Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Определение аллерген-специфических IgE in vitro методами радиоаллергосорбентного и хемилюминисцентного анализа





В соответствии с нормативами, принятыми ВОЗ, для иммуноголлобулина Е одна международная единица 1 МЕ/мл соответствует 2,4 нг IgE. Обычно концентрация IgE выражается в МЕ/мл или кЕ/мл (кЕ - килоединица). IgE определяется у плода человека начиная с 11 недель развития в концентрации 1 - 10 к Е/л.

Гипериммуноглобулинемия Е - повышенное содержание IgE характерно для аллергических состояний различной этиологии, гельминтозов, изолированного дефицита IgA, гипоплазии тимуса (синдромы Ди-Джорджи, Вискотт-Олдриджа), хронического гранулематоза детей, синдрома Джоба.

Контрольные значения концентрации в норме и при различной патологии даны в таблице 1.

Таблица 1. Значения 1%Е в норме и при патологии (кЕ /л)

Ig E в норме IgE при патологии взрослых
  Новорожденные     0-2   Аллергический ринит     120 - 1000
  Дети 3-6 месяцев   3-10     Атопическая бр. астма     120 - 1200
Дети 12 месяцев 8-20 Атопический дерматит 80 - 14000
  Дети 5 лет   10-50 Аллергический бронхолегочный аспергиллез: ремиссия 80 - 1000
  Дети 10 лет   15-60 Аллергический бронхолегочный аспергиллез обострение 1000 - 8000  
Взрослые 20-100 Гипер-IgE синдром 1000 - 14000  
    IgE- миелома > 15000

 

Радиоаллергосорбентный тест (PACT) используется для определения уровней аллерген-специфических антител различных классов (IgE, IgG4) в сыворотке крови. К испытуемой сыворотке добавляют нерастворимый полимер с фиксированным на его поверхности аллергеном. Происходит связывание аллергена со специфическими антителами (если они имеются). После отмывания неспецифических IgE добавляют антитела против IgE, меченые радиоактивным йодом. Если в сыворотке имеются соответствующие аллергену антитела, то происходит образование комплекса: аллерген на бумаге + специфический IgE + антитела к IgE. Количество связавшихся меченых изотопом aнти-IgE-антител показывает количество специфических IgE в сыворотке (см. Рис.2).

Определение аллерген-специфических IgE с помощью хемилюминисцентного анализа основано на модификации PACT. Проводится реакция сыворотки пациента с панелью аллергенов или смесей аллергенов. Панель содержит отдельные участки целлюлозных нитей с ковалентно связанными аллергенами. Исследование начинается заполнением панели сывороткой пациента. В ходе инкубации IgE сыворотки связываются с покрытыми аллергеном целлюлозными нитями. Затем панель промывают буфером, чтобы удалить несвязавшиеся компоненты сыворотки. В камеру добавляют меченые ферментом анти-IgE, которые связываются с IgE сыворотки, фиксированными на нитях. После второй промывки панель заполняют смесью фотореагентов; в их реакции с мечеными антителами испускается хемилюминисценция. Количество испускаемого света от каждой нити прямо пропорционально количеству аллерген-специфического IgE в сыворотке пациента. Для измерения интенсивности хемилюминисценции используются люминометры или денситометры.

Наряду с выявлением специфических IgE используются и другие лабораторные тесты для диагностики как антителозависимых реакций, так и реакции замедленного типа. Данные методы позволяют изучить особенности патогенеза аллергических реакций. К ним относятся

- реакции дегрануляции тучных клеток или базофилов,

- реакция торможения миграции лейкоцитов крови (РТМЛ),

- реакция повреждения нейтрофилов (ППН),

- определение свободного связанного гистамина

- определение ИЛ 4,5,6, TGFb

- определение триптазы и хемоттриптазы







Дата добавления: 2015-04-19; просмотров: 978. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!




Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...


Композиция из абстрактных геометрических фигур Данная композиция состоит из линий, штриховки, абстрактных геометрических форм...


Важнейшие способы обработки и анализа рядов динамики Не во всех случаях эмпирические данные рядов динамики позволяют определить тенденцию изменения явления во времени...


ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ МЕХАНИКА Статика является частью теоретической механики, изучающей условия, при ко­торых тело находится под действием заданной системы сил...

Факторы, влияющие на степень электролитической диссоциации Степень диссоциации зависит от природы электролита и растворителя, концентрации раствора, температуры, присутствия одноименного иона и других факторов...

Йодометрия. Характеристика метода Метод йодометрии основан на ОВ-реакциях, связанных с превращением I2 в ионы I- и обратно...

Броматометрия и бромометрия Броматометрический метод основан на окислении вос­становителей броматом калия в кислой среде...

Различие эмпиризма и рационализма Родоначальником эмпиризма стал английский философ Ф. Бэкон. Основной тезис эмпиризма гласит: в разуме нет ничего такого...

Индекс гингивита (PMA) (Schour, Massler, 1948) Для оценки тяжести гингивита (а в последующем и ре­гистрации динамики процесса) используют папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс (РМА)...

Методика исследования периферических лимфатических узлов. Исследование периферических лимфатических узлов производится с помощью осмотра и пальпации...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2025 год . (0.012 сек.) русская версия | украинская версия