Хроматография на бумаге
По механизму разделения различают распределительную, адсорбцион-ную, осадочную и другие виды бумажной хроматографии (БХ). В распре-делительной жидкость-жидкостной хроматографии бумага, приготовлен-ная из специальных сортов хлопка, выполняет роль носителя неподвижной жидкой фазы (НФ), в качестве которой часто выступает вода, адсорбиро-ванная парами бумаги. В таком случае гидрофильная бумага используется для нормально-фазовой хроматографии. Растворителями (ПФ) являются спирты (метанол, этанол, н-пропанол, бутанол), простые эфиры (этиловый, метиловый), кетоны (ацетон, ацетил-ацетон), эфиры органических кислот (метилацетат, этилацетат), пиридин, хлороформ. Чаще используются смеси растворителей. Так, для разделения неорганических неполярных веществ употребляют системы: - ацетон: НCl: Н 2О (в различных соотношениях); - Н-бутанол, насыщенный НСl (различной концентрации); - Н-бутанол: 0,1М НNОз - ацетилацетон. Для разделения некоторых органических веществ используют метод обращенных фаз. В этом методе для придания бумаге гидрофобного харак-тера ее импрегнируют (пропитывают) нафталином, парафином, раствором каучука, силиконом и др. Такая бумага служит носителем для неполярных растворителей в качестве НФ. В качестве ПФ применяют смеси кислот с низшими спиртами. Обращеннофазовая бумажная хроматография использу-ется, например, для разделения и идентификации полинасы-щенных жирных кислот при изучении состава липидов, вы-деленных из животных тканей. Бумагу пропитывают 5% рас-твором силикона, в качестве ПФ используют 85% раствор уксусной кислоты. Рис.3.4.1. Виды бумажной хроматографии Разделение веществ в распределительной БХ осуществляется благодаря различию в скоростях движения компонентов при многократном повторе-нии актов экстракции и сорбции. Скорость перемещения компонентов за-висит от их коэффициентов распределения (как и в методе экстракции). По направлению движения элюента (ПФ) различают восходящую, нис-ходящую и радиальную (круговую) хроматографию. Если элюент движется по бумаге вверх, метод называют восходящей (а) бумажной хроматографией; при его движении сверху вниз - нисходя-щей (б) бумажной хроматографией. Очень быстро можно осуществить хроматографический анализ методом радиальной (в) бумажной хромато-графии, в котором используется бумажный круг (г) с фитилем, опущен-ным в элюент. (рис. 3.4.1) Иногда при сложном составе пробы не удается разделить ее компонен-ты с помощью одного растворителя. Тогда применяют двумерную хрома-тографию. В угол квадратного листа хроматографической бумаги наносят хроматографической бумаги наносят раствор пробы и хроматографируют сначала в одном элюенте, затем, по-вернув хроматограмму на 90, - в другом. Первый элюент производит предварительное разделение компо-нентов пробы, второй окончатель-ное (рис.3.4.2). Рис.3.4.2. Двухмерная хроматография Для проведения хроматографии на бумаге используют стеклянные герметизированные камеры. Внутри ка-меры в верхней (нисходящий вариант) или нижней ее части (восходящий вариант) помещают сосуд для подвижной фазы (лодочку). Радиальную хроматографию можно осуществить в чашке Петри. Детекцию зон, идентификацию и количественное определение в БХ проводят также, как и в методе тонкослойной хроматографии. Методом распределительной жидкостной бумажной хроматографии успешно анализируют смеси катионов в неорганическом качественном анализе, смеси аминокислот и других органических кислот, пептидов, пес-тицидов, фенолов, красителей, синтетических поверхностно-активных ве-ществ.
|
