Студопедия — Некоторые распространенные типы хроматографии
Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Некоторые распространенные типы хроматографии






В эксклюзионной хроматографии, которую также называют гель-фильтрацией, колонка заполняется микроскопическими пористыми гранулами сорбента. Когда смесь молекул растворяется в жидкости и наносится на колонку, большие молекулы не могут попасть внутрь поры и сравнительно быстро проходят между гранулами. В то же время, маленькие молекулы проникают внутрь пор и выходят из колонки позже. Таким образом иногда удается разделить белки только за счет их разного размера и собрать фракции, содержащие индивидуальные белки.

В аффинной хроматографии к гранулам сорбента ковалентно пришита специальная молекула, обычно антитело, которая способно специфически связывать очищаемый белок. Из всех белков, которые наносится на колонку, только один этот белок узнается и задерживается на сорбенте. Чтобы потом смыть очищенный белок с колонки, применяется буфер с высокой концентрацией соли или с высокой кислотностью, который разрушает взаимодействия между антителом и белком.

В ионообменной хроматографии, гранулы сорбента химически модифицированы так, чтобы нести постоянный положительный или отрицательный электрический заряд (обычно это модификация аминными или сульфатными группами). Заряд подбирается так, чтобы интересующий исследователей белок задерживался на колонке. Например, если заряд на сорбенте положительный, он будет связывать отрицательно заряженные белки. Эта техника называется «анионообменной хроматографией». Отрицательно заряженный сорбент связывает положительно заряженные молекулы (это называется «катионообменной хроматографией»). После того, как белок отделили от примесей, его смывают с ионообменной смолы буфером с высокой концентрацией соли, которая разрушает ионные взаимодействия.

Этот набор разработан, чтобы продемонстрировать ученикам основные принципы эксклюзионной хроматографии, метода разделения молекул в зависимости от их размера. В нем используются окрашенные молекулы гемоглобина и витамина В12. Гемоглобин (темно-красный) намного больше, чем витамин В12 (розовый) и, следовательно, протекает через колонку намного быстрее. Ученики могут легко зрительно наблюдать за разделением этим двух молекул по мере их прохождения через колонку.

 

 







Дата добавления: 2015-09-07; просмотров: 392. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!



Кардиналистский и ординалистский подходы Кардиналистский (количественный подход) к анализу полезности основан на представлении о возможности измерения различных благ в условных единицах полезности...

Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...

Композиция из абстрактных геометрических фигур Данная композиция состоит из линий, штриховки, абстрактных геометрических форм...

Важнейшие способы обработки и анализа рядов динамики Не во всех случаях эмпирические данные рядов динамики позволяют определить тенденцию изменения явления во времени...

Мелоксикам (Мовалис) Групповая принадлежность · Нестероидное противовоспалительное средство, преимущественно селективный обратимый ингибитор циклооксигеназы (ЦОГ-2)...

Менадиона натрия бисульфит (Викасол) Групповая принадлежность •Синтетический аналог витамина K, жирорастворимый, коагулянт...

Разновидности сальников для насосов и правильный уход за ними   Сальники, используемые в насосном оборудовании, служат для герметизации пространства образованного кожухом и рабочим валом, выходящим через корпус наружу...

Репродуктивное здоровье, как составляющая часть здоровья человека и общества   Репродуктивное здоровье – это состояние полного физического, умственного и социального благополучия при отсутствии заболеваний репродуктивной системы на всех этапах жизни человека...

Случайной величины Плотностью распределения вероятностей непрерывной случайной величины Х называют функцию f(x) – первую производную от функции распределения F(x): Понятие плотность распределения вероятностей случайной величины Х для дискретной величины неприменима...

Схема рефлекторной дуги условного слюноотделительного рефлекса При неоднократном сочетании действия предупреждающего сигнала и безусловного пищевого раздражителя формируются...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2024 год . (0.012 сек.) русская версия | украинская версия