Провокационные аллергические тесты
В отдельных случаях при проведении кожных проб реакция может быть ложноположительной из-за крайне высокой чувствительности капилляров кожи к механическому раздражению или консерванту (фенолу). В связи с этим прибегают к высокоспецифичным провокационным аллергическим тестам. Конъюнктивальный провокационный тест применяют для диагностики аллергического конъюнктивита и выявления аллергенов, вызывающих его развитие. Техника проведения такова: в конъюнктивальный мешок, отодвинув нижнее веко, закапывают 1–2 капли тест-контрольной жидкости. При отсутствии изменений конъюнктивы через 15–20 мин переходят к исследованию с аллергеном. Аллерген (1–2 капли) закапывают в концентрации, которая дала слабоположительную кожную пробу. При положительной реакции проявляются слезотечение, гиперемия конъюнктивы, зуд век. Назальный капельный тест. Может использоваться при сезонном рините в случаях сенсибилизации к пыльце растений, при круглогодичном рините с подозрением на аллергию к бытовой пыли. Проводят в период ремиссии. Вначале в одну половину носа пипеткой капают 3 капли тест-контрольной жидкости. Если в течение 15 мин отсутствует реакция со стороны слизистой оболочки носа, можно приступить к назальному провокационному тесту с предпологаемым аллергеном. Тест проводиться с аллергеном в концентрации, при которой была получена сомнительная реакция в ответ на внутрикожное тестирование, объем аллергена – 3 капли. Если через 10-15 мин получена отрицательная реакция, концентрацию аллергена увеличивают. Тест считается положительным, если после закапывания аллергена в полости носа появляется заложенность носа, ринорея, чиханье. Провокационная ингаляционная проба проводиться в фазе ремиссии заболевания в условиях стационара, чаще при отрицательных результатах скарификационных тестов с аллергенами в диагностике бронхиальной астмы в основном с целью дифференциальной диагностики (бронхиальная астма, обструктивный бронхит и т.п.). Перед постановкой теста предварительно регистрируют параметры функции внешнего дыхания (объем форсированного выдоха в течение первой секунды – ОФВ1, ЖЕЛ, коэффициент Тиффно). Исходный уровень ОФВ1 должен быть не менее 70% от должного значения. Вначале проба проводиться с тест-жидкостью – дистиллированной водой в течение 3 мин. При отрицательном результате приступают к провокационной пробе с испытуемым аллергеном в течение 3 мин (время проведения пробы было окрашено при положительных результатах). Проба считается положительной при изменении аускультативной картины – удлинение выдоха, появление сухих свистящих хрипов на выдохе, снижение ЖЕЛ на 10%, ФОВ – на 15-20%. Провокационный ингаляционный тест с карбахолином (ацетилхолином) используется для подтверждения диагноза бронхиальной астмы. Провокационный ингаляционный тест с холодным воздухом применяется для исследования неспецифической гиперреактивности бронхов. Ингаляционная провокационная проба может сочетаться с лабораторными методами аллергодиагностики. Проведение до ингаляционной и через 24 ч после ингаляционной провокационной пробы исследования с помощью иммуноферментного анализа IgE или теста деструкции тучных клеток с тем же профессиональным аллергеном имеет важное практическое значение. Увеличение уровня IgE и процента дегрануляции тучных клеток через 24 часа после провокационной ингаляции в значительной мере повышает достоверность полученных положительных результатов. Подъязычный провокационный тест используется для диагностики пищевой и лекарственной аллергии. Аллерген наносится на слизистую оболочку подъязычной области. При пищевой аллергии применяются натуральные продукты в разведении 1:10, при лекарственной — 1/8–1/4 разовой дозы растворенного вещества. Тест считается положительным при появлении в подъязычной области гиперемии, отека, зуда, а также при учащении пульса, чиханье, кашле.
Лабораторные методы специфической аллергодиагностики (in vitro) Эти методы могут широко использоваться при аллергических заболеваниях в фазе обострения, в период массивного контакта с аллергеном, при высокой чувствительности заболевших к аллергену, при наличии противопоказаний, у детей, при идентификации профессиональных аллергических заболеваний, так как исключают возможность появления неспецифических, ложноаллергических реакций.
К методам выявляющим аллергические реакции немедленного, В-зависимого типа относятся: a) определение общего IgE (однако, его высокий уровень может быть и в продуктивной фазе иммунного ответа), b) определение аллерген-специфических Ig E и IgG4-
Определение общего IgE, аллерген-специфических IgE и IgG4 антител методом иммуноферментного анализа (ИФА) Определение проводится с помощью специальных наборов ИФА. Процедуру анализа можно проводить как на планшетах, так и в пробирках. Рисунок 1 демонстрирует 2 основных разновидности ИФА. Кроме IgE в аллергических реакциях немедленного типа могут принимать участие антитела субкласса IgG4, поэтому по возможности диагностика должна включать определение специфических IgE и IgG4. Выявление последних может быть проведено в отношении более чем 400 аллергенов, включающих следующие основные группы: пищевые аллергены; аллергены бактерий и грибов, шерсти и перхоти животных, перьев птиц; аллергены пыльцы трав и деревьев; аллергены клещей, домашней и библиотечной пыли, ядов насекомых; лекарственные и профессиональные аллергены. Принцип метода. Соответствующий аллерген (или антитела к IgE) фиксирован на поверхности иммунологического планшета или бумажного диска. При инкубации пробы специфические антитела связываются с твердой фазой. Промывка моющим раствором удаляет с поверхности планшета или диска все несвязавшиеся антитела. Инкубация диска (планшета) с антисывороткой против IgE человека (или против IgG4), конъюгированной с ферментной меткой (чаще - пероксидаза хрена), и последующая инкубация с хромогенным субстратом приводит к интенсивному окрашиванию пробы при наличии общего или аллерген-специфических IgE (IgG4).
|
