Оротовая кислота

Проба: минимум 10 мл мочи; консервируеться с помощью двух капель хлороформа. Проба подлежит незамедлительной отправке в лабораторию при температуре окружающей среды.

Синтез пиримидинов, главным промежуточным соединением которого является оротовая кислота, регулируется на уровне карбамилфосфатсинтетазы II (CPS II), которая катализирует первую реакцию в этом метаболическом пути. Митохондриальный изофермент CPS I катализирует продуцирование карбамилфосфата при детоксикации азота. Условия, при которых происходит накопление митохондриального карбамилфосфата, особенно при большинстве нарушений орнитинового цикла, способствуют также повышению уровней цитозолевого карбамилфосфата, биосинтеза пиримидинов и экскреции оротовой кислоты c мочой. Анализ содержания органических кислот может выявить это соединение, но для точного количественного определения необходимо применение методов высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) или масс-спектроскопии (МS). Анализ содержания оротовой кислоты в моче является одним из ургентных исследований при диагностировании недостаточности орнитинтранскарбамилазы (OTC) у детей с гипераммониемией. Скрытые повышения уровня оротовой кислоты при биосинтезе пиримидинов, как и у гетерозиготных носительниц при недостаточности орнитинтранскарбамилазы, можно распознать по повышенным концентрациям оротовой кислоты в моче после приема аллопуринола, который блокирует превращение оротовой кислоты в уридинмонофосфат. Повышенные концентрации оротовой кислоты можно также обнаружить при различных других генетических нарушениях, в том числе при митохондриальных нарушениях, синдроме Ретта и гиперурикемии (синдроме Леша-Нихана).

Пурины и пиримидины

Проба: минимум 10 мл мочи; желательна утренняя проба или суточный забор мочи

(хранить в холодном и защищенном от света месте). Консервируют пробу двумя каплями хлороформа; для диагностирования недостаточности аденилосукциназы, пробу отправляют в лабораторию при температуре окружающей среды или в сухом льду.

Анализ содержания пуринов и пиримидинов в моче с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) может указывать на наличие неврологических нарушений, особенно у пациентов с проблемами почечных канальцев. К числу других симптомов, которые могут быть следствием генетических нарушений метаболизма пуринов или пиримидинов, относятся артрит, мышечные судороги и мышечное истощение, анемия или иммунодефицит. Пищевой статус влияет на экскрецию пуринов и пиримидинов, уровень которых может значительно варьировать в течение суток: поэтому для анализа следует брать пробу суточной или утренней мочи. При заборе мочи и в предшествующий ему день следует избегать приема напитков и пищи, содержащих метилксантины, как, например кофе, черный чай, какао или лакрица. При наличии у пациента инфекции мочевыводящих путей, взятие пробы не допускается, так как бактерии заметно уменьшают концентрации пуринов или пиримидинов в моче. Пробу мочи, взятую для постановки диагноза неврологического заболевания, следует немедленно заморозить и доставить в лабораторию в сухом льду, так как сукциниламиноимидазол-карбоксамид-рибонуклеза (SAICAR), являющаяся маркерным метаболитом недостаточности аденилосукциназы, неустойчива при комнатной температуре. С помощью метода газовой хроматографии / масс-спектроскопии мочу следует исследовать на наличие в ней дигидропиримидинов, как и при анализе органических кислот, так как высокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC) не в состоянии обнаружить эти вещества.

 

Исследования при нарушениях метаболизма галактозы

Пробы

Скрининг (на активность галактозы, галактозо-1-фосфат-уридилтрансферазы [GALT]): 3-6 высушенных на фильтровальной бумаге пятен крови отправляют в лабораторию.

Специфические анализы (на содержание галактозы, галактозо-1-фосфата, энзимологические исследования, мутационный анализ): 2 мл крови с консервантом ЭДТА, взятой предпочтительно через 30 минут после вскармливания молоком; отправляют в лабораторию при комнатной температуре, в случае необходимости (например, на протяжении недели) хранят при комнатной температуре (не охлаждают, так как можно вызвать гемолиз; не замораживают, так как киназа связана с мембраной).

Большинство врожденных нарушений метаболизма галактозы можно распознать путем определения концентраций галактозы и активности галактозо-1-фосфат-уридил-трансферазы в засушенных пятнах крови (карта Гатри), что является составной частью неонатального скрининга в большинстве западных стран. У детей с патологическими скрининг-тестами требуется проведение более точных анализов. Количественное определение содержания галактозы производится в плазме (нормальный уровень < 3 мг/дл), тогда как количественное определение содержания галактозо-1-фосфата проиводится в эритроцитах (нормальный уровень < 0,3 мг/дл).

Сахара

Проба: минимум 10 мл мочи; консервируют пробу двумя каплями хлороформа; пробу немедленно отправляют в лабораторию при температуре окружающей среды.

Для выявления патологической экскреции сахаров в моче при дефекте почечных канальцев и при диагностике некоторых нарушений метаболизма углеводов полезным может быть применение тонкослойной хроматографии. К числу сахаров, которые обычно подвергаются исселедованию, относятся глюкоза, галактоза, фруктоза и лактоза.