Определение количества холина

Цель работы: колориметрическое определение холина в растительном материале.

Оборудование, реактивы и материалы: конические колбы вместимостью 50, 100, 250 см³, склянка Тищенко для концентрированной серной кислоты, аппарат Сокслета, аналитические весы, пипетки, водяная баня, воронка Бюхнера; абсолютный метиловый спирт (метиловый спирт сушат в течение 1 – 2 суток безводным СuSO₄, фильтруют через складчатый фильтр, отгоняют в приборе, изолированном от влаги воздуха (рисунке с. 72): 1 – водяная баня; 2 – склянка Тищенко для концентрированной серной кислоты.), хранят в плотно закрытой склянке); насыщенный раствор гидрата окиси бария (около 5 – 5.5 г в 100 см³ воды, на дне склянки должно быть несколько нерастворившихся прозрачных кристаллов, раствор хранят в герметически закрытой склянке; ледяная уксусная кислота; раствор тимолфталеина в этиловом спирте с массовой долей 1 %; ацетон; обезвоженный фосфат натрия Na₂HPO₄ (высушивают в сушильном шкафу при 100 – 105^оС); стандартный раствор холинхлорида (холинхлорид перекристаллизовывают 4 раза из абсолютного этилового спирта и сушат в вакууме 48 ч при 84^оС в ампуле, которую после сушки запаивают и взвешивают, для работы ампулу осторожно вскрывают, содержимое ее растворяют в определенном объеме дистиллированной воды, пустую сухую ампулу взвешивают и по разности устанавливают содержание холинхлорида в исходном растворе); раствор соли Рейнике с массовой долей 2 % (NH₄[Cr(NH₃)₂(CNS)₄]^.H₂O); вода, насыщенная при 3^оС рейникатом холина (к небольшому количесву раствора холинхлорида добавляют 2 – 3 см³ раствора соли Рейнике и оставляют на 3 ч в холодильнике, выпавший осадок рейниката холина отфильтровывают на холоду через стеклянный фильтр, осадок после промывания охлажденным метиловым спиртом и водой со льда переносят в холодную воду, где он, незначительно растворяясь, образует насыщенный раствор, при промывании воду осторожно декантируют с осадка или профильтровывают ее через фильтр); этиловый спирт насыщенный при 3 ^оС рейникатом холина (насыщение проводят также, как и воду, перед употреблением спиртовой раствор следует профильтровать на холоду); растительный материал.

Теоретические сведения

Холин (витамин В₄) – относится к группе витаминоподобных водорастворимых веществ. Холин поступает в организм человека с пищей. Им богаты мясо и продукты, получаемые из злаков. Потребность в холине взрослого человека составляет 250-600 мг в сутки. Она частично покрывается за счет синтеза холина кишечной микрофлорой.

Всасывание холина происходит в тонком кишечнике путем простой диффузии. В стенке кишечника он фосфорилируется до фосфохолина и участвует в образовании холинофосфатидов. В составе липопротеидов холин с кровью разносится по тканям.

В клетках холин участвует в синтезе фосфатидов, ацетилхолина и является донором метильных групп при реакциях трансметилирования.

Определение холина производят путем осаждения его комплексной хромовороданистой солью Рейнике в виде рейниката холина.