Работа 4. Определение аминного азота методом формольного титрования

 

В производственной практике широко пользуются показателем «аминный азот», который отражает преимущественно содержание аминогрупп аминокислот и низкомолекулярных пептидов.

В основе метода определения аминного азота формольным титрованием лежит взаимодействие аминокислоты с формалином, в результате которого образуются метиленовые соединения, представляющие собой кислоты:

 

 

Образовавшиеся кислоты могут быть оттитрованы щелочью. Реакция протекает в соответствии со следующим уравнением:

 

 

Содержание аминных групп рассчитывают по количеству щелочи, израсходованной на титрование.

 

Реактивы и материалы:

ü Формалин – 40%-ный раствор

ü 1%-ный спиртовой раствор фенолфталеина

ü NaOH – 0,5 н.; 0,05 н.

ü Индикатор – бромтимоловый синий

ü Глицин – 0,5 г

Методика проведения анализа

В мерную пробирку (объемом 10 мл) помещают 0,5 г глицина, доводят до 10 мл водой, растворяют. Содержимое пробирки переносят в плоскодонную колбу (количественно), объемом 200 мл. Добавляют 5 капель бромтимолового синего, при этом раствор окрашивается в желтый цвет. Затем добавляют 3 капли 0,05 н. NaOH до желто-зеленой окраски (для нейтрализации раствора, рН 7,0). К нейтрализованному раствору прибавляют 2 мл формольной смеси (25 мл 40%-ного раствора формалина и 1 мл 1%-ного спиртового раствора фенолфталеина), после чего раствор титруют 0,5 н. NaOH до ярко-синего окрашивания (рН 9,7).

Параллельно проводят аналогичный опыт с водой (10 мл) – контроль. При добавлении индикатора окраска воды зеленая (не подщелачиваем). После добавления формольной смеси раствор становится желтым. Титруем до рН 9,7.

Расчет аминного азота ведут по формуле:

 

Х = (а - б) · Т · 0.7

 

где Х – количество аминного азота, содержащегося в 2 см³ исследуемого образца; а – количество см³ 0,5 н. NaOH, израсходованного на титрование испытуемого образца; б – количество см³ 0,5 н. NaOH, израсходованного на титрование контрольного образца; Т – поправка к титру; 0,7 – коэффициент пересчета, при использовании 0,05 н. NaOH (1 см³ 0,05 н. NaOH соответствует 14 · 0,05 = 0,7).