Ход работы

1. К 1 мл концентрированной соляной кислоты осторожно, под тягой, по стенке пробирки добавляют 1 мл раствора яичного альбумина так, что­бы не смешивать жидкости.

На границе соприкосновения двух жидкостей образуется белое коль­цо выпавшего в осадок белка. При осторожном смешивании жидкостей оса­док не исчезает.

2. В двух других пробирках проводят такие же опыты, но с концен­трированными соляной и азотной кислотами. Результаты наблюдений вно­сят в табл. 5.

Г. Денатурация белков органическими кислотами

Белки из растворов необратимо осаждают органическими кислотами. Трихлоруксусная кислота - CCI₃COOH (ТХУ) и сульфосалициловая кислота С₆Н₃(ОН)(СООН)SО₃Н являются очень чувствительными специфическими ре­активами на белок и широко применяются как денатурирующие соединения.

Денатурация белков органическими кислотами основана на их спо­собности нейтрализовать заряд молекулы белка и разрушать ее пространственную структуру.

Осаждение белков трихлоруксусной кислотой часто применяют для полного удаления белков из биологических жидкостей (например, из сыворотки крови).

 

Ход работы

1. В пробирку вносят 1 мл раствора белка и добавляют несколь­ко капель 10 %-й трихлоруксусной кислоты. Выпадает осадок белка.

2. В другую пробирку вносят 1-2 мл раствора белка и добавля­ют несколько капель сульфосалициловой кислоты. Наблюдают выпадение белка в осадок. Результаты наблюдений вносят в табл. 5.

Д. Денатурация белков солями тяжелых металлов

При действии небольших концентраций солей тяжелых металлов (Сu⁺², Рв⁺², Аg⁺², Аs⁺³, Нg⁺², Вi⁺³) на растворы белка происходит денатурация белковых молекул. Осаждение денатурированного белка обусловлено адсорбцией иона тяжелого металла на поверхности белко­вой молекулы и образованием нерастворимых в воде комплексных сое­динений. Кроме того, тяжелые металлы снимают электрический заряд и глубоко изменяют вторичную и третичную структуры макромолекул белка, образуют связи между функциональными группами молекул.

Ход работы

1. К 2 мл раствора яичного альбумина добавляют 5 капель 1 %-го раствора сульфата меди. Выпадает осадок, который растворяется в избытке (7-10 мл) раствора этой соли.

2. К 2 мл раствора яичного альбумина добавляют 5 капель 0,5 %-го раствора ацетата свинца. Выпадает осадок, который растворяется так­же при избытке раствора этой соли. Результаты наблюдений заносят в табл. 5.

Е. Денатурация белков специфическими реактивами

Необратимое осаждение белков можно вызвать воздействием на ихрастворы различными специфическими реактивами: танином (сложным эфиром глюкозы и пяти молекул метадигалловой кислоты), пикриновой кислотой, гексацианоферратом (II) калия К₄[Fе(СN)₆] и др.

Механизм осаждения белков этими реактивами заключается в об­разовании нерастворимых комплексных соединении с азотистыми группами белков.

 

Ход работы

 

Осаждение белков танином.

В пробирку вносят 1 мл раствора яичного альбумина, добавляют несколько капель 1 %-й уксусной кислоты и 1 мл насыщенного раствора танина. Выпадает осадок желтовато-серого цвета.

 

Осаждение белков пикриновой кислотой.

К 1 мл раствора яичного альбумина, подкисленного уксусной кислотой, добавляют несколько капель насыщенного раствора пикри­новой кислоты. образуется желтоватый осадок белка.

Осаждение белков гексацианоферратом (II) калия.

К 1 мл раствора яичного альбумина, подкисленного уксусной кислотой, по каплям добавляют 5 %-й раствор гексацианоферрата (II) калия. Выпадает осадок белка.

Результаты наблюдений вносят в табл. 5.

 

Таблица 5

 

№ опыта	Исследуемый материал	Денатурирующий фактор и условия его воздействия	Результаты опыта

 

Контрольные вопросы

1. Что такое денатурация белков?

2. Какие денатурирующие факторы вы знаете и в чем особенности их действия?

3. Какие структуры белковых молекул изменяются при денатурации?

4. Является ли денатурация обратимым процессом?

5. Как изменяются физико-химические и биологические свойства белков при их денатурации?