракции амилазы и определить в них амилолитическую активность по методу Вольгемута (определяется убыль крахмала при ферментативном гидролизе по изменению окраски йодо-крахмальных комплексов (по мере убыли крахмала синяя окраска постепенно слабеет и исчезает).

Ход определения амилолитической активности: В 2 штатива поставить 6-8 пробирок, в которые налить по 1 мл р-ра Рингера, затем в 1-ю пробирку одного штатива добавить 1 мл экстракта, содержащего фракцию С-амилазы, а в 1-ю пробирку 2 штатива - 1 мл экстракта, содержащего фракцию Г-амилазы. После встряхивания пробирок 1 мл смеси последовательно переносят в следующую пробирку, вновь встряхивают и т.д. Из последней пробирки 1 мл смеси выливают. Таким образом, получен ряд разведений в 2 раза. Затем в пробирки налить по 2 мл 1% р-ра крахмала и поместить пробы в водяную баню при 38 градусов на 30 минут, после чего реакцию остановить добавлением во все пробирки по 1 мл 1% р-ра соляной кислоты. Затем во все пробирки прилить по 1 капле йодного раствора. Активность амилазы рассчитывается по разведению фермента в последней пробирке, которая не отличается по окраске от контроля (в контроле имеются все компоненты, кроме амилазы, ее заменяет 1 мл р-ра Рингера). Результат выражается в условных единицах Вольгемута, характеризующих степень разведения.

Пример: 4-я пробирка -16 единиц; 5-я 32 ед.и т.д. После определения амилолитической активности С и Г фракций находят отношение мембранного пищеварения (М) к полостному (С) М/С. В норме эта величина больше 2,5-3. Оформить протокол. Сделать вывод о значении мембранного пищеварения.

 

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ:

 

1. Пищеварительный конвейер - основа полноценного гидролиза питательных веществ и их всасывания.

2. Роль толстого кишечника в иммунитете.

 

ТЕСТОВЫЙ КОНТРОЛЬ ИТОГОВОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ:

 

1. Какие виды пищеварения происходят в тонком кишечнике?

2. В чем заключается роль ферментов кишечного сока в общей цепи пищеварительного процесса?

3. Объясните особенности этапов полостного гидролиза: а)монофазный, б) гетерофазный.

4. Как регулируется сокообразование в тонком кишечнике?

5. Назовите основные стимуляторы и ингибиторы внешнесекреторной функции

поджелудочной железы

6. Назовите ферменты, участвующие в мембранном пищеварении тонкого кишечника.

7. Как происходит всасывание питательных веществ в тонком кишечнике?

8. Что собой представляет "пищеварительный конвейер"?

9. Объясните происхождение метеоризма , выберите правильные ответы: а) нарушение кровоснабжения тонкого кишечника; б) гниение, брожение в кишечнике; в) преобладание давления газов в просвете кишки над его напряжением в крови.

10. Какие ферменты образуются в толстом кишечнике под влиянием микроорганизмов?

11. Образуются ли в толстом кишечнике витамины? Какие?

12. Возможна ли гипокалиемия при длительных поносах? Почему?

 

Задачи к занятию смотреть в сборнике «Контрольные вопросы по курсу нормальной физиологии» в разделе «Физиология питания и пищеварения» (занятие №4).

 

Занятие № 6


Поможем в написании учебной работы
Поможем с курсовой, контрольной, дипломной, рефератом, отчетом по практике, научно-исследовательской и любой другой работой





Дата добавления: 2014-11-10; просмотров: 960. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2022 год . (0.043 сек.) русская версия | украинская версия
Поможем в написании
> Курсовые, контрольные, дипломные и другие работы со скидкой до 25%
3 569 лучших специалисов, готовы оказать помощь 24/7