ТЕМЫ ДЛЯ РЕФЕРАТИВНЫХ СООБЩЕНИЙ. 1. Анаболические процессы, в которых принимают участие аминокислоты
1. Анаболические процессы, в которых принимают участие аминокислоты. Использование аминокислот в медицинской практике. 2. Аминоацидурии, виды, этиология и патогенез, клинические проявления, основы лечения. Лабораторная работа 1 Определение активности аминотрансфераз Принцип В результате реакций трансаминирования, происходящих под действием аспартатаминотрансферазы (АсАТ, L‑ аспартат: 2‑ оксоглутарат аминотрансфераза, КФ 2.6.1.1.) и аланинаминотрансферазы (АлАТ, L‑ аланин: 2‑ оксоглутарат аминотранфераза, КФ 2.6.1.2.), из аспарагиновой кислоты и аланина образуются, соответственно, оксалоацетат и пируват. Оксалоацетат, подвергаясь самопроизвольному декарбоксилированию, превращается в пируват. При добавлении кислого 2, 4‑ динитрофенилгидразина ферментативная реакция останавливается и образуется гидразон пировиноградной кислоты. Последний в щелочной среде дает бурое окрашивание, интенсивность которого пропорциональна количеству образовавшейся пировиноградной кислоты. Реактивы 1) Р-р субстрата АсАТ: смесь a‑ кетоглутаровой кислоты и аспарагиновой кислоты, 2) р-р субстрата АлАТ: смесь a‑ кетоглутаровой кислоты и аланина, 3) р-р 2, 4‑ динитрофенилгидразина в 1, 0 М HCl, 4) 0, 4 М р-р NaOH. Стандартный р-р пировиноградной кислоты, 0, 1 ммоль/л. Материал исследования Сыворотка крови. Проведение анализа
Расчет Активность АлАТ, ммоль/л · ч = Активность АсАТ, ммоль/л · ч = Ест, Еоп2, Еоп3 – соответственно оптическая плотность стандартной и опытных проб для АлАТ и АсАТ, Сст – концентрация стандартного раствора, 2 – коэффициент перевода 30 минут в 1 час.
|
, где
