Контроль качества дезинфекции объектов больничной среды

При бактериологическом исследовании микробной обсемененности поверхности предметов и изделий медицинского назначения (приборы и аппараты медицинские, оборудование санитарно-гигиеническое, средства перемещения и перевозки, установки стоматологические, оборудование стоматологическое, зубопротезное, оториноларингологическое и т.д.) определяют наличие:

1. Стафилококков

2. БГКП

3. Синегнойной палочи (Ps.аeruginosa)

4. Сальмонеллы

Отбор проб с поверхности различных объектов осуществляется методом смывов. Взятие смывов производят стерильными ватными тампонами на палочках, помещенными в стерильные пробирки. Для увлажнения тампонов в пробирки наливают по 2,0 см³ стерильной 0,1% пептонной воды. Тампоны увлажняют непосредственно перед использованием, берут смыв с объекта и погружают в раствор в той же пробирке.

При контроле мелких предметов смывы проводят с поверхности всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы производят в нескольких местах исследуемого предмета с площади примерно 100 cм².

5.5.2.1. Выявление стафилококков. Из каждой отобранной пробы производят посев 0,2-0,3 см³ смывной жидкости в пробирку, содержащую 5,0 см³ 6,5 % солевого бульона. Засеянные пробирки инкубируют 24 часа при 37 ^оС, после чего производят высев на ЖСА или МЖСА.

Посевы инкубируют 48 часов при 37 ºС. Отбирают подозрительные колонии (круглые, блестящие, выпуклые, пигментированные, с положительной и отрицательной лецитовителлазной реакцией). Подозрительные колонии (не менее 2-х) микроскопируют и пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром и инкубируют 24 часа при 37 ºС. Идентификацию проводят по морфологическим, тинкториальным свойствам и наличию (отсутствию) плазмокоагулирующей активности. По Граму стафилококки окрашиваются положительно (фиолетово-синие кокки, располагающиеся гроздьями). Плазмокоагулирующую активность выявляют в реакции коагуляции плазмы (РКП). При выявлении только плазмокоагулирующей или только лецитовителлазной активности выделенной культуры, определяют ферментацию маннита и мальтозы в анаэробных условиях, гемолитическую активность, хлопьеобразование, образование ацетоина. При необходимости проводят фаготипирование выделенных культур, определяют чувствительность к антибиотикам, бактериофагам и дезинфектантам.

5.5.2.2. Выявление бактерий группы кишечной палочки (БГКП). Производят посев 0,2-0,3 см³ в пробирку с 5,0 см³ среды Кесслера. Через 24часа инкубирования при 37 ºС делают пересев на среду Эндо. На среде Эндо колонии БГКР — красных с металлическим блеском или без него, розовых с тёмным центром, розовых, слизистых, бледно-розовых готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют. Пересевают на среду Гисса с лактозой, инкубируют 24 часа при 37 ºС. Лактозаотрицательные колонии изучают для установления их возможной принадлежности к патогенным энтеробактериям.

5.5.2.3. Выявление синегнойной палочки.Производят высев на среду Эндо. Подозрительные колонии (с ровными, слегка волнистыми краями, гладкой блестящей поверхностью с характерным приятным запахом и пигментом (или непигментированные) пересевают на скошенный агар. Идентификацию Ps.аeruginosa производят по следующим свойствам: грамотрицательные, подвижные палочки, оксидазаположительные, растущие при 42 ^оС градусах, не ферментирующие глюкозу.

5.5.2.4. Обнаружение сальмонелл. По 0,2-0,3 см³ смывной жидкости засевают в пробирку с 5,0 см³ одной из сред обогащения (магниевой, селенитовой или среды Раппапорта-Вассилиадиса). После инкубирования в течение 18-20 часов при 37 ºС делают пересев на среду Эндо и висмут-сульфит агар. Затем отбирают подозрительные колонии и идентифицируют.

Норматив: в 1г (см³) образца должны отсутствовать стафилококки, бактерии семейства Enterobacteriaceae и Ps.аeruginosa.