Определение количества крахмала
Цель работы: определение содержания крахмала в растительном сырье.
Оборудование, реактивы, материалы: аналитические и технические весы, поляриметр или рефрактометр, центрифуга, воронки с бумажными фильтрами, водяная баня, мерные колбы вместимостью 100 см3, цилиндры вместимостью 10, 15, и 50 см3; раствор соляной кислоты с массовой долей 1, 124 %, раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты с массовой долей 4 %; мука, зерно.
Теоретические сведения
Крахмал – главное запасное питательное вещество растений, представляет собой полимер глюкозы, в котором остатки глюкозы соединены a-1, 4 и a-1, 6-гликозидными связями. При кислотном или ферментативном гидролизе крахмал расщепляется по схеме: Декстринами называют промежуточные продукты гидролиза крахмала различной молекулярной массы, растворяющиеся в воде. Разнообразные методы определения крахмала основаны на его расщеплении и учете образовавшихся промежуточных или конечных продуктов гидролиза. Одним из наиболее быстрых, хотя и менее точных, методов определения крахмала является метод Эверса, по которому гидролиз ведут в строго контролируемых условиях до эритродекстринов. Поляриметрическое определение основано на способности эритродекстринов вращать плоскость поляризации. Прозрачный фильтрат наливают в трубку поляриметра с углом вращения a. Массовую долю крахмала Х, %, рассчитывают по формуле
где a – угол вращения,..°; Р – масса навески муки, г; l – длина трубки, дм; – удельное вращение декстринов пшеницы +182, 0 °; 0, 3469 – величина переводного коэффициента с круговой шкалы поляриметра на нормальную шкалу сахариметра (одно деление нормальной шкалы равно 0, 3496°).
Рефрактрометрическое определение крахмала основано на учете продуктов гидролиза крахмала по сухим веществам, перешедшим в раствор. В этом случае необходимо поставить контроль на общее содержание водорастворимых сухих веществ испытуемого материала и используемых в анализе реактивов.
Ход работы Массу навески муки или мелко размолотого зерна 5 г переносят в мерную колбу на 100 см3 и приливают 50 см3 раствора соляной кислоты с массовой долей 1, 124 %. Содержимое колбы тщательно взбалтывают и нагревают на водяной бане при температуре кипения 15 мин. При этом гидролиз идет до образования эритродекстринов. По истечении этого времени колбу вынимают, охлаждают под струей холодной воды до 20 0С и прибавляют для осаждения белков 10 см3 раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты с массовой долей 4 %. Затем содержание колбы хорошо перемешивают и фильтруют. Прозрачный фильтрат берут для определения удельного вращения плоскости поляризации поляриметром или находят содержание сухих веществ в фильтрате рефрактометром. Контрольное определение проводят так же, как опытное, кроме гидролиза на кипящей бане, который заменяют настаиванием при комнатной температуре. Расчет крахмала ведут по разности между опытным и контрольным определениями.
Оформление результатов Проводят сравнение данных, полученных при определении поляриметрическим и рефрактометрическим методом. Полученные экспериментальные и расчетные данные вносят в таблицу.
Контрольные вопросы и задания
1. Приведите структурную формулу крахмала. Какие продукты образуются в результате кислотного гидролиза крахмала? 2. Какие методы определения содержания крахмала Вы знаете? 3. Какое количество глюкозы должно получиться при гидролизе 0, 5 г крахмала? 4. b-Амилазой прогидролизовано 20 г амилозы. Какой образуется сахар? Сколько?
Лабораторная работа № 35
|