Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Работа 3. Определение углеводов методом тонкослойной хроматографии




 

Качественной характеристикой в методе тонкослойной хроматографии является показатель Rf. Сравнивая Rf свидетелей и исследуемых углеводов, проводят их идентификацию.

Реактивы и материалы:

ü Исследуемый раствор – сок

ü 5%-ный раствор глюкозы, фруктозы, мальтозы, лактозы, сахарозы

ü Элюент: н-бутанол – уксусная кислота – вода (60 мл – 15 мл – 25мл)

ü Реагент: н-бутанол – вода – уксусная кислота – фосфорная кислота – анилин – дифениламин (60 мл – 25 мл – 15 мл – 10 мл – 1 мл – 2 г)

ü Пластинки силуфола

Методика проведения анализа

На пластинку наносят 1 мкл 5%-ного водного раствора сахаров в виде сплошной полосы, отступая от бокового и нижнего краев пластинки на расстояние 10 мм. Пластинку вертикально помещаю в камеру, которая заполнена разделяющей смесью (элюентом) до высоты 5 мм.

Пластинку выдерживают в камере до тех пор, пока высота подъема фронта восходящего растворителя не достигнет отмеченной длины разделительного пути. Разделительный путь (расстояние от линии старта до фронта растворителя) равен 90 мм. По окончании хроматографического разделения пластинку вынимают из камеры и сушат при комнатной температуре до полного испарения остатков растворителей.

Затем разделение повторяют в той же системе растворителей. Высушенные пластинки погружают в реагент. Пластинки снова высушивают и проявляют в термостате при температуре 120°С в течение 5 мин. Проявленные фракции имеют различную окраску на белом фоне пластинок.

Идентификацию сахаров проводят с помощью свидетелей и по значениям Rf. Данные занося в таблицу в графу для расчетных значений.

Таблица 3.1

Результаты тонкослойной хроматографии

Углеводы Цвет пятна Значение Rf
теоретическое расчетное
Моносахариды:      
Глюкоза Оливково-серый 0,36  
Фруктоза Красный 0,37  
Ксилоза Зеленый 0,45  
Дисахариды:      
Мальтоза Серо-голубой 0,25  
Лактоза Оливково-серый 0,20  
Сахароза Коричневый 0,28  
Исследуемое вещество      

 

По результатам исследования делается вывод о структуре исследуемого вещества.

 







Дата добавления: 2015-08-12; просмотров: 1609. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!


Рекомендуемые страницы:


Studopedia.info - Студопедия - 2014-2022 год . (0.001 сек.) русская версия | украинская версия