Проведение реакции. Приготовление препарата слюны (выполняет дежурный для всей группы)

Приготовление препарата слюны (выполняет дежурный для всей группы).

Собирают 1 мл слюны в мерную пробирку и доводят дистиллированной водой до метки 10 мл, хорошо перемешивают.

Чтобы исключить протекание ферментативной реакции без влияющих факторов, их необходимо вносить в пробирки в первую очередь.

	Опыт 1, капли	Опыт 2, капли	Контроль, капли
Дистиллир. вода 0, 9% раствор NaCl 1% раствор CuSО4 Препарат слюны 1% раствор крахмала	–– ––	–– ––	–– ––
	Перемешивают. Инкубируют при температуре 37°С в течение 10 мин

Проверка хода гидролиза крахмала:

По истечении рекомендуемого времени инкубации готовят 3 дополнительные пробирки с водой по 1 мл в каждой, добавляют 1‑ 2 капли реактива Люголя и прибавляют по 5 капель содержимого опытных пробирок. Сравнивают окраску раствора в дополнительных пробирках:

если существенной разницы в окраске нет, то инкубацию опытных проб продлевают на 5‑ 15 минут, после этого вновь проверяют ход гидролиза крахмала,

если имеются видимые отличия в окраске, то работа закончена.

После окончания работы сравнивают интенсивность окраски раствора в пробах, отмечают, как изменилась скорость реакции при воздействии веществ. Проба с добавлением воды является контрольной.

Оформление работы

Отмечают принцип метода и ход работы. Результаты работы оформляют в виде таблицы. В выводах сравнивают скорость реакции в пробах и отмечают причину различий.

Пробы	Влияющий фактор	Окраска	Относительная скорость реакции
Опыт 1 Опыт 2 Контроль

Тема 3.2.
Классификация и номенклатура ферментов.
Использование ферментов в медицине

Актуальность

Ферменты – белковые молекулы, выполняющие в живой клетке функции биокатализаторов. Знание принципов классификации ферментов необходимо для изучения обмена веществ, для понимания роли ферментов в осуществлении биохимических реакций.

Исследование ферментов дает возможности их синтеза и использования в лечебных или диагностических целях.

Цель

Знакомство с классификацией ферментов.

Знакомство с методами обнаружения ферментов в тканях и биологических жидкостях, освоение метода определения активности амилазы в сыворотке крови.

Вопросы для самоподготовки

1. Роль ферментов и коферментов в катализе.

Коферментные формы витаминов (ТДФ, ФМН и ФАД, НАД⁺ и НАДФ⁺, ПФ).

Принципы современной классификации и номенклатуры ферментов: оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы, лиазы, изомеразы, лигазы (синтетазы).

Характеристика каждого класса ферментов по плану:

название и номер класса;

биохимическая роль;

основные подклассы (1-3 подкласса);

основные коферменты данного класса;

правила систематического названия ферментов;

напишите примеры биохимических реакций данного класса ферментов (1-3 реакции).

Практическое использование ферментов в медицине: энзимодиагностика и энзимотерапия. Примеры.

Применение ингибиторов ферментов в качестве лекарственных средств. Примеры.

Энзимопатии, первичные и вторичные формы. Примеры. Роль отсутствия коферментов в развитии энзимопатий.

Определение активности амилазы в сыворотке крови и моче. Принцип метода. Клинико-диагностическое значение и нормальные величины.